百脉根结瘤信号通道蛋白NSP1和NSP2的相互作用

豆科植物百脉根是研究共生固氮体系的模式植物之一,对其根瘤菌共生信号转导途径和作用机制的研究,有助于揭示根瘤菌与豆科植物共生关系建立和共生体形成的奥秘。本研究利用酵母双杂交系统和体外蛋白质相互作用技术,证明百脉根GARS类家族转录因子结瘤信号通道蛋白NSP1和NSP2在体外体内均可以相互作用,并将相互作用的位点定位在NSP1的GRAS结构域的LHRII区域和NSP2的LHRI区内。

基于TLR-4/NF-κB信号通路及水通道蛋白1表达探讨大陷胸汤干预重症急性胰腺炎早期肺损伤的效应机制

目的:探讨大陷胸汤对重症急性胰腺炎(SAP)早期肺损伤的影响及作用机制。方法:将60只大鼠随机分为实验组、模型组和对照组,每组20只。实验组予大陷胸汤灌胃,对照组及模型组予蒸馏水灌胃,在连续灌胃7 d后,模型组与实验组以胰胆管注射牛磺胆酸钠的方式制备SAP模型,于造模后12、24、48、72 h各时间点分别处死5只大鼠取材,观察大鼠一般情况、胸腹水量、肺湿干重比、胰腺组织及肺组织病理学改变、肺组织白细胞介素(IL)-1及Toll样受体4(TLR-4)水平、肺组织核因子(NF)-κB及水通道蛋白1(AQP1)表达水平。结果:与对照组相比,模型组大鼠一般情况较差,胰腺炎症反应以及肺损伤程度较重,胸腹水量、肺湿干重比、肺组织NF-κB表达水平、IL-1及TLR-4水平升高(P<0.05),肺组织AQP1表达水平下降。与模型组相比,实验组大鼠一般情况较好,肺损伤程度较轻,胸腹水量、肺湿干重比、肺组织NF-κB表达水平、IL-1及TLR-4水平下降(P<0.05),肺组织AQP1表达水平升高,造模后72 h后,胰腺组织坏死程度与同期模型组相比明显好转。结论:大陷胸汤可在一定程度上减轻SAP大鼠早期肺损伤,其机制可能与抑制TLR-4/NF-κB炎症信号通路,增强AQP1表达有关。

活化蛋白C通过调控Nrf-2/HO-1信号通道改善大鼠皮瓣缺血再灌注损伤的作用研究

目的:研究活化蛋白C(Activated protein C,APC)对大鼠皮瓣缺血再灌注损伤的作用及可能机制。方法:将80只SD雄性大鼠随机分为四组:对照组、药物对照组、模型组和治疗组,每组20只。观察术后72 h内模型大鼠皮瓣形态变化,HE染色观察大鼠皮瓣组织病理学变化,TUNEL法染色观察皮瓣组织细胞凋亡,ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6水平,用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸TBA比色法分别测定皮瓣组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,Westernblot法检测皮瓣组织中Nrf-2、HO-1、γ-GCS蛋白表达水平。结果:与模型组比较,治疗组皮瓣红肿、坏死程度、病理损伤程度减弱;TUNEL法染色观察,与模型组比较,治疗组皮瓣组织细胞凋亡率减少(P<0.05);ELISA法检测发现,与模型组比较,治疗组血清中TNF-α、IL-6降低(P<0.05);与模型组比较,治疗组SOD活性升高(P<0.05),MDA含量降低(P<0.05);Westernblot法检测发现,与模型组比较,治疗组Nrf-2、HO-1、γ-GCS蛋白相对表达水平上升(P<0.05)。结论:APC能改善大鼠皮瓣缺血再灌注损伤,其机制可能与激活Nrf-2/HO-1信号通路,抑制氧化应激反应和减少细胞凋亡、炎症反应有关。

