结核特异性IL-2释放试验在结核感染中的诊断价值探讨

目的基于结核特异性白细胞介素2(IL-2)释放试验的结果,探讨IL-2在辅助诊断活动性结核(ATB)感染中的作用,以及用于监测治疗效果的价值。方法回顾性分析临床进行了结核感染排查的病例599例,其中确诊为活动性结核感染的病例128例,除外活动性结核感染的病例471例。(1)对与阴性对照共同孵育后上清中IL-2(N)检测值制作ROC工作曲线,分析失去抗原刺激后PBMCs持续释放IL-2的能力;(2)对抗原刺激后的响应值IL-2(T-N),制作ROC工作曲线,分析对活动性结核感染的诊断价值;(3)对比分析两组患者IL-2的阳性率;(4)观察响应值IL-2(T-N)阴性和阳性转化时间与疾病进程的依从性。结果IL-2(N)ROC曲线下面积为0.460,95%CI 0.402~0.516;IL-2(T-N)ROC曲线下面积为0.788,95%CI 0.745~0.832;在活动性结核感染组,IL-2(T-N)的阳性率显著高于非活动性结核感染组(χ^(2)=110.858,P<0.001);IL-2发生阴阳性转化的平均时间为3.1个月,时间区间为0.5~7个月。结论PBMCs失去抗原刺激后IL-2仅低水平分泌,对诊断ATB没有价值;结核分枝杆菌特异性抗原刺激后的响应值IL-2(T-N),用于诊断ATB具有一定准确性;IL-2(T-N)阴阳性转化的时间较短,在监测治疗效果方面存在一定价值,监测时间间隔建议为3个月。

结核特异性CD4^(+)HLA-G^(+)和CD4^(+)CD69^(+)T细胞对活动性肺结核诊断及疗效评估价值

结核病仍是我国乃至全球的重大公共卫生问题之一[1]。如何早期诊断并监测结核病疗效是控制结核病的主要挑战。痰培养、痰涂片阳性以及其转阴分别是诊断和监测抗结核疗效的实验室常用方法,但这些方法均存在灵敏度低、耗时长等缺点。因此,可快速、灵敏的代替方法亟需临床探寻。目前关于结核特异性生物标志物用于结核的诊断和疗效监测少有研究报道。

结核特异性细胞免疫反应试验在结核病中的诊断价值

目的通过对结核特异性细胞免疫反应（TB-IGRA）试验结果进行分析,探讨TB-IGRA在结核病诊断及鉴别诊断中的意义。方法收集甘肃省人民医院2014年1~12月住院的肺结核、疑似肺结核及肺外结核患者共1 366例,采用TB-IGRA检测结核分枝杆菌相关γ-干扰素,进行敏感度和特异性指标分析,与涂片镜检、结核抗体检测及结核分枝杆菌核酸检测方法进行比较。结果 TB-IGRA在肺结核及肺外结核病中的阳性检出率高达85.40%及86.20%,同时与涂片镜检、结核抗体检测及结核分枝杆菌核酸检测比较,其阳性率分别为82.90%、36.60%、11.00%和31.70%。TB-IGRA检测阳性率显著高于另3种方法。结论 TB-IGRA是检测结核分枝杆菌的快速敏感指标,且优于传统方法,在临床结核病诊断中有重要价值。

