结核耐药基因rpoB/katG/inhA早期筛查MDR-TB的临床研究

目的评估结核耐药基因rpo B/kat G/inh A筛查耐多药结核的可行性及临床意义。方法对2016年1月至2017年5月我科住院的228例肺结核患者分别采用结核耐药基因检测法和改良罗氏培养比例法检测利福平、异烟肼是否耐药,比较两种检验方法诊断的一致性。结果以改良罗氏培养比例法为金标准,228例患者中结核耐药基因检测法利福平耐药的灵敏度为88. 24%,特异度为97. 63%,异烟肼耐药的灵敏度为92. 31%,特异度为99. 01%。两法有较高的一致性(无统计学差异)。结论结核耐药基因rpo B/kat G/inh A可早期、快速、准确检测利福平、异烟肼的耐药性,可作为耐多药结核早期筛查的方法,对结核病防与治有重要意义。

超敏结核分枝杆菌和利福平耐药基因检测技术在结核病诊断中的应用进展

1结核病现状结核病是严重危害人类健康的传染性疾病之一,是仅次于新型冠状病毒感染的第二大传染病杀手,是全球第13大死因[1]。2022年10月27日,世界卫生组织(World Health Organization,WHO)发布《2022全球结核病报告》[2](以下简称报告)指出,2021年全球新发结核病患者约1060万人,其中儿童约120万人。受新型冠状病毒的影响,全球结核病发病率与2020年相比上升了3.6%,打破了过去20年间每年约2%的下降趋势。2019年至2021年,全球因结核病死亡人数有所增加,2021年全球共有160万人死于结核病,相当于倒退到2017年的水平。2020年至2021年全球耐药结核病负担增加了3%,2021年报告了45万例利福平耐药结核病例,需要治疗的耐药结核患者中仅有36%的人接受了治疗,并且全球耐药结核的成功治疗率只有60%。2021年全球结核病基本医疗服务支出也从2019年的60亿美元下降至54亿美元,而2022年所需的费用为130亿美元[2],资金缺口巨大。

探究结核分枝杆菌耐药基因检测在耐药肺结核治疗中的价值

研究、分析结核分枝杆菌耐药基因检测在耐药肺结核治疗中的价值。方法 抽取2023年1月至2024年1月我院收治的耐药肺结核患者(40例),均分为对照组、研究组,各20例,分别实施常规药敏试验、结核分枝杆菌耐药基因检测。结果 研究组耐药检出准确率较高,反观对照组则相对较低,组间有统计学意义(P<0.05);研究组基因突变检出率高于对照组(P<0.05)。结论 在耐药肺结核的治疗中,结核分枝杆菌耐药基因检测的应用价值明显,可为治疗方案的制定或调整提供可靠依据,值得推广。

耐药基因检测和T淋巴细胞斑点试验在老年结核性胸膜炎中的诊断价值

目的 探究结核分枝杆菌/利福平耐药基因检测(Xpert MTB/RIF)、结核感染T淋巴细胞斑点试验(T-SPOT.TB)用于诊断老年结核性胸膜炎的价值。方法 选取2018年3月~2020年12月收治的125例老年结核性胸膜炎患者作为研究对象(结核性胸膜炎组),以同期收治的102例老年非结核性胸膜炎胸腔积液患者为对照组,两组均进行Xpert MTB/RIF、T-SPOT.TB、抗酸染色、腺苷脱氨酶(ADA)、结核菌培养等检测,比较各诊断方法对老年结核性胸膜炎的诊断价值。结果 Xpert MTB/RIF、T-SPOT.TB的灵敏度、特异度和准确度均高于抗酸染色、ADA、结核菌培养的结果(P<0.05);Xpert MTB/RIF联合T-SPOT.TB诊断结核性胸膜炎的灵敏度、准确度高于Xpert MTB/RIF、T-SPOT.TB单独诊断(P<0.05)。结论 Xpert MTB/RIF联合T-SPOT.TB对老年结核性胸膜炎的诊断价值较高。

