聚合酶链反应在结核菌检测中的临床评价

根据全国疾病监测系统报告,近年来我国传播性疾病的发病率明显上升,其中结核病的发病率呈上升趋势.因此结核杆菌快速诊断与鉴定对结核病的防治起着重大作用.我们应用培养法、PCR法,对84例可疑患者的标本同时进行检测,对比分析.现报告如下.

试管漂浮集菌法检测多种标本中的结核菌

目的探讨试管漂浮集菌法在多种标本中检测结核菌的应用价值。方法采用试管漂浮集菌法测定胸腹水、脑脊液、尿液标本中结核菌，并与涂片法和离心沉淀法对照；测定Ⅱ型肺结核患者静脉血中结核菌，同时设立疾病对照组和正常对照组。结果胸腹水、脑脊液、尿液标本检测阳性率均高于涂片法和离心沉淀法（Ｐ＜０刀５）．１０例Ⅱ型肺结核患者血标本均检出结核菌，对照组则为阴性。结论试管漂浮集菌法适用于多种标本的检测，快速、阳性率高，便于操作。

结核分枝杆菌DNA及RNA检测在结核病中的诊断价值

目的分析结核分枝杆菌DNA和RNA联合检测在结核病诊断中的意义。方法对1168例用实时荧光定量PCR法检测结核菌DNA为阳性的标本继续用恒温扩增技术检测结核菌RNA。结果1168例研究对象中,DNA检测阳性601例,阳性率51.46%;其中男性377例,阳性率49.22%,女性224例,阳性率55.72%;RNA检测阳性297例,阳性率25.43%;其中男性188例,阳性率29.06%,女性109例,阳性率20.92%。不同性别的DNA和RNA检测阳性率差异有统计学意义(χ^(2)=4.466、10.07,P<0.05)。各类标本中痰液DNA和RNA及DNA+RNA检测阳性最高,分别为335例、170例、142例,阳性率分别为55.74%、57.24%、60.43%,脑脊液DNA和RNA及DNA+RNA检测阳性最低。不同年龄组中,21~30岁组DNA检测阳性最高,为133例,阳性率22.13%。41~50岁组RNA及DNA+RNA检测阳性最高,分别为67例、62例,阳性率分别为22.56%、25.96%;10≤岁组DNA和RNA及DNA+RNA检测阳性最低。结论MTB-DNA检测阳性率明显高于MTB-RNA且女性较男性高;各种检测在不同类型标本中,痰液阳性率最高,脑脊液最低;年龄组在21~30岁组DNA阳性率最高,41~50岁组RNA及DNA+RNA阳性率最高,10≤岁组各检测阳性率最低。

痰TB-RNA检测在肺结核中的诊断价值

目的探讨痰结核菌核糖核酸(TB-RNA)检测应用在肺结核中的诊断价值。方法 321例活动性肺结核患者作为试验组, 62例肺部其他疾病患者作为对照组。采集两组患者痰液进行TB-RNA检测法、涂片镜检法和罗氏培养法检验,比较两组患者阳性检出率,并观察三种检测方法的检测特点。结果试验组患者TB-RNA法阳性检出率为85.05%,明显高于罗氏培养法的74.77%、涂片镜检法的28.04%,罗氏培养法阳性检出率高于涂片镜检法,差异具有统计学意义(P<0.05)。对照组患者TB-RNA法阳性检出率为0,罗氏培养法阳性检出率为3.23%,涂片镜检法阳性检出率为0,比较差异无统计学意义(P>0.05)。TB-RNA检测法的特点是检测周期适中(40 min),可鉴别活菌并能区分结核与非结核分枝杆菌。结论痰TB-RNA检测在肺结核中具有阳性检出率高,检测周期短,并可鉴定活菌等优点,值得推广。