宫颈癌患者血清WNT1诱导信号通路蛋白1、瞬时受体电位阳离子通道亚家族M成员7水平及临床意义

目的探讨宫颈癌患者血清WNT1诱导信号通路蛋白1(WISP1)、瞬时受体电位阳离子通道亚家族M成员7(TRPM7)水平及临床意义。方法选取150例宫颈癌患者和164例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者。采用酶联免疫吸附法检测两组患者血清WISP1水平,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测两组患者血清TRPM7 mRNA水平。宫颈癌发生的影响因素采用多因素Logistic回归分析。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估血清TRPM7 mRNA、WISP1单独及联合检测对宫颈癌的诊断价值。结果宫颈癌患者血清TRPM7 mRNA、WISP1水平均明显高于CIN患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。宫颈癌患者中文化程度为初中及以下、孕次≥3次、产次≥2次、合并高危人乳头瘤病毒(HPV)感染的比例均明显高于CIN患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,TRPM7 mRNA水平升高、WISP1水平升高、合并高危HPV感染均是宫颈癌发生的独立危险因素(P﹤0.01)。ROC曲线显示,TRPM7 mRNA、WISP1联合检测诊断宫颈癌的AUC为0.944(95%CI:0.921~0.966),高于二者单独检测(P﹤0.05)。结论宫颈癌患者血清TRPM7 mRNA、WISP1水平较高,二者联合检测可提高对宫颈癌的诊断价值。

锂盐对中枢神经系统ERK-1/2信号通道活性和Bcl-2家族蛋白表达的影响

目的 :分析长期服用锂盐对中枢神经系统ERK 1/ 2信号传导通道活性以及Bcl 2家族蛋白表达的影响 ,探讨锂盐治疗躁狂抑郁症作用的可能分子机制。方法 :将 40只健康的雄性Wistar大鼠随机均分为锂盐组和对照组。锂盐组大鼠用每公斤含 2 .4g碳酸锂的饲料喂养 ,对照组大鼠用常规饲料喂养 ,4周后取大鼠海马和额叶制备蛋白样本 ,WesternBlotting分析海马和额叶组织MEK ,ERK 1/ 2 ,RSK1,CREB的磷酸化水平 (活化程度 )以及Bcl 2和Bax蛋白的表达水平。结果 :与对照组比较 ,锂盐增强大鼠海马和额叶MEK ,ERK 1/ 2 ,RSK1和CREB的活性 ,上调海马和额叶Bcl 2表达 ,下调海马和额叶Bax表达。结论 :长期服用锂盐激活中枢神经系统ERK 1/ 2信号传导通道 ,调节中枢神经系统Bcl 2家族蛋白表达 ,这些作用可能与锂盐抗躁狂抑郁症的作用有关。

机械拉伸对人角膜基质细胞水通道蛋白AQP1表达的影响

通过探讨机械拉伸对人角膜基质细胞中水通道蛋白1(AQP1)及下游信号通路相关基因表达的影响,为揭示圆锥角膜等术后并发症的发生机制提供参考。采用FLEX-4000对人角膜基质细胞进行周期性机械拉伸处理,采用Fluo-3荧光探针检测细胞内Ca^2+的浓度,ELISA法检测拉伸处理后胞内cAMP的含量,Real-time PCR分析拉伸和Ca^2+螯合剂BAPTA处理后AQP1及其下游信号通路相关基因的表达变化。结果发现:机械拉伸可诱导角膜基质细胞中AQP1及其下游FAK、Wnt通路相关基因的表达。机械拉伸处理后胞内Ca^2+、cAMP含量显著上升。BAPTA能够抑制拉伸诱导的AQP1及下游ARHGEF2、Wnt11、MMP2基因的表达。结果提示机械拉伸能够通过调节胞内Ca^2+浓度和cAMP浓度促进AQP1的表达,并进一步通过下游的FAK、Wnt信号通路诱导MMP2的表达,参与角膜细胞外基质代谢的调节。