结核分枝杆菌利福平耐药突变基因检测与BD960药敏的对比

目的分析对比结核分枝杆菌利福平PCR-反向点杂交法耐药基因突变位点检测和BACTEC MGIT960 System表型药敏结果的相关性。方法同时对220例住院患者的痰或肺泡灌洗液(BALF)用PCR-反向点杂交法检测利福平耐药基因突变位点与BACTEC MGIT 960 System检测利福平表型药敏结果进行对比分析。结果 2种方法检测利福平药敏结果符合205例,特异度93%(205/220);2种方法检测利福平都敏感的有172例;基因耐药,表型耐药的有33例,其中有3例检出rpo B基因H526位点突变,突变率9%;基因耐药,表型敏感的有15例,其中有11例均检出rpo B基因H526位点突变,突变率73%。结论 PCR-反向点杂交法检测具有快速高效、特异度高等特点,对临床诊断、治疗有指导意义。

经皮肺穿刺组织行结核分枝杆菌/利福平耐药基因快速检测对涂阴肺结核的诊断价值

据WHO估算,2017年全球新发结核病患者约1 000万,结核病发病率为133/10万,其中中国的估算结核病新发患者数为88.9万,估算结核病发病率为63/10万^([1])。结核病的有效控制依赖于准确而快速的诊断及治疗。涂阴肺结核因其诊断较涂阳肺结核困难,尤其当肺部影像学特征不典型时,往往易造成漏诊、误治。临床工作中涂阴肺结核占活动性肺结核的比例超过60%^([2]),涂阴肺结核已成为我国结核病患病率下降的主要障碍。

结核分枝杆菌耐药基因芯片检测在结核性脑膜炎中的应用

目的分析结核分枝杆菌耐药基因芯片检测在结核性脑膜炎应用中的价值。方法选取我院2015年9月—2017年9月诊治的结核性脑膜炎疑似病例136例为研究对象。采用随机数字表将其分为观察组和对照组,分别采用结核分枝杆菌耐药基因芯片法和酶联免疫吸附(ELISA)法对脑脊液进行检测,并根据检测结果进行诊断。并对诊断的准确率、检查时间等数据进行组间比较。结果观察组阳性率为18.6%,对照组阳性率为17.4%,观察组高于对照组(P>0.05);两组准确率分别为95.7%和85.5%,观察组高于对照组(P<0.05)。结论结核分枝杆菌耐药基因芯片检测在结核性脑膜炎应用中具有阳性率高,准确性高等优势。

新疆阿克苏地区维吾尔族结核分枝杆菌（MTB）耐药突变基因检测的耐药性研究

目的了解新疆阿克苏地区维吾尔族结核患者对四种一线抗结核药利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇的耐药情况。方法参照结核痛诊断细菌学检验规程，用亚能生物的基因芯片检测技术对不同来源的结核茵阳性标本经处理后，进行耐药突变基因检测，来判断结核分枝杆菌的耐药情况。结果通过对100例10至70岁的维吾尔族结核患者的耐药突变基因检测，共59株耐药，利福平的耐药率为47．5％，异烟肼为37％，链霉素为8．4％，乙胺丁醇为6．7％。结论阿克苏地区维吾尔族人群的结核病人耐药率高于全国水平。初发的结核藕人对四种一线抗结核药（利福平、异熘料、链霉素、乙胺丁醇）的耐药率较低，而复发的结核病人对四种一线抗结核药的耐药率较高.