综合医院结核病专科门诊对结核病防治工作的作用

目的评价综合性医院结核病专科门诊设置对结核病防治工作的作用。方法分析2003、2005年闵行区疾病预防控制中心报表资料和2005年闵行区各结核病专科门诊登记资料。结果2004年闵行区在3所综合性医院各增设了1个结核病专科门诊。和2003年相比,2005年闵行区确诊肺结核病例增加118%、其中外来病例增加190%;痰涂片阳性率由31.6%上升到42.4%,治愈率由83.3%到81.7%。结论综合性医院开设结核病专科门诊提高结核病人的发现率同时,治愈率未见下降,对结核病防治工作起到了明显的促进作用。

分枝杆菌噬菌体在抗结核研究中的作用

分子杆菌噬菌体是其宿主分枝杆菌的病毒,前者对于结核病控制及临床结核菌诊断有良好的应用前景。目前已有超过1000株分枝杆菌噬菌体进行了全基因组测序,结果显示分枝杆菌噬菌体基因组具有丰富的多样性和镶嵌结构,且都编码有噬菌体裂解酶。裂解酶是噬菌体在感染宿主末期表达的蛋白,其能水解细胞壁以释放子代噬菌体。除裂解酶外,分枝杆菌噬菌体还编码其它有抗结核活性的多肽及蛋白。分枝杆菌噬菌体在临床耐药结核菌的检测中也发挥了巨大作用。本文综述了来源于分枝杆菌噬菌体的多肽与蛋白的抗结核活性,并系统阐述了分枝杆菌噬菌体在临床结核菌耐药性检测中的应用,并展望了工程噬菌体在杀死耐药病原菌研究中的应用前景。

结核分枝杆菌T细胞斑点实验在肺结核诊断中的应用

目的探讨肺结核快速、准确的诊断方法。方法对1 171例肺结核患者、502例非肺结核患者进行痰涂片、结核分枝杆菌T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)、结核菌核酸检测(TB-DNA)、抗结核抗体检测,对比分析检测结果。结果与其他3种方法相比,T-SPOT.TB诊断肺结核具有较高的灵敏性、阳性预测值、阴性预测、约登指数(P均<0.05),其诊断不同类型肺结核的阳性率最高(P均<0.05)。结论 T-SPOT.TB检测诊断肺结核具有较高的灵敏性和特异性。

胸腔积液GeneXpert MTB/RIF对结核性胸膜炎的诊断价值研究

目的研究胸腔积液中的GeneXpert MTB/RIF在结核性胸膜炎诊断中的价值。方法回顾性分析2017年11月至2020年11月检测胸腔积液GeneXpert MTB/RIF、PCR-荧光探针法检测结核分枝杆菌DNA(TB-DNA)和腺苷脱氨酶(ADA)的胸腔积液患者的病历。根据综合参考标准(CRS)来判断是否患有结核性胸膜炎,对以上3种方法进行评价和比较。结果总共有128例患者同时接受了GeneXpert MTB/RIF、TB-DNA和ADA的测试,其中结核性胸膜炎患者为78例,患者为非结核性胸膜炎的占有50例。结核组病例中胸腔积液内的ADA的中位水平是44(26,59.25)U/L,高于非结核组患者的胸腔积液中ADA的中位水平11.4(6,15.75)U/L(P<0.05);ROC曲线下面积0.916,诊断最佳临界值为24.5U/L,在此临界值,ADA检测的敏感度和特异度分别为79.5%(62/78)、88%(44/50);胸腔积液GeneXpert MTB/RIF检测的敏感度为26.9%(21/78),特异度为100%(50/50);结核组患者胸腔积液GeneXpert MTB/RIF阳性率26.9%(21/78),分别高于胸腔积液结核菌培养阳性率(16.7%)及胸腔积液TB-DNA检测的阳性率(2.6%)(χ2=2.407,P>0.05;χ2=18.41,P<0.05)。胸腔积液ADA+GeneXpert MTB/RIF的敏感度(82.1%),比胸腔积液ADA检测(79.5%)及胸腔积液GeneXpert MTB/RIF检测(26.9%)单独检测的敏感性要高(χ2=66.117,P<0.05;χ2=6.286,P<0.05)。结论胸腔积液中的ADA检测有助于诊断结核性胸膜炎,该项检测有着高的敏感性和特异性;胸腔积液TB-DNA、GeneXpert MTB/RIF检测的敏感性较低,但特异性均较高,相对而言胸腔积液GeneXpert MTB/RIF比TB-DNA诊断性能更好;胸腔积液GeneXpert MTB/RIF与ADA联合检测可以提高诊断效能。