Kv1.3钾通道调节人脐静脉内皮细胞LOX-1受体摄取oxLDL

目的观察Kv1.3钾通道在LOX-1摄取oxLDL中的作用,并探讨其机制。方法分别以慢病毒载体shRNA-Kv1.3-LV3-pGLV-h1-GFP-puro和Kv1.3-LV5-EF1a-GFP-Puro转染人脐静脉内皮细胞(HUVECs),以获得HUVECs细胞中下调和上调表达Kv1.3蛋白。利用全细胞膜片钳技术记录Kv1.3蛋白过表达和下调的HUVECs Kv1.3 I/V曲线。以oxLDL与HUVECs共孵育后,分别应用免疫比色法和Fluo-3/AM荧光标记法测定细胞内胆固醇和钙离子相对含量。经Western blot法测定Kv1.3、LOX-1、p38、p38磷酸化水平。结果shRNA950转染组HUVECs Kv1.3 mRNA和蛋白表达量较空白对照组显著降低(P<0.05),过表达转染组Kv1.3 mRNA和蛋白表达量较空白对照组显著升高(P<0.05)。Kv1.3表达上调后,I/V曲线上移,该效应可被奎尼丁抑制;Kv1.3表达下调后,I/V曲线下移。Kv1.3过表达组胆固醇相对水平明显高于对照组(P<0.05),shRNA950+oxLDL组胆固醇的相对含量低于oxLDL组(P<0.05)。Western blot法检测显示,Kv1.3过表达组的LOX-1蛋白表达量较对照组升高(P<0.05),Kv1.3敲低组的LOX-1蛋白水平较对照组减低(P<0.05);Kv1.3过表达组磷酸化p38与p38蛋白水平的比值高于对照组二者的比值(P<0.05),Kv1.3敲低组磷酸化p38与p38蛋白表达量的比值低于对照组两者的比值(P<0.05)。结论Kv1.3钾通道经p38信号通路参与调节HUVECs LOX-1受体摄取oxLDL。该研究为阐明LOX-1结合oxLDL的电荷依赖性机制增添了新的实验依据。

带状疱疹后遗神经痛患者血清非标记定量蛋白质组学分析

目的采用非标记定量蛋白质组学技术检测带状疱疹后遗神经痛(PHN)患者血清差异表达的蛋白质,探讨PHN可能的发病机制。方法选择带状疱疹患者80例,经治疗后存在神经痛症状者40例(观察组)、不存在神经痛症状者40例(对照组)。收集两组治疗前的血液,采用非标定量法蛋白质组学技术分析血清中的差异蛋白。结果与对照组比较,观察组有4种蛋白质表达下调、7种蛋白质表达上调。进一步的差异蛋白分析结果显示,表达下调的4种蛋白质分别为纤维胶凝蛋白1(FCN1)、丝氨酸蛋白酶抑制剂家族D成员1(SERPIND1)、脱脂转化酶(LPA)和蛋白二硫化物异构酶A4(PDIA4),表达上调的7种蛋白质分别为Wnt诱导信号通道蛋白2(WISP2)、免疫球蛋白λ变量1-44(IGLV1-44)、免疫球蛋白重常数γ1(IGHG1)、载脂蛋白C3(APOC3)、半乳糖凝集素1(LGALS1)、中间α-球蛋白抑制因子H1(ITIH1)和C1Q肿瘤坏死因子相关蛋白3(C1QTNF3)。结论PHN患者血清FCN1、SERPIND1、LPA、PDIA4蛋白表达下调,WISP2、IGLV1-44、IGHG1、APOC3、LGALS1、ITIH1和C1QTNF3蛋白表达上调,上述差异表达蛋白可能参与了PHN的发病。

cAMP-PKA信号通路参与电针调控兔退变椎间盘AQP1、AQP3表达的机制研究

目的：探讨cAMP-PKA信号通路参与电针调控兔退变椎间盘AQP1、AQP3表达的作用机制。方法：选取成年雄性新西兰大白兔50只,按照随机数字表法分为空白组（A组）、假模型组（B组）、模型组（C组）、模型＋电针组（D组）和模型＋电针＋阻断组（E组）,每组10只。建立椎体间压力诱导椎间盘退变模型后,A组、B组和C组不进行任何干预,D组行电针夹脊穴治疗,E组行电针夹脊穴治疗和PKA抑制剂H-89（10μmol/L）皮下注射,电针治疗6 d为1疗程,疗程间隔1 d,共治疗4个疗程。分别在造模成功后第1天和治疗后28 d两个时间点各取5只,进行椎间盘矢状位MRI T2扫描,采用Western-blot技术检测各组椎间盘组织内AQP1、AQP3的表达水平,ELISA方法检测椎间盘组织内cAMP水平及PKA活性。结果：造模成功后第1天,C组、D组、E组AQP1、AQP3表达及cAMP、PKA活性浓度明显下降,差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗后第28天D组中AQP1、3的表达及cAMP、PKA活性浓度明显高于同期C组（P〈0.05）;E组中AQP1、AQP3表达及PKA活性浓度显著低于同期D组（P〈0.05）。