结核分枝杆菌耐药基因检测在耐药肺结核治疗中的效果分析

分析在耐药肺结核临床治疗中应用结核分枝杆菌耐药基因检测的效果。方法 进行回顾性研究,选303择我院2022年3月至2022年12月收治的88例肺结核患者,根据临床检测方式,对患者分组。对照组(44例)接受传统的药敏试验,观察组(44例)接受结核分枝杆菌耐药基因检测。对比分析2组检测效果。结果 两组检出的结核分枝杆菌耐药情况没有显著差异(P>0.05)。但两组在检验时间上存在着显著差异(P<0.05),此外,观察组还可以精确测定结核分枝杆菌突变株数。结论 结核分枝杆菌具有高度的变异性,该菌可通过变异产生明显的耐药性,导致肺结核患者的病情发展成为耐药性肺结核。但是,可以基于结核分枝杆菌高度变异性这一特点,对肺结核患者进行结核分枝杆菌耐药基因检测。通过结核分枝杆菌耐药基因检测,可以及早检出耐药性肺结核,并确定结核分枝杆菌突变株的具体类型,从而帮助医生更快地确定最佳的治疗方案,提高临床治疗效果。

结核分枝杆菌耐药基因检测应用于耐药肺结核治疗的价值探讨

剖析耐药肺结核患者在采取相应治疗措施时经结核分枝杆菌耐药基因检测取得的临床价值。方法 研究目标入院治疗时间范围于2020年1月—2023年1月,采取相关检查措施被确诊为耐药肺结核,筛选样本量共计200例,以随机数字表法为分组依据将其划分并命名为对照组(n=100)和观察组(n=100),对照组用药期间给予其常规药敏试验,观察组所用检验方式为结核分枝杆菌耐药基因检测,分析两组诊断方法应用期间的耐药肺结核阳性检出率、诊断效能。结果 耐药肺结核阳性检出率测定结果呈现为,观察组明显高于对照组(P值<0.05)。评估两组检测方式的诊断效能,特异度、敏感度、准确度、阳性预测值、阴性预测值经统计学分析,对比差异显著(P<0.05)。结论 耐药肺结核患者治疗期间应用结核分枝杆菌耐药基因检测有利于提高诊断效能,为合理制定治疗方案提供了参考依据,在临床上具有较高的借鉴价值。

结核分支杆菌耐药分子机制的检测技术的研究

目的 :探讨结核分支杆菌对异烟肼、利福平耐药的分子机制 ,建立快速检测耐药分支杆菌基因型的分子生物学方法。方法 :采用聚合酶链反应 -单链构象多态性 (PCR -SSCP)同时检测结核分支杆菌敏感株和耐异烟肼、利福平耐药株的KatG基因、rpoB基因突变。结果 :78株结核分支杆菌临床分离株均未发现KatG、rpoB基因缺失。以结核分支杆菌H37RV为对照 ,3 6株药物敏感株的KatG、rpoB基因SSCP图谱均正常。 42株同时耐异烟肼和利福平的多耐药株中 ,KatG和rpoB基因突变率分别为 66.7% (2 8/4 2 ) ,90 .5 % (3 8/4 2 )。结论 :结核分支杆菌耐异烟肼、利福平耐药性的产生是由于KatG基因和rpoB基因突变所致。应用PCR -SSCP技术可同时快速检测结核分支杆菌异烟肼。

结核分枝杆菌复合群及耐药基因突变检测试剂盒诊断结核分枝杆菌耐药效果研究

目的评价结核分枝杆菌复合群及耐药基因突变检测试剂盒(GenoType MTBDRplus VER2.0,简称MTB‐DRplus 2.0)检测利福平和异烟肼耐药的灵敏度和特异度等效能指标,为提高结核分枝杆菌耐药性检测水平提供依据。方法收集2022年1—12月云南省32个县(市、区)级结核病定点治疗医院分离培养的阳性菌株,经MTBDRplus 2.0检出结核分枝杆菌880株,进行最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)法药敏试验检测。结果以MIC法为金标准,MTBDRplus 2.0检测异烟肼耐药的灵敏度为67.69%,特异度为98.40%,阳性预测值为77.19%,阴性预测值为97.45%,MTBDRplus 2.0和MIC法检测异烟肼耐药结果一致性中等,Kappa为0.701(P<0.001);检测利福平耐药的灵敏度为87.80%,特异度为99.40%,阳性预测值为87.80%,阴性预测值为99.40%,MTBDRplus 2.0和MIC法检测利福平耐药结果一致性较好,Kappa为0.872(P<0.001)。MTBDRplus 2.0结果显示对异烟肼耐药而MIC法结果为对异烟肼敏感的13株菌中,发生inhA(C15T)突变有11株(占84.62%),MTBDRplus 2.0结果显示对利福平耐药而MIC法结果为对利福平敏感5株菌中,发生rpoB其他突变有4株(80.00%)。结论MTBDRplus 2.0检测利福平耐药的灵敏度和特异度均较高,但检测异烟肼耐药的灵敏度略低,检测异烟肼耐药的灵敏度低可能是由于试剂盒检测异烟肼耐药的靶点覆盖不足。inhA基因突变与异烟肼耐药的相关性较差,rpoB基因其他突变与利福平耐药的相关性较差。