CBA技术与两种常用快速检测技术在结核病诊断运用中的比较

目的通过与两种常用的结核病快速诊断技术的比较,评价CBA检测方法在结核病诊断中的价值,为临床治疗提供参考依据。方法选取医院2015年3月-12月收治的住院患者191例,运用CBA技术、T-SPOT和结核分枝杆菌抗体检测对所有入组对象进行双盲检测,并对检测结果统计分析。结果 CBA检测的敏感性为86.82%,比T-SPOT 75.19%和结核分枝杆菌抗体检测38.76%均高,差异有统计学意义(P<0.05);CBA检测结果的特异性为91.94%,比T-SPOT 82.26%和结核分枝杆菌抗体检测的83.87%均高。结论 CBA技术的检测结果能有效的区分活动性结核病和其他肺部疾病,有利于控制结核病疫情的流行,为实现最终消灭结核病的长远目标提供了可靠的技术方法。

猕猴结核IFN-γ体外释放检测法的建立与初步应用

旨在建立猕猴结核IFN-γ体外释放检测法,用于猴结核病的特异性诊断。从猕猴外周血白细胞克隆了猕猴IFN-γ(Macaca mulattaIFN-γ,Mm IFN-γ)基因,在大肠杆菌中表达,获得重组MmIFN-γ。利用杂交瘤细胞技术获得12株高效价的单克隆抗体。用所获得的单克隆抗体及兔抗IFN-γ多克隆抗体建立了检测猴IFN-γ的夹心ELISA,检测灵敏度达到62.5ng/L。用所建立的IFN-γ检测法与进口商品化试剂盒符合率为93.84%,具有很好的一致性(κ=0.779 3)。以眼睑皮内变态反应法(皮试法)为标准方法,先用皮试法检测146只猕猴,再用进口商品化的IFN-γ检测试剂盒(MABTECHTM)检测猕猴外周血淋巴细胞在牛和禽结核菌素刺激下释放的IFN-γ量,利用ROC曲线确定猕猴结核IFN-γ检测法的临界值为114.5ng/L,对皮试法的灵敏性为68.18%,特异性为91.94%。同时,本试验检测的猕猴的结核阳性率为17.12%,提示结核病对猕猴群的健康存在重大威胁。本试验建立了猕猴结核IFN-γ体外释放检测法,为猕猴结核病检测提供了新型技术手段。

一起高校学生肺结核疫情的调查分析

目的对一起在高校学生中发生的肺结核疫情进行调查分析。方法对患病学生的140名密切接触者进行了流行病学调查、结核菌素试验、胸片X-线检查和痰结核菌等病原学检查。结果在首发病例班级及同寝室学生中又筛查出3例肺结核患者,使得此次疫情发病人数达到了6人,致使该班罹患率达到17.1%(6/35);在140名密切接触者中进行结核菌素试验,单纯PPD强阳性者(硬结平均直径≥15 mm,或有水泡、溃破)为78人,强阳性率达到55.7%(78/140)。结论本次高校学生中发生的肺结核疫情是由于综合性医院对首发患病学生未能及时明确诊断和有效隔离,导致传染源长期暴露在聚集性人群中,以及学生寝室通风不良和课业繁重休息不好等综合因素所引起的。