ROCK 1蛋白在非小细胞肺癌中的表达

近年来,有关Rho/ROCK信号通道的功能研究越来越广泛,尤其Rho/ROCK与肿瘤发展的相关性研究逐渐成为热点[1]。在Rho的亚类蛋白里ROCK 1功能方面的研究非常广泛,是Rho下游一种十分重要的靶效应物质[2]。结果表明,ROCK 1与肿瘤、特别是非小细胞肺癌的发生发展密切相关[3]。

血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1在CNS疾病中的作用研究新进展

血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK1)是1993年在受糖皮质激素刺激的大鼠乳腺癌细胞中发现的一个丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。与多数蛋白激酶不同的是,血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1不仅受翻译后的磷酸化/去磷酸化调节,而且存在转录水平上的快速调节机制。它具有广泛的生理功能,如调节离子通道,介导细胞增殖、分化、存活及凋亡的信号转导等。它与帕金森病、阿尔茨海默病等多种中枢神经系统疾病密切相关,在神经元变性、凋亡过程中起着重要作用。本文将从血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1的结构、生理功能、与中枢神经系统疾病的关系及其抑制剂等方面的新进展作一综述。

水通道蛋白1对人角膜内皮细胞增殖、迁移及凋亡影响的实验研究

目的探讨水通道蛋白1(AQP1)对人角膜内皮细胞(HCE)增殖、迁移及凋亡影响的机制。方法以质粒互补脱氧核糖核酸3.1(pcDNA3.1)为载体,将AQP1过表达质粒(pcDNA3.1-AQP1)、空载对照质粒(pcDNA3.1-NC)、AQP1小干扰核糖核酸序列(siRNA-AQP1)及对照序列(siRNA-NC)分别转染于HCE细胞内。按其转染类别分为非转染对照组(Control组)、pcDNA3.1-AQP1组、pcDNA3.1-NC组、siRNA-AQP1组及siRNA-NC组。采用实时荧光定量聚合酶链反应法、5-溴-2-脱氧尿嘧啶实验、Transwell小室法及流式细胞术分别检测细胞的AQP1信使核糖核酸表达量、增殖能力、迁移能力及凋亡情况。为明确p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)在其机制中的作用,在pcDNA3.1-AQP1组添加p38 MAPK激活剂10μmol/L茴香霉素,并将其命名为pcDNA3.1-AQP1+茴香霉素组,并采用蛋白印迹法检测紧密连接蛋白1(TJP1)、钠钾三磷酸腺苷酶、p38MAPK及磷酸化p38MAPK蛋白的表达含量。各组细胞AQP1信使核糖核酸相对表达量、细胞增殖活性、迁移率、凋亡率、TJP1、钠钾三磷酸腺苷酶蛋白表达量及磷酸化p38MAPK/p38MAPK比值均满足方差齐性和正态分布,以珋x±s表示,组间比较采用独立样本t检验。结果Control组、pcDNA3.1-NC组、siRNA-NC组、pcDNA3.1-AQP1组及siRNA-AQP1组HCE细胞AQP1信使核糖核酸相对表达量分别为(1.00±0.08)、(1.05±0.07)、(0.97±0.07)、(2.14±0.12)及(0.33±0.02)。与Control组比较,pcDNA3.1-NC组和siRNA-NC组比较的差异均无统计学意义(t=0.653,0.684;P>0.05),说明pcDNA3.1-NC组和siRNA-NC组未影响细胞,故后续指标检测不再检测该两组。pcDNA3.1-AQP1组HCE细胞增殖活性、细胞迁移率、细胞凋亡率、TJP1、钠钾三磷酸腺苷酶蛋白表达量及磷酸化p38MAPK/p38MAPK比值分别为(63.31±7.35)%、(74.28±7.04)%、(3.64±1.48)%、(1.73±0.13)、(2.04±0.15)及(0.18±0.02);siRNA-AQP1组分别为(22.15±3.26)%、(35.73±3.86)%、(20.35±2.83)%、(0.23±0.02)、(0.21±0.02)及(0.75±0.09);pcDNA 3.1-AQP1+茴香霉素组分别为(52.35±4.38)%、(58.74±5.42)、(6.73±0.53)%、(1.38±0.21)、(1.18±0.19)及(0.33±0.03)。pcDNA3.1-AQP1组与Control组各指标比较的差异均有统计学意义(t=3.844,3.534,3.253,4.253,4.753,4.321;P<0.05);siRNA-AQP1组与Control组各指标比较的差异均有统计学意义(t=4.136,3.741,3.621,3.426,4.122,4.894,3.795;P<0.05);pcDNA3.1-AQP1+茴香霉素组与pcDNA3.1-AQP1组各指标比较的差异均有统计学意义(t=3.251,3.363,3.053,3.242,3.674,4.264;P<0.05)。结论AQP1过表达能够促进HCE细胞增殖和迁移,抑制细胞凋亡,并参与维持HCE细胞功能,其作用机制可能与抑制p38MAPK信号通路激活有关。