结核分枝杆菌/利福平耐药基因联合结核感染T细胞斑点检测在耐药结核性胸膜炎中的应用价值

目的探讨结核分枝杆菌/利福平耐药基因检测(Xpert MTB/RIF)联合结核感染T细胞斑点检测(T-SPOT.TB)对耐药性结核性胸膜炎诊断及治疗的价值。方法选取2014年1月至2019年12月河北省胸科医院收治的62例结核性胸膜炎患者为结核性胸膜炎组,选择同期来河北省胸科医院院救治的非结核性胸膜炎患者60例为对照组。分析比较两组一般资料,留取两组胸腔积液样本进行Xpert MTB/RIF、T-SPOT.TB、结核菌培养+药敏等检测,胸腔积液结核菌培养阳性作为诊断结核性胸膜炎的金标准。结果 Xpert MTB/RIF、T-SPOT.TB、两种方法并联检测结核性胸膜炎的灵敏度分别为79.0%、88.7%、96.8%,特异度分别为90.0%、81.7%、95.0%,均明显高于ADA及抗酸染色诊断的敏感度及特异度,差异有统计学意义(P均<0.05)。以结核菌药敏检测为金标准,Xpert MTB/RIF检测利福平耐药的敏感度为89.47%,两者一致性较好(Kappa=0.900)。结论 Xpert MTB/RIF联合T-SPOT.TB检测提高了结核性胸膜炎诊断的敏感度和特异度,降低误诊率,同时Xpert MTB/RIF可快速检测出胸水中耐利福平的结核分枝杆菌感染,有利于耐药结核性胸膜炎的早期诊断及治疗。

Xpert MTB/RIF、T-SPOT·TB及BACTEC MGIT960在结核病诊断中的应用

目的探讨Xpert MTB/RIF、T-SPOT·TB及BACTEC MGIT960在结核病诊断中的应用价值。方法选择180例受试者,其中肺结核98例、肺外结核35例及非结核病47例。所取受试者痰、支气管灌洗液、脑脊液等标本分别采用Xpert MTB/RIF、T-SPOT·TB及BACTEC MGIT960单独检测及联合检测,用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)评价各检测方法的诊断效能,采用Kappa检验分析Xpert MTB/RIF与BACTEC MGIT960对利福平耐药性检测的一致性。结果 T-SPOT·TB、T-SPOT·TB+MGIT960、Xpert MTB/RIF+MGIT960+T-SPOT·TB对肺结核与肺外结核检测的阳性率高于Xpert MTB/RIF、MGIT 960单独检测及二者联合检测(P均<0.05)。T-SPOT·TB、T-SPOT·TB+MGIT960、Xpert MTB/RIF+MGIT960+T-SPOT·TB诊断结核病的AUC比较差异无统计学意义(P均>0.05),但均大于Xpert MTB/RIF、MGIT 960、Xpert MTB/RIF+MGIT960的AUC(P均<0.05)。Xpert MTB/RIF与BACTEC MGIT960对利福平耐药性检测具有较高的一致性(κ=0.735)。结论 T-SPOT·TB检测、T-SPOT·TB联合MGIT960检测、三者联合检测对结核病诊断有较高价值,三者联合检测的价值最高。

