结核杆菌特异性酶联免疫斑点技术在HIV感染人群中的应用

我国艾滋病病毒(HIV)感染人群中结核病的发病率高,造成了严重的疾病负担。提高潜伏结核和活动性结核的诊断准确性,对控制HIV病人中结核病的治疗和控制至关重要。该文总结了近年来出现、发展并完善的一种新的结核诊断技术,即结核杆菌特异性酶联免疫斑点技术,及其在HIV人群中的相关研究结果,并着重对该技术在潜伏结核和活动性结核的诊断、治疗效果监测以及结核相关性免疫重建炎症反应综合征中的应用进行了评价。

酶联免疫斑点检测（TSPOT-TB）结核分枝杆菌与结核病的相关性分析

目的研究酶联免疫斑点（T SPOT-TB）检测结核分枝杆菌特异性T细胞与结核病的相关性分析。方法用酶联免疫宽点技术测定早期分泌性抗原靶ESAT-6和ESAT-10特异性T细胞，由传染病研究所证实或可疑的72例病人作为实验对象，并将TSPOT—TB的测定结果和传统的诊断方法相比较。结果64例肺结核或肺外结核病人中，TSPOT—TB方法检测到63例，表明其灵敏度为98．4％。其中的45例病人同时做结素实验，仅有40例呈阳性（89％），而TSPOT—TB测定100％为阳性（P=0．056）。72例病人中，有6人被排除活动性结核，其中5（83．3％）人TSPOT-TB实验阴性，因此可以在可疑活动性结核病人快速排除非结核病人。结论TSPOT-TB实验对检测结核是一种灵敏的方法，对现在低发病率背景下检测结核的诊断程序及治疗监测是一种有用的补充。

酶联免疫电转移印迹技术(EITB)检测抗EB病毒特异性DNA酶抗体

本研究用酶联免疫电转移印迹技术,检测血清中抗 EB 病毒特异性 DNA 酶抗体,试图建立一种可常规应用于临床的检测方法。结果表明:50例鼻咽癌患者血清中,26例在52～59KD 范围内出现由4条阳性显带融合而成的阳性反应区;健康成人和其他头颈部肿瘤患者血清无一例在此区域内出现阳性显带,表明其特异性甚高。

酶联免疫吸附法与免疫层析技术检测梅毒的特异性与灵敏度对比研究

目的分析酶联免疫吸附法与免疫层析技术检测梅毒的特异性与灵敏度情况。方法选择2016年2月至2017年2月来我院就诊的TP感染患者血清样本120例,以TP-PA法为金标准,分别对以上患者行血清TP-ELISA法、GICA法检测。结果 TP-ELISA法在梅毒Ⅰ期、Ⅲ期的检出率与总检出率结果比较接近金标准TP-PA法,而明显高于GICA法,对比差异明显(χ~2=15.2836,P<0.001;χ~2=32.0777,P<0.001)。三种方法在梅毒Ⅱ期检出率结果差异无统计学意义(P>0.05)。TP-PA诊断结果阳性样本18例,阴性样本102例,阳性率为15.00%;TP-ELISA法诊断结果呈阳性17例,阳性率为14.17%;GICA法诊断结果呈阳性20例,阳性率为16.67%(χ~2=2.0724,P=0.3548)。TP-ELISA法诊断梅毒的特异性为99.01%,阳性预测率为94.12%均明显高于GICA法,差异有统计学意义(χ~2=4.6837,P=0.0305;χ~2=4.5973,P=0.0320),而TP-ELISA法诊断梅毒的灵敏度为88.88%,阴性预测率为98.05%也均明显高于GICA法,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TP-ELISA法不仅在梅毒分期诊断检出率较高,在诊断灵敏度、特异性、阴阳性预测值均优于CICA法,可作为梅毒诊断首选筛查方法。