猪流行性腹泻病毒nsp1蛋白对IFN-β激活的JAK/STAT信号通路的影响

为探索猪流行性腹泻病毒(PEDV)非结构蛋白nsp1对干扰素(IFN)激活的Janus激酶/信号转导和转录激活因子(JAK/STAT)信号通路的影响,将PEDV nsp1蛋白表达质粒转染HeLa细胞,并用IFN-β处理,应用Western-blot对STAT1、STAT2磷酸化以及早幼粒细胞白血病蛋白(PML)表达水平进行检测,应用IFA试验对STAT1、STAT2核移位以及PML蛋白表达水平进行检测,应用双荧光素酶分析系统对干扰素刺激反应元件(ISRE)-Luc进行检测,应用荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)对IFN刺激基因15(ISG15)、ISG56以及PML转录水平进行检测。结果显示,nsp1蛋白过表达细胞内STAT1和STAT2的蛋白表达水平、磷酸化作用以及磷酸化STAT1(pSTAT1)、pSTAT2的核移位不受影响,而ISRE启动子的表达水平受到显著抑制,ISG15、ISG56转录水平显著下调,PML转录水平和蛋白表达水平显著降低。结果表明,PEDV nsp1蛋白可以抑制IFN-β激活的JAK/STAT信号通路。

实验性大鼠肝纤维化TGFβ1及其受体mRNA与Smad3,7的表达

目的:研究四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化大鼠肝脏转化生长因子β1(TGFβ1)及其I,Ⅱ型受体(TGFR)、Smad3、Smad7的定位及表达. 方法:将24只大鼠随机分为正常对照组与模型组,模型组大鼠予以40%四氯化碳皮下注射8 wk后处死.RT-PCR检测肝组织TGFβ1,TGFR I与TGFRⅡ;免疫组化技术检测TGFβ1,Smad3,Smad7在肝脏的表达及细胞内的定位;放射免疫方法检测透明质酸,肝组织病理检查. 结果:与正常组大鼠比较,RT-PCR显示模型组大鼠肝内TGFβI、TGFR I与TGFR ⅡmRNA表达明显增高;免疫组化结果显示TGFβ1与Smad3表达增加,而Smad7的表达降低,TGFβ1与Smad3的免疫阳性反应信号主要位于纤维间隔中的细胞质,Smad7主要在肝细胞质表达(正常组与模型组大鼠TGFβ1、Smad、Smad7平均光度分别0.61±0.33与1.57±0.53,0.248±0.042与0.785±0.904, 4.674±1.143与0.470±0.097,P<0.05);模型组大鼠血清透明质酸水平明显增高(正常组大鼠78.4±1 9.2 μg/L, 模型组263.2±107.0 μg/L,P<0.01),肝组织HE染色支持肝纤维化改变. 结论:肝内TGFβ1,TGFR I,TGFR Ⅱ,Smad3表达增强、Smad7表达减弱,提示TGFβ1及其受体与Smad信号通道蛋白参与了肝纤维化的发生发展,可作为防治肝纤维化发生发展的新途径之一.