胸腔积液中IL-27及Gene Xpert MTB/RIF联合检测有助于结核性胸膜炎的快速诊断

目的:观察胸腔积液中白介素-27(IL-27)、结核杆菌利福平耐药基因(Gene Xpert MTB/RIF)表达水平在结核性胸膜炎快速诊断中的应用价值。方法:回顾性分析128例结核性胸膜炎患者的临床资料,另选择同期收治的128例非结核性胸膜炎胸腔积液患者为对照(恶性胸腔积液组、类肺炎性胸腔积液组与漏出性胸腔积液组分别61例、36例与31例),采用酶联免疫吸附法检测患者胸腔积液中IL-27水平,并予以Gene Xpert MTB/RIF试验,以临床综合诊断结果为金标准,评估IL-27、Gene Xpert MTB/RIF水平在结核性胸膜炎诊断中的应用价值。结果:结核性胸膜炎组胸腔积液中IL-27水平显著高于恶性胸腔积液组、类肺炎性胸腔积液组与漏出性胸腔积液组(F=112.944,P均<0.05);IL-27诊断结核性胸膜炎的AUC值为0.875,敏感度为73.43%、特异性为85.16%;Gene Xpert MTB/RIF诊断结核性胸膜炎敏感度、特异性分别为77.34%、100.00%;两者联合诊断结核性胸膜炎的敏感度为86.72%,特异性为100.00%。结论:胸腔积液中IL-27、Gene Xpert MTB/RIF水平对结核性胸膜炎的诊断有一定意义,联合检测有助于结核性胸膜炎的诊断。

不同检测方法对结核性胸膜炎的诊断价值

目的探讨结核分枝杆菌/利福平耐药基因(Xpert MTB/RIF)检测、结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.B)和腺苷脱氨酶(ADA)检测胸腔积液在结核性胸膜炎诊断中的价值。方法选择2019年1月至2021年4月就诊于北京老年医院感染科的167例胸腔积液患者为研究对象,其中确诊为结核性胸膜炎患者114例(结核性胸膜炎组),非结核性胸膜炎53例(非结核性胸膜炎组)。2组患者均抽取胸腔积液进行Xpert MTB/RIF、T-SPOT.TB和ADA检测,并对检测结果进行比较。采用SPSS 23.0统计软件进行数据分析。根据数据类型,分别采用t检验、秩和检验或χ^(2)检验进行组间比较。结果诊断灵敏度比较,ADA(73.68%)>Xpert MTB/RIF(37.72%)>罗氏培养(23.68%),差异均有统计学意义(χ^(2)=29.880,5.277;P<0.05);T-SPOT.TB(81.58%)和ADA(73.68%)比较,差异无统计学意义(χ^(2)=2.046;P>0.05)。特异度比较,Xpert MTB/RIF(100.00%)与罗氏培养(100.00%)均高于T-SPOT.TB(81.13%),也高于ADA(71.70%),差异均有统计学意义(χ^(2)=11.042,11.042,17.473,17.473;P<0.05);而T-SPOT.TB(81.13%)和ADA(71.70%)比较,差异无统计学意义(χ^(2)=1.309;P>0.05)。3种方法串联时,T-SPOT.TB和ADA检测灵敏度(60.53%)明显高于Xpert MTB/RIF和ADA(35.96%),差异有统计学意义(χ^(2)=20.081,P<0.001)。并联时,T-SPOT.TB或ADA检测灵敏度(94.74%)明显高于单独ADA(73.68%)或单独T-SPOT.TB检测(81.58%),差异有统计学意义(χ^(2)=19.000,9.453;P<0.05)。而血T-SPOT.TB或ADA或Xpert MTB/RIF检测(96.49%)与T-SPOT.TB或ADA检测(94.74%)灵敏度比较,差异无统计学意义(χ^(2)=0.418,P>0.05)。两者或三者串联检测,特异度无显著差异(P>0.05)。并联检测,SPOT.TB或ADA(62.26%)特异度与T-SPOT.TB或ADA或Xpert MTB/RIF特异度(62.26%)相同,均低于Xpert MTB/RIF或T-SPOT.TB(81.13%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.649,4.649;P<0.05);其余组间特异度两两比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论T-SPOT.TB和ADA检测胸腔积液在诊断结核性胸膜炎中具有较高的灵敏度和特异度,而Xpert MTB/RIF在胸腔积液标本中的诊断价值较低。T-SPOT.TB和ADA联合检测可提高诊断结核性胸膜炎的灵敏度,更好地降低漏诊率。