结核感染T细胞斑点试验中结核特异性抗原/植物血凝素比值对肺外结核的诊断价值

目的探讨结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)中结核特异性抗原(TBAg)/植物血凝素(PHA)比值在肺外结核(EPTB)诊断中的应用价值。方法选择2018年1月至2020年1月新乡医学院第一附属医院收治的522例疑诊的EPTB患者为研究对象,根据最终是否诊断为EPTB,将患者分为EPTB组(n=209)和非EPTB组(n=313)。2组患者均行T-SPOT.TB检测,比较2组患者T-SPOT.TB检测结果阳性率、PHA斑点形成细胞(sfc)数、早期分泌靶向抗原6(ESAT-6)sfc数、培养滤液蛋白10(CFP-10)sfc数及TBAg/PHA比值。比较ESAT-6 sfc数、CFP-10 sfc数及TBAg/PHA比值对EPTB的诊断价值。结果EPTB组和非EPTB组患者T-SPOT.TB检测结果阳性率分别为88.5%(185/209)和24.3%(76/313);EPTB组患者T-SPOT.TB检测结果阳性率显著高于非EPTB组(χ^(2)=206.840,P<0.05)。EPTB组患者T-SPOT.TB检测结果中ESAT-6 sfc数、CFP-10 sfc数、TBAg/PHA比值均显著高于非EPTB组,PHA sfc数显著低于非EPTB组(P<0.05)。根据受试者工作特征(ROC)曲线,TBAg/PHA比值诊断EPTB的特异度显著高于ESAT-6 sfc数和CFP-10 sfc数(P<0.05);ESAT-6 sfc数、CFP-10 sfc数、TBAg/PHA比值诊断EPTB的ROC曲线下面积和灵敏度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论TBAg/PHA比值可显著提高T-SPOT.TB诊断EPTB的特异度,在EPTB诊断中具有较好的应用前景。

应用抗原A60检测脑脊液中结核特异性抗体水平的初步研究

结核杆菌具有多种免疫活性成份,抗原A60是一种结核菌素精提物质,保留结核菌素多数稳定的抗原成份,能够在机体引起细胞和体液免疫反应。过去检测脑脊液(CSF)

体外免疫法制备结核特异性转移因子

以 PPD为抗原 ,猪脾细胞为效应细胞 ,经体外免疫后收集应答细胞 ,制备结核特异性转移因子。结果显示 ,体外法制备的结核特异性转移因子的主要免疫学指标 (皮内试验及白细胞粘附抑制试验 )与体内法制备的十分相近 ,为结核特异性转移因子的生产提供了新的途径。

刀豆素A、结核特异性转移因子联合应用对结核菌感染小鼠的保护效应

目的 研究刀豆素A(ConA)、结核特异性转移因子(PSm·tb-TF)联用对结核菌感染小鼠的保护效应及作用机制。方法 小鼠感染结核分枝杆菌后1天起,分别给予CbnA和/或Psm·tb-TF治疗,观察各组治疗后半数死亡时间、一定时间内的死亡率、脾脏内结核活菌数;检测脾细胞分泌γ干扰素(IFN-γ)、IL-4及腹腔巨噬细胞(P-Mφ)产生NO水平。结果与感染对照组、ConA单用组、PSm·tb-TF单用组比较,ConA联合PSm·tb-TF组小鼠半数死亡时间明显延长,28天内的死亡率明显降低,脾脏内结核活菌数明显减少。脾细胞分泌IFN-γ水平明显升高;IL-4水平降低。P-Mφ产生NO显著增加。结论 ConA、PSm·tb-TF联合应用对结核菌感染小鼠的保护效应明显好于单用ConA或PSm·tb-TF组。

腺苷脱氨酶和结核特异性抗体对结核性胸水诊断价值的探讨

腺苷脱氨酶和结核特异性抗体对结核性胸水诊断价值的探讨刘继高，杨炯（湖北省孝感地区卫校内科孝感４３２１００湖北医学院附属第一医院内科）结核性胸膜炎的诊断，目前主要依靠临床综合判断，国内虽有一些辅助检测指标，但诊断价值均有限。为了寻找对结核性胸水特异性高...

Dot-ELISA法检测结核分枝杆菌特异性抗原CFP10的改进和建立

目的建立一种检测结核分枝杆菌特异性抗原培养滤液蛋白10(culture filtrate protein 10,CFP10)的斑点酶联免疫吸附试验(dot enzyme linked i mmunesorbant assay,Dot-ELISA)方法。方法采用真空泵抽吸浓缩检测样本,改进Dot-ELISA用改进前的和改进后的Dot-ELISA方法检测同一批临床确诊的结核性胸膜炎的胸腔积液25例和非结核性胸腔积液31例,比较方法改进前后检测CFP10的敏感性和特异性;改变实验程序中的工作条件(硝酸纤维素膜的孔径、滴加样本的体积、真空泵抽吸的压力、不同的封闭液、温育的温度和时间及抗体的滴度),确定最适工作条件及重复性和稳定性。结果改进前检测CFP10的敏感性为76.0%,改进后并应用最适条件的敏感性为96.0%,差异有统计学意义(P=0.042);特异性和重复性、稳定性实验结果表明,所建立的Dot-ELISA法特异性和改进前差异无统计学意义(P=0.641),且稳定性和重复性较好。结论所建立的Dot-ELISA是一种比较敏感、特异和稳定的检测方法,能用于结核特异性抗原的检测和疾病的诊断。