酶联免疫斑点试验在脊柱结核辅助诊断中的应用价值

目的 评价酶联免疫斑点(ELISPOT)试验在脊柱结核诊断中的应用价值.方法 选择2013年5月至2017年1月在安徽省胸科医院确诊为脊柱结核的患者98例(脊柱结核组)和非结核病患者77例(非结核组).采用ELISPOT检测脊柱结核组和非结核组外周血单个核细胞,观察斑点形成细胞的个数;患者同时接受结核菌素皮肤试验(PPD)及血结核抗体(TB-Ab)检测,其中PPD皮肤试验分别采用红肿硬结平均直径≥5mm和≥15 mm两种标准,标记为PPD-5和PPD-15,并对比分析以上检测方法的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值.结果 ELISPOT在脊柱结核诊断中的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为93.88％(92/98)、92.21％(71/77)、93.88％(92/98)和92.21％(71/77).PPD-5和PPD-15皮肤试验的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为86.73％(85/95)和52.04％(51/98)、74.03％(57/77)和89.61％(69/77)、80.95％(85/105)和86.44％(51/59)、81.43％(57/70)和59.48％(69/116).血TB-Ab检测的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为48.98％(48/98)、61.04％(47/77)、61.54％(48/78)和48.45％(47/97).血ELISPOT的敏感度、阴性预测值高于PPD-15试验(x2=43.47,P＜0.01;x2 =28.65,P＜0.01);特异度、阳性预测值、阴性预测值高于PPD-5试验(x2 =9.07,P＜0.01;x2=7.45,P＜0.01;x2=4.98,P=0.026);敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均高于血TB-Ab试验(x2=48.40,P＜0.01;x2=20.88,P＜0.01;x2=29.59,P＜0.01;x2=44.97,P＜0.01),以上差异均有统计学意义.非结核组标本中早期分泌抗原靶蛋白6 (ESAT-6)和培养滤液蛋白10(CFP-10)特异性T淋巴细胞分泌γ干扰素的淋巴细胞斑点数[中位数(四分位数),M(Q1,Q3)]分别为0(0,3)和0(0,2)个,脊柱结核组标本中ESAT-6和CFP-10特异性T淋巴细胞分泌γ干扰素的淋巴细胞斑点数分别为29.00(9.57,57.75)和20.00(7.50,73.75)个,脊柱结核组均高于非结核组,差异均有统计学意义(U值分别为492.00和427.00,P值均＜0.01).结论 ELISPOT应用于脊柱结核的诊断有良好的敏感度和特异度,可作为脊柱结核感染辅助诊断的有效方法.

时间分辨荧光免疫技术在梅毒特异性抗体筛查中的应用研究

目的探讨时间分辨荧光免疫技术(TRFIA)在梅毒特异性抗体检测中的应用价值。方法收集240例梅毒患者和150例健康者血清标本,采用TRFIA、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)进行梅毒特异性抗体检测,比较检测灵敏度、特异度及阳性率。结果TRFIA、TP-ELISA、TPPA检测灵敏度分别为100.00%、98.75%、97.92%,比较差异无统计学意义(P>0.05);特异度分别为99.33%、98.67%、100.00%。TRFIA检测假阳性率为0.67%,假阴性率为0.00%;TP-ELISA检测假阳性率为1.33%,假阴性率为1.25%,TRFIA检测假阳性率和假阴性率均低于TP-ELISA(P<0.05)。结论 TRFIA检测梅毒特异性抗体灵敏度和特异度高,结果准确可靠,可用于梅毒特异性抗体的常规筛查,值得推广应用。

国产结核分枝杆菌T细胞免疫反应检测试剂盒诊断结核病的临床试验研究

目的:评价国产结核分枝杆菌T细胞免疫反应检测试剂盒(简称“试验试剂盒”)在体外定性检测疑似结核病患者新鲜外周静脉抗凝血中结核分枝杆菌特异性T细胞免疫反应结果的检测效能。方法:采用国产试验试剂盒与已上市进口产品(简称“对照试剂盒”),针对2020年11月至2021年6月陕西省结核病防治院收治的335例及2021年7月至2022年6月第四军医大学第一附属医院收治的343例疑似结核病患者的新鲜外周静脉抗凝血进行检测效能的比较研究。结果:678例外周静脉抗凝血样本中,以对照试剂盒为参考标准,试验试剂盒检测的敏感度为93.97%(327/348),特异度为96.06%(317/330),一致率为94.99%(644/678);以病原学诊断和临床诊断结果为参考标准,试验试剂盒检测的敏感度为82.93%(277/334),特异度为81.69%(281/344),一致率为82.30%(558/678),对照试剂盒检测的敏感度为87.13%(291/334),特异度为83.43%(287/344),一致率为85.25%(578/678);204例病原学阳性患者外周静脉抗凝血样本中,试验试剂盒的结核病检出率为82.35%(168/204),对照试剂盒的结核病检出率为88.24%(180/204);130例病原学阴性患者的外周静脉抗凝血样本中,试验试剂盒的结核病检出率为83.85%(109/130),对照试剂盒的结核病检出率为85.38%(111/130);在344例非结核肺部疾病患者外周静脉抗凝血样本中,两种试剂盒检测的一致率为95.35%(328/344),试验试剂盒检测的特异度为81.69%(281/344),对照试剂盒检测的特异度为83.43%(287/344)。结论:国产结核分枝杆菌T细胞免疫反应检测试剂盒与进口已上市试剂盒,对疑似结核病患者新鲜外周静脉抗凝血体外检测结核分枝杆菌特异性T细胞免疫反应的结果具有较高的一致性,可以作为疑似结核病患者的替代诊断工具。