胸腔积液GeneXpert MTB/RIF对结核性胸膜炎的诊断价值研究

目的研究胸腔积液中的GeneXpert MTB/RIF在结核性胸膜炎诊断中的价值。方法回顾性分析2017年11月至2020年11月检测胸腔积液GeneXpert MTB/RIF、PCR-荧光探针法检测结核分枝杆菌DNA(TB-DNA)和腺苷脱氨酶(ADA)的胸腔积液患者的病历。根据综合参考标准(CRS)来判断是否患有结核性胸膜炎,对以上3种方法进行评价和比较。结果总共有128例患者同时接受了GeneXpert MTB/RIF、TB-DNA和ADA的测试,其中结核性胸膜炎患者为78例,患者为非结核性胸膜炎的占有50例。结核组病例中胸腔积液内的ADA的中位水平是44(26,59.25)U/L,高于非结核组患者的胸腔积液中ADA的中位水平11.4(6,15.75)U/L(P<0.05);ROC曲线下面积0.916,诊断最佳临界值为24.5U/L,在此临界值,ADA检测的敏感度和特异度分别为79.5%(62/78)、88%(44/50);胸腔积液GeneXpert MTB/RIF检测的敏感度为26.9%(21/78),特异度为100%(50/50);结核组患者胸腔积液GeneXpert MTB/RIF阳性率26.9%(21/78),分别高于胸腔积液结核菌培养阳性率(16.7%)及胸腔积液TB-DNA检测的阳性率(2.6%)(χ2=2.407,P>0.05;χ2=18.41,P<0.05)。胸腔积液ADA+GeneXpert MTB/RIF的敏感度(82.1%),比胸腔积液ADA检测(79.5%)及胸腔积液GeneXpert MTB/RIF检测(26.9%)单独检测的敏感性要高(χ2=66.117,P<0.05;χ2=6.286,P<0.05)。结论胸腔积液中的ADA检测有助于诊断结核性胸膜炎,该项检测有着高的敏感性和特异性;胸腔积液TB-DNA、GeneXpert MTB/RIF检测的敏感性较低,但特异性均较高,相对而言胸腔积液GeneXpert MTB/RIF比TB-DNA诊断性能更好;胸腔积液GeneXpert MTB/RIF与ADA联合检测可以提高诊断效能。

痰Xpret MTB/RIF和血T-SPOT.TB对老年肺结核的临床诊断价值

目的分析痰Xpret结核分枝杆菌/利福平耐药基因检测(MTB/RIF)和血结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)对老年肺结核的临床诊断价值。方法选取2017年2月至2019年2月北京老年医院感染疾病科收治的疑似老年肺结核患者162例,患者均行Xpret MTB/RIF与T-SPOT.TB检测,观察两种检测方法对肺结核患者的诊断价值。结果162例疑似老年肺结核患者最终诊断肺结核88例,阳性率为54.32%;非肺结核患者74例,包括细菌性肺炎34例,慢性支气管炎21例,慢性阻塞性肺炎11例,其他8例。痰Xpret MTB/RIF和T-SPOT.TB诊断老年肺结核的灵敏度分别为45.45%、93.18%,特异度分别为100.00%、62.16%,Xpret MTB/RIF诊断肺结核灵敏度低于T-SPOT.TB,特异度高于T-SPOT.TB(P<0.05)。结论痰Xpret MTB/RIF可对肺结核患者行辅助诊断,T-SPOT.TB检测可作为Xpret MTB/RIF检测后续诊断试验,以提高肺结核患者的诊断准确性。