论结核分支杆菌特异性细胞免疫反应在结核性胸膜炎的临床意义

分析结核分支杆菌特异性细胞免疫反应在结核性胸膜炎的临床意义。方法 选择我院和第四人民医院2017年01月-2021年12月收治的结核性腹膜炎患者(n=200,例)为实验组进行分析,同期选择2017年01月-2021年12月来我院进行常规健康体检患者(n=200,例)为对照组进行分析,所有患者进行结核分支杆菌特异性细胞免疫反应。对比两组患者的A.TB、TST以及TB-AB阳性检测率。结果 实验组患者A.TB检测(50.00%)以及TST检测(20.00%)阳性检测率高于对照组A.TB检测(20.00%)以及TST检测(5.00%),有差异,(P<0.05);两组患者TB-AB检测阳性率无差异,(P>0.05)。结论 临床采用结核分支杆菌特异性细胞免疫反应,可以有效的提高临床结核性胸膜炎的阳性诊断率。

基于Fine-Gray竞争风险模型预测老年肺结核结核特异死亡的列线图的构建

目的:建立预测老年肺结核结核特异性死亡的列线图模型。方法:选取2015年1月至2021年2月在河南省14家传染病医院确诊肺结核的544例老年(≥65岁)患者,随机分为训练集(n=435)和验证集(n=109)。在训练集中,利用累积发生函数(CIF)评估患者结核特异性死亡3 a和5 a的累积发生率。以结核特异性死亡为研究终点,采用Fine-Gray竞争风险模型筛选预后预测因素。绘制列线图,采用一致性指数(C指数)和校准曲线在训练集与验证集数据中评估模型预测性能。结果:训练集数据中结核特异性死亡3 a和5 a的累积发生率分别为9.0%、9.7%。Fine-Gray竞争风险模型分析结果显示年龄、治疗类型、胸片空洞和血清白蛋白水平是老年肺结核患者结核特异性死亡的预测因素,由此构建的列线图在训练集和验证集中,预测的C指数(95%CI)分别为0.815(0.798~0.832)和0.851(0.805~0.897),校准曲线显示预测的3 a和5 a死亡率与实际死亡率有着较好的一致性。结论:Fine-Gray竞争风险模型能有效识别老年肺结核结核特异性死亡的影响因素,以此为依据构建的列线图模型能有效预测患者预后。

结核分枝杆菌特异性效应T细胞斑点数鉴别儿童活动性结核病与潜伏结核感染的价值

目的通过γ干扰素释放试验探讨结核分枝杆菌特异性效应T细胞斑点数(简称T细胞斑点数)鉴别儿童活动性结核病(TB)与潜伏结核感染(LTBI)的价值。方法纳入T细胞斑点试验(T.SPOT.TB)阳性且未经过抗结核治疗的93例活动性TB(重症TB27例,非重症TB66例)和47例LTBI儿童,根据T.SPOT.TB结果对T细胞斑点数进行比较分析。结果活动性TB组T细胞斑点数中位数84(6～710)显著高于LTBI组17(6～316),P=0.000;非重症TB患儿的T细胞斑点数中位数为99(6～710),显著高于重症TB的44(6～268),P=0.011,也显著高于LTBI组17(6～316),P=0.000;重症TB儿童T细胞斑点数中位数高于LTBI组儿童(44vs17),但差异无统计学意义(P=0.084),T细胞斑点数分布在活动性TB、重症TB、非重症TB和LTBI之间均有较大范围重叠。受试者工作特征曲线分析显示以T细胞斑点数43.5作为区分活动性TB与LTBI的最佳界值,其敏感度与特异度分别为69.9%和70.2%。结论 T细胞斑点数在活动性TB尤其是非重症TB患儿显著高于LTBI儿童;T细胞斑点数的数量可反映体内的结核分枝杆菌负荷,但不能用于区分儿童活动性TB与LTBI。