MAPK信号通路在复方丹参注射液调节人羊膜上皮细胞AQP3表达中的作用研究

目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)―细胞外信号调节激酶1和2(extracellular signal regulated kinase1/2,ERK1/2)信号转导通路在复方丹参注射液对人足月妊娠羊膜上皮细胞水通道蛋白3(aquaporin3,AQP3)表达调节中的作用。方法原代培养足月妊娠羊水量正常与羊水过少人羊膜上皮细胞,将人羊膜上皮细胞均分为4组:分别为空白对照组、U0126组、复方丹参注射液组和U0126加复方丹参注射液组。采用免疫印迹技术检测人羊膜上皮细胞中磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)和AQP3的表达。结果 (1)在羊水量正常和羊水过少人羊膜上皮细胞中,均发现p-ERK1/2表达水平在U0126组较空白对照组明显下降(P<0.05),而复方丹参注射液组可以明显上调p-ERK1/2表达水平(P<0.05),U0126加复方丹参注射液组人羊膜上皮细胞中p-ERK1/2表达水平高于U0126组,但低于复方丹参注射液组(P<0.05)。(2)在羊水量正常的人羊膜上皮细胞中,U0126组AQP3的表达与空白对照组比较无明显变化(P>0.05);复方丹参注射液组和U0126加复方丹参注射液组AQP3的表达水平均高于空白对照组(P<0.05),但两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。(3)在羊水过少羊膜上皮细胞中,U0126组AQP3的表达较空白对照组下降(P<0.05);复方丹参注射液组可以明显上调AQP3的表达水平(P<0.05),而U0126加复方丹参注射液组AQP3的表达水平低于复方丹参注射液组(P<0.05),但高于U0126组(P<0.05)。结论羊水过少时,复方丹参注射液通过激活MAPK-ERK1/2信号转导通路来调节人羊膜上皮细胞中AQP3的表达水平。

内皮素-1对新生大鼠心肌细胞的影响及机制

目的:研究内皮素-1(ET-1)诱导心肌肥大的机制及对抗的药物。方法:在培养新生大鼠心肌细胞中,采用L-型钙通道阻滞剂拉西地平(larc id ip ine)和MN9202、钙激活氯通道阻断剂尼氟灭酸(n iflum ic ac id,NFA)、蛋白激酶C(prote in k inase C,PKC)通路的阻断剂白屈菜季氨碱(chelerythrine,che)和ERK通路阻断剂PD98059(PD)观察内皮素-1在诱导心肌蛋白质合成中的影响。结果:对照组(DMEM)蛋白质含量为273±20μg/m l,ET-1组为312±30μg/m l,较对照组升高14%。ET-1+NFA组、ET-1+che组、ET-1+MN9202组、ET-1+larc id ip ine组、ET-1+PD98059组分别为280±10μg/m l、283±10μg/m l、285±27μg/m l、275±22μg/m l、293±33μg/m l;与ET-1组比较分别降低10%、9%、8.6%、13.1%、6.1%。结论:ET-1刺激引起的心肌细胞蛋白合成与钙激活氯通道和L-型钙通道有关,PKC和ERK通路在ET-1诱导心肌肥大的信号转导通路中起重要作用。

盐酸伊立替康注射液对直肠癌晚期患者血清GPX3及肿瘤组织液WISP2、FGFBP1的影响

目的探讨盐酸伊立替康注射液对直肠癌晚期患者血清谷胱甘肽过氧化物酶3(glutathione peroxidase 3,GPX3)、肿瘤组织液中WNT1诱导信号通道蛋白2(WNT1 inducible signaling pathway protein 2,WISP2)及成纤维细胞生长因子结合蛋白1(fibroblast growth factor binding protein 1,FGFBP1)的影响。方法选取郑州大学附属肿瘤医院已确诊为晚期直肠癌患者90例,随机分为实验组和对照组,对照组给予奥沙利铂+亚叶酸钙+氟尿嘧啶化疗方案,实验组给予奥沙利铂+亚叶酸钙+盐酸伊立替康化疗方案,每4周重复1次,共6次。治疗前后分别检测2组患者的血清GPX3蛋白含量、肿瘤组织液WISP2、FGFBP1蛋白水平,评价临床疗效。结果与对照组比较,实验组患者血清GPX3蛋白含量明显升高(P<0.05);肿瘤组织液WISP2蛋白水平显著升高(P<0.05);肿瘤组织液FGFBP1蛋白水平显著降低(P<0.05);实验组的总有效率为明显高于对照组(64.44%vs.42.22%;χ2=4.46,P<0.05),实验组的临床获益率明显高于对照组(93.33%vs.75.56%;χ2=5.41,P<0.05)。结论盐酸伊立替康注射液能够使直肠癌晚期患者血清WISP2、肿瘤组织液GPX3表达水平升高,肿瘤组织液FGFBP1表达水平降低,具有良好的临床疗效。