免疫滴金技术检测肾综合征出血热特异性抗体的研究

[目的 ] 为探索一种更为简便、快速、特异、灵敏的肾综合征出血热 (HFRS)抗体的检测方法。 [方法 ] 45 8例HFRS病人血清同时采用免疫滴金法 (CGIDA)与酶联免疫吸附法 (ELISA)对比检测特异性免疫球蛋M抗体 (抗HFRS -IgM )、间接免疫荧光法 (IFAT)对比检测特异性免疫球蛋G抗体 (抗HFRS -IgG) ,并以 2 0例发热待查、48例病毒性肝炎血清作对照。对 15 2例肾综合征出血热病人作肝功能检查。 [结果 ] 45 8例HFRS病人血清 ,以CGIDA法检测抗HFRS -IgM ,阳性 3 5 8例 ,与ELISA法作结果评价时 ,CGIDA灵敏度 79.9% ,特异度 10 0 % ;以CGIDA法检测抗HFRS-IgG ,阳性 3 86例 ,与IFAT法作结果评价时 ,CGIDA灵敏度 91.5 % ,特异度 10 0 %。 15 2例肝功能检查发现 86例ALT升高 ,占 5 6.6% ,胆红素升高者 3 3例 ,占 2 8.3 %。 [结论 ] CGIDA法检测HFRS特异性抗体分别与ELISA法及IFAT法对照 ,均有简便、快速、特异、灵敏之优点 ,检测抗HFRS -IgM ,CGIDA法敏感性差于ELISA法 ,但特异性较高 ;检测抗HFRS -IgG ,CGIDA法的灵敏度高于IFAT法。肝功能检查表明 ,肾综合征出血热并发肝损害发生率较高 ,临床表现轻 。

酶联免疫检测技术的研究进展及医学应用

酶联免疫吸附试验(enzyme linked im-munosorbent asssy, ELISA)。自70年代中期问世以来,由于它具有特异性强,操作简便等优点,已被广泛地应用于医学检验与基础研究。因此。

新疆维、汉族鼻咽癌患者LMP2A特异性T细胞免疫反应差异性研究

目的：探讨新疆维吾尔族、汉族鼻咽癌患者外周血潜伏膜蛋白2 A（LMP2 A）特异性T细胞免疫反应的差异性。方法选择114例鼻咽癌初治患者（维吾尔族48例，汉族66例）及120例健康志愿者（维吾尔族50例，汉族70例），治疗前抽取肘静脉血，分离外周血单个核细胞，采用酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测外周血中LMP2 A特异性T细胞（CTL）水平。比较鼻咽癌患者与健康志愿者、维吾尔族患者与维吾尔族健康志愿者、汉族患者与汉族健康志愿者、维吾尔族患者与汉族患者外周血 LMP2 A特异性 CTL频数的差异。结果鼻咽癌患者的外周血 LMP2A特异性CTL水平明显低于健康志愿者（P=0．0316）；维吾尔族鼻咽癌患者和汉族鼻咽癌患者分别与同民族健康志愿者比较，外周血 LMP2 A特异性 CTL频数均低于同民族健康志愿者（P=0．0329，P =0．0479），差异有统计学意义；汉族鼻咽癌的外周血中 LMP2A特异性 CTL水平亦高于维吾尔族鼻咽癌患者，差异有统计学意义（P =0．0227）。结论鼻咽癌患者对于 LMP2A特异性的T细胞免疫反应明显低于健康人群，这可能是 EBV潜伏感染，最终导致鼻咽癌发生的重要原因之一。

一项“粪便抗原酶联免疫检测”新方法的引进和应用

一项“粪便抗原酶联免疫检测”新方法的引进和应用温浩王云海周红霞熊海波杨文光丁兆勋（新疆医学院包虫病研究室）Ｐ．Ｓ．Ｃｒａｉｇ（Ｄｅｐｔ．ｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳａｌｆｏｒｄ，ＵＫ）１９８９年英国包虫病专家Ｃ...