不同人群结核分枝杆菌潜伏感染特异性IFN-γ检测分析

目的采用早期建立的特异性结核菌抗原IFN-γ Elispot检测技术,对深圳市不同人群结核菌潜伏感染的现状进行调查研究。方法采用结核菌特异性Elispot方法检测了34例深圳市某高校学生、18例结核病区医务人员、19例深圳市某IT公司职员、36例深圳市某生物技术公司职员、29例深圳市某公司后勤保安的结核菌抗原特异性IFN-γ反应水平。同时对各组人群还进行结核菌素皮试(PPD皮试)调查作为对照研究。结果各组人群中的Elispot检测阳性率分别是高校学生5.88%、结核病区医务人员55.6%、公司保安人员31.03%、IT公司职员31.57%、生物公司职员19.44%;PPD皮试阳性率为高校学生20.58%、结核病区医务人员88.9%、IT公司职员42.11%、生物公司职员41.67%、公司保安41.38%。结论Elispot检测诊断潜伏期结核分枝杆菌感染优于PPD皮试。

结核菌特异性干扰素-γ检测在诊断骨关节结核中的临床应用

目的探讨结核菌特异性干扰素-γ检测早期诊断骨关节结核的临床意义。方法收集2014年1月—12月我院确诊的骨关节结核患者24例,研究其病历资料,分析结核菌特异性干扰素-γ检测、骨关节MRI及病理检测结果。结果 24例患者中结核菌特异性干扰素-γ检测阳性者20例,骨关节MRI提示骨关节结核者10例,病理确诊者10例,结核菌特异性干扰素-γ检测阳性率高于骨关节MRI及病理。结论结核菌特异性干扰素-γ检测在骨关节结核中阳性率高,创伤小,可早期诊断骨关节结核。

快速斑点免疫金渗滤法检测结核杆菌特异性抗体

斑点免疫金渗滤法检测结核杆菌特异性抗体比传统痰涂片抗酸染色检测结核杆菌的方法临床检出率高，方法简便，快速准确。

抗结核治疗中患者外周结核分枝杆菌抗原水平与特异性免疫应答相关性分析

目的:活动期结核病患者外周呈现相当水平的结核特异性细胞免疫应答,在治疗过程中也呈现一定的动态变化特征,这种结核特异性细胞免疫应答的抗原驱动因素则还未知。本研究通过同步分析肺结核患者在抗结核治疗过程中外周特异性抗原和抗原特异性T细胞应答水平的动态变化,探讨外周抗结核特异性细胞免疫应答的理论依据。方法:利用外周血抗原富集-质谱鉴定技术动态检测外周血浆中结核特异性抗原CFP-10在患者抗结核治疗过程中含量的动态变化,并采用流式细胞术同步分析CFP-10刺激后的T细胞应答水平,分析CFP-10含量变化与不同细胞因子分泌T细胞数量的相关性。结果:CFP-10抗原水平在患者治疗过程中呈现个体化差异,同时在TB治疗中CFP-10含量与CFP-10特异性IFN-γ^+CD4^+T细胞比例具有显著相关性(P=0.029),但是CFP-10的含量与TNF-α^+CD4^+T细胞比例之间则无相关性(P=0.98)。结论:本研究获得了结核病患者治疗过程中外周结核病原菌抗原的动态变化特征,据此可推断目前所采用的IFN-γ释放实验某种程度上可以反映患者外周结核分枝杆菌抗原的载量,上述基于结核病原学和机体免疫应答水平的同步检测,有利于进一步解析抗结核免疫应答的抗原驱动因素,并为建立新型抗结核治疗疗效评价的生物标志物提供前期理论依据。