植物水通道蛋白结构与功能及其识别与转导水稻黄单胞菌Hpa1信号的机制

植物水通道蛋白PIP不仅担负细胞间或细胞内外水分子输导的基本功能,还参与植物-微生物互作与植物防卫反应,这种双重功能的调控机制目前还不清楚。水稻OsPIP1;2和拟南芥AtPIP1;4可以与水稻黄单胞III型泌出蛋白Hpa1互作,Hpa1定位于植物细胞的质外体,诱导过氧化氢在质外体产生及向原生质转运,进而影响植物防卫反应与对病原细菌的抗性。根据植物水通道蛋白拓扑结构与病原细菌Ⅲ型分泌系统工作模型,水稻OsPIP1;2与Hpa1互作的功能域是互作发生的分子基础。互作引发信号转导,调控过氧化氢信号从植物细胞的质外体向原生质转运与植物防卫反应。由于Hpa1对Ⅲ效应蛋白来说具有转位子的功能特征,OsPIP1;2-Hpa1还可能对水稻黄单胞菌Ⅲ型效应蛋白从细菌细胞向植物细胞转运发生调控作用。围绕这些设想进行研究,可以深入阐释水稻-黄单胞菌互作机制,同时为植物水通道蛋白功能调控提供新的见解。

游离脂肪酸对大鼠肺微血管内皮细胞AQP1的表达调节及其作用机制

目的研究混合游离脂肪酸(FFA)对大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)中水通道蛋白1(AQP1)的表达调节及其作用机制。方法 Western blotting检测FFA处理不同时间后大鼠PMVECs内AQP1蛋白表达变化;Western blotting和real-time PCR检测不同浓度的FFA处理后大鼠PMVECs内AQP1蛋白和mRNA表达变化;用SB203580抑制p38 MAPK通路,Western blotting检测FFA处理对AQP1表达的影响。结果 FFA处理6、12 h后大鼠PMVECs内AQP1蛋白表达量显著高于空白组(P=0.000,P=0.003)。FFA(200μmol/L)组和FFA(500μmol/L)组AQP1蛋白表达量显著高于空白对照组(P=0.007,P=0.002)。FFA(100μmol/L)组、FFA(200μmol/L)组和FFA(500μmol/L)组AQP1 mRNA表达量显著高于空白对照组(P=0.000)。SB203580预处理可抑制FFA诱导的大鼠PMVECs内AQP1蛋白表达量的增加(P=0.016)。结论 FFA可以上调AQP1的表达,对脂肪栓塞中AQP1介导的肺内水转运过程有一定程度的影响,其调控机制可能与p38MAPK信号通路活化有关。

温阳通脉方通过JAK2/STAT3信号通路保护大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的探讨温阳通脉方是否通过Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号转导通路,调节水通道蛋白(AQP)的表达,发挥对缺血再灌注心肌组织的保护作用。方法将30只雄性SD大鼠随机分为5组,每组6只:假手术组、模型组及温阳通脉方低剂量治疗组、中剂量治疗组和高剂量治疗组。将大鼠灌胃给药14天后,结扎心脏左冠状动脉前降支,按缺血30min再灌注120min的方法建立心肌缺血再灌注损伤模型。全自动生化分析仪检测各组大鼠的血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH);心电图检测大鼠ST段抬高情况;HE染色观察心脏组织病理形态学变化;免疫组织化学染色检测心肌组织中AQP1、AQP4蛋白的表达;Westernblot检测JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、AQP1、AQP4的蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠血清中的CK-MB、LDH含量显著上升(P<0.01),缺血30min与再灌注120min后心电图的ST段显著抬高(P<0.01),HE染色显示模型组的心肌细胞损伤严重,AQP1、AQP4免疫组织化学表达明显增多(P<0.01),JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、AQP1、AQP4的蛋白表达均明显升高(P<0.01)。与模型组相比,给药大鼠CK-MB、LDH水平明显降低(P<0.01),缺血30min与再灌注120min后的ST段均降低(P<0.01),心肌细胞损伤均可见不同程度减轻,AQP1、AQP4免疫组织化学表达明显减少,JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3整体的表达呈升高趋势,尤其是p-JAK2和p-STAT3的表达(P<0.01),AQP1、AQP4的水平均有不同程度降低(P<0.01)。结论温阳通脉方的心肌保护作用可能与激活JAK2/STAT3信号通路,下调AQP1和AQP4的表达有关。