酶联免疫法在食品卫生检测中的应用

酶联免疫法作为食品行业食品卫生检测中的一项重要技术,由于酶联免疫法的快速、有效、操作简单及特异性强等诸多优点,使其在食品农药残留量、食品微生物、食品毒素及转基因食品检测中具有很强的应用价值。本文以酶联免疫法相关理论知识为出发点,阐述了酶联免疫法在食品卫生检测中的应用。食品安全事件的频频发生,引起了全世界人们对于食品安全的关注,食品卫生检测作为保证食品质量安全的重要手段,引起食品行业相关人员的重视。

食管鳞癌NY-ESO-1、SSX-2和MAGE-A3的特异性CTL免疫反应

目的探讨食管鳞癌患者肿瘤特异性抗原(TSA)中纽约食管鳞状上皮癌抗原1(NY-ESO-1)、滑膜肉瘤X断裂点基因2(SSX-2)和黑色素瘤抗原A3(MAGE-A3)的特异性CTL免疫应答差异及其临床相关性及其在食管癌免疫治疗中的应用价值。方法收集51例新疆医科大学附属肿瘤医院2015年4月-2016年10月确诊食管鳞癌初治患者,用合成的NY-ESO-1、SSX-2和MAGE-A3特异性CTL抗原表位肽刺激食管鳞癌患者的外周血单个核细胞(PBMCs),采用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测分泌γ-干扰素(IFN-γ)的CTL细胞频率及强度,并分析其与食管鳞癌患者临床特征的关系。结果食管鳞癌患者外周血中NY-ESO-1、SSX-2和MAGE-A3特异性CTL反应频率分别为19.6%(10/51)、9.8%(5/51)和15.7%(8/51),反应强度分别为36.33、36.00和45.83SFC/106 PBMCs;其三者的特异性CTL反应频率及强度在食管鳞癌临床特征中的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论食管鳞癌患者可对肿瘤特异性抗原NY-ESO-1、SSX-2和MAGE-A3多肽产生特异性T细胞免疫反应,是否可作为食管癌免疫治疗靶点的指标尚需进一步研究。

用酶联免疫斑点法检测肝癌患者抗原特异性免疫应答能力

目的 研究HLA A2阳性肝细胞癌 (HCC)患者及正常人外周血CD8+T细胞对流感病毒抗原肽 (Flup58 66)的免疫应答能力。方法 用免疫磁珠法分离出HCC患者与正常人外周血CD8+T细胞 ,以照射后自体CD8- 外周血单个核细胞 (PBMC)或树突状细胞 (DC)作为抗原提呈细胞 (APC) ,加载Flu抗原肽 ,经 7d培养诱导 ,用酶联免疫斑点 (ELISPOT)法检测诱导后产生γ干扰素的效应CD8+T细胞频数。结果 当效应细胞为 5× 1 0 4个 /孔时 ,CD8- PBMC作为APC ,Flu抗原肽特异的CD8+T细胞频数在HCC患者组 (n =8)为 2 2个± 9个 /孔 ,正常人组 (n =1 2 )为 59个± 2 7个 /孔 ,两组间差异有非常显著意义 (P <0 0 1 ) ,但均为阳性应答 ;在 5名正常人 ,Flu抗原特异的CD8+T细胞频数以DC为APC时高于以CD8- PBMC为APC时 (P <0 0 5)。结论 HCC患者对Flup58 66的免疫应答程度虽较正常人低 ,但大多数中晚期HCC患者仍然具有对抗原肽产生特异免疫应答的能力。

浅析全自动酶联免疫分析系统的发展趋势

酶联免疫吸附试验（EusA）就是用一种抗原或抗体吸附到载体上，最后通过一定的方式使酶标记抗体或抗原与之结合或被阻止与之结合，然后通过显色来检测目标抗体或抗原是否存在的试验。由于ELISA成本低、操作较简便、灵敏度和特异性很高，因此已经成为现代检验医学基本的、常规的检测技术。

应用酶免疫技术 高效进行食品安全检测

一、酶免疫技术在食品检测中的应用。酶联免疫分析法和胶体金免疫层析试纸法都属于免疫分析方法,在国外已被用于食品安全检测,我国也已在临床检验中应用多年。酶联免疫分析法是将酶催化反应放大,抗原抗体特异性相结合,以酶标记的抗原或抗体作为主要试剂进行免疫测试。