结核杆菌特异性细胞免疫与结核抗体辅助诊断男性生殖系统结核的价值

目的评价结核杆菌特异性细胞免疫与结核抗体辅助诊断男性生殖系统结核的价值。方法回顾性分析2017年1月至2020年6月于我院就诊的174例男性生殖系统结核及炎症病例,通过比较各种检验方式(方法A:结核杆菌特异性细胞免疫检测;方法B:结核抗体检测;方法C:串联检测;方法D:并联检测)的诊断效能评估其辅助诊断男性生殖系统结核的价值。结果两种检测方法的一致性较差(kappa=0.022),诊断结果差异有统计学意义(χ^(2)=31.7,P<0.001)。方法A(81.6%)及方法D(84.2%)的敏感性高于方法B(21.1%,χ^(2)=19.4,P<0.01)及方法C(18.4%,χ^(2)=22.0,P<0.01),方法B(93.9%)及方法C(100.0%)的特异性高于方法A(59.2%,χ^(2)=11.1,P<0.01)及方法D(57.1%,χ^(2)=18.1,P<0.01);方法C具有最高的敏感度(Se)、阳性预测值(PPV)及阳性似然比(LR+),具有最低的误诊率(α),方法D具有最高的特异度(Sp)、阴性预测值(NPV)、约登指数,具有最低的漏诊率(β)及阴性似然比(LR-);方法A-D的AUC面积依次为0.704、0.575、0.592以及0.686。结论两种检验方法同时为阳性时患有生殖系统结核的可能性最大,此时误诊率最低;两种检验方法同时为阴性时患有生殖系统结核的可能性最小,此时漏诊率最低;单独检测时,结核杆菌特异性细胞免疫检测比结核抗体检测具有更高的诊断效能;联合检测时,并联诊断效能高于串联诊断效能。

结核菌特异性抗原ESAT-6及CFP-10在肺结核及肺炎患者中的诊断价值

目的分析结核菌特异性抗原ESAT-6及CFP-10在肺结核及肺炎患者中的诊断价值。方法将48例肺结核患者作为观察组,30例肺炎患者作为对照组,分别进行PPD及ELISA实验,对两组患者的结核菌特异性抗原在两种疾病中的诊断价值进行分析。结果经ELESA实验检测,观察组结核菌阳性率、特异度及灵敏度分别为87.50%、93.75%、89.58%;对照组结核菌阳性率、特异度及灵敏度分别为60.00%、66.67%、70.00%;组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。经PPD实验检测,观察组结核菌阳性率、特异度及灵敏度分别为45.83%、50.00%、47.92%;对照组结核菌阳性率、特异度及灵敏度分别为46.67%、50.00%、53.33%;组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用ELISA法对肺结核及肺炎患者ESAT-6及CFP-10抗原进行检测可鉴别两者的不同,与PPD法相比,ELISA法在肺结核及肺炎的鉴别中诊断价值更优。

结核菌特异性Elispot检测IFN-γ对肺结核病诊断及其治疗的指导意义

目的探讨结核菌特异性Elispot检测IFN-γ对肺结核病诊断及其治疗的指导意义。方法选择我院2011年1月-2014年12月收治的肺结核患者100例,所有患者入组期间均采用住院观察,并持续住院时间均在3 d以上,先行Elispot检测,1 d后行PPD实验,比较确诊患者Elispot检测结果与PPD实验结果、Elispot检测阳性与阴性结果中斑点形成细胞数与Elispot检测卡介苗接种前后IFN-γ分泌水平。结果卡介苗接种前后IFN-γ分泌中ESAT-6水平和Pool A水平差异无统计学意义（P〉0.05）,Elispot检测阳性结果中斑点形成细胞数显著多于阴性（P〈0.05）,Elispot检测法的阳性率为88.0%,灵敏度为90.5%,特异度为19.2%,PPD实验的阳性率为74.0%,灵敏度为76.1%,特异度为41.7%,Elispot检测法阳性率和灵敏度均高于PPD实验（P〈0.05）。结论结核菌特异性IFN-γElispot检测对于筛查肺结核感染患者具有明显优势,其不受接种卡介苗与否的影响,其阳性率和敏感性均显著高于常规PPD试验。