冠心宁对冠心病舒张性心力衰竭患者血清转化生长因子β1及结缔组织生长因子的影响

目的:观察冠心宁对冠心病舒张性心力衰竭(DHF)患者血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)的影响。方法:选取100例DHF患者,按随机数字表法分为常规组及治疗组各50例。常规组采用强心、利尿、扩管等基础治疗,治疗组在常规组治疗基础上加用冠心宁片。比较2组临床疗效及不良反应发生率,比较2组治疗前后TGF-β1、CTGF水平、Lee氏心衰评分、改良早期预警量表(MEWS)评分的变化,进行Pearson相关性分析。结果:治疗组临床总有效率为96.00%,常规组为84.00%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组TGF-β1、CTGF水平均较治疗前下降(P<0.05),治疗组TGF-β1、CTGF水平均低于常规组(P<0.05)。治疗后,2组Lee氏心衰评分、MEWS评分均较治疗前下降(P<0.05),治疗组Lee氏心衰评分、MEWS评分均低于常规组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,Lee氏心衰评分、MEWS评分与TGF-β1、CTGF的表达水平均呈正相关。其中Lee氏心衰评分与TGF-β1呈中度相关,与CTGF呈高度相关,MEWS评分与TGF-β1、CTGF均呈正相关。常规组不良反应发生率为16.00%,治疗组为6.00%,2组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:冠心宁治疗冠心病DHF可提升疗效,改善患者的病情及预后,安全性高。

透析液中结缔组织生长因子、纤溶酶水平与腹膜透析患者腹膜溶质转运速率的关系

目的 探讨透析液中结缔组织生长因子(CTGF)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)水平与腹膜透析(PD患者腹膜溶质转运速率(PSTR)的关系。方法 选取2020年1月至2022年12月江苏省连云港市第二人民医院收治的152例PD患者,根据标准腹膜平衡试验分为快速转运组和非快速转运组。采用酶联免疫吸附试验检测透析液中CTGF、PAI-1水平。采用多因素logistic回归分析PD患者PSTR快速转运的影响因素,采用受试者操作特征曲线分析透析液中CTGF、PAI-1水平对PD患者PSTR快速转运的评估价值。结果 152例PD患者PSTR快速转运发生率为57.24%(87/152)。快速转运组透析液中CTGF、PAI-1水平高于非快速转运组(P<0.05)。快速转运组透析龄、夜间超滤量高于非快速转运组,白蛋白水平低于非快速转运组(P<0.05)。透析龄延长(OR=1.051,95%CI:1.023~1.081)和CTGF(OR=1.298,95%CI:1.165~1.446)、PAI-1(OR=1.408,95%CI:1.205~1.646)升高为PD患者PSTR快速转运的独立危险因素(P<0.05)。透析液中CTGF联合PAI-1预测PD患者PSTR快速转运的曲线下面积大于二者单独预测(P<0.05)。结论 透析液中CTGF、PAI-1水平升高与PD患者PSTR快速转运独立相关,二者联合对PD患者PSTR快速转运评估价值较高,可能成为PD患者PSTR快速转运的辅助评估指标。

肾结石经输尿管软镜碎石术后血清神经导向因子-1、结缔组织生长因子水平对肾损伤的预测价值

目的 探讨血清神经导向因子-1(Netrin-1)、结缔组织生长因子(CTGF)对肾结石经输尿管软镜碎石术后肾损伤的预测价值。方法 2020年3月~2022年3月我院收治的肾结石病人104例,均采用经输尿管软镜碎石术治疗,选取同期我院健康体检者98例为对照组。将输尿管软镜碎石术后肾结石病人分为肾损伤组(58例)和非肾损伤组(46例)。使用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清Netrin-1、CTGF的表达水平。采用单因素分析及多因素Logistic回归分析肾结石经输尿管软镜碎石术后出现肾损伤的影响因素,采用受试者工作特性(ROC)曲线评估血清Netrin-1、CTGF对肾结石经输尿管软镜碎石术后肾损伤的预测价值。结果 研究组血清Netrin-1、CTGF表达水平均高于对照组;肾损伤组血清Netrin-1、CTGF水平高于非肾损伤组;多因素Logistic回归分析显示,Netrin-1≥300 ng/L、CTGF≥0.80 ng/L是输尿管软镜碎石术后肾损伤的危险因素(P<0.05)。血清Netrin-1、CTGF在预测经输尿管软镜碎石术后肾结石病人发生肾损伤的AUC分别为0.731(95%CI:0.668~0.813)、0.845(95%CI:0.798~0.892),两者联合预测的AUC为0.903(95%CI:0.852~0.955)。结论 血清Netrin-1、CTGF表达水平升高与输尿管软镜碎石术后出现肾损伤密切相关,可作为评估输尿管软镜碎石术后早期肾损伤生物学指标,且两者联合预测的效能更高。

结缔组织生长因子在神经系统中的功能与作用

背景:近期有研究表明,结缔组织生长因子不仅参与神经元的发育,而且参与神经退行性疾病、抑郁症、癫痫等的发病过程,还可作为治疗靶点开发相关药物,从而改善患者的生活质量。目的:总结结缔组织生长因子的生物学功能和参与神经退行性疾病、抑郁症等其他神经系统疾病的机制,以及干预结缔组织生长因子改善疾病症状和相关新兴治疗手段的进展。方法:由第一作者检索PubMed及Web of Science数据库中收录的相关文献,检索词为“connective tissue growth factor,nervous system,depression,Alzheimer disease,Parkinson disease,epilepsy,amyotrophic lateral sclerosis,FG-3019”,文献检索时限为1996年1月至2022年12月,经过阅读并筛选整理,选择与综述内容相符的文献,最终确定整理出51篇文献进行综述。结果与结论:①结缔组织生长因子通过4个不同的结构域在不同条件下参与纤维化、细胞黏附、细胞发育等多项生物学活动;②结缔组织生长因子在神经退行性疾病、抑郁和癫痫等其他神经系统疾病的病变相关脑区和部位发生上调,干预结缔组织生长因子的表达后症状好转或消失,提示结缔组织生长因子在这些疾病发展过程中发挥重要作用;③围绕结缔组织生长因子开发新的治疗策略和干预靶点是非常有前景的治疗研究,要实现由基础研究到临床转化应用还需要更多机制方面的研究,以达到更安全有效的治疗效果。

果王素通过下调结缔组织生长因子表达防治大鼠放射性肺损伤

目的动态观察果王素对放射性肺损伤(RILI)大鼠肺组织中结缔组织生长因子(CTGF)蛋白及mRNA表达的影响,探讨果王素是否可通过调节CTGF防治RILI。方法将SD大鼠90只按随机数字表法分为空白组对照组、模型组、果王素低、中、高剂量组(果王素剂量分别为60 mg/kg、120 mg/kg、240 mg/kg)。除空白对照组,其它各组大鼠给予全胸部放射构建大鼠RILI动物模型,在放射前7 d,低、中、高剂量果王素组分别按果王素60 mg/kg、120 mg/kg、240 mg/kg加入0.9%氯化钠,配成溶液1 mL,每日灌胃1次,直至处死;空白对照组与模型组同一时间给予1 mL 0.9%氯化钠灌胃,放疗结束后第14、28、56天分别随机处死各组大鼠6只,HE、Masson染色观察肺组织病理改变,采用免疫组化、Western blot、qRT-PCR检测CTGF蛋白质及mRNA的表达。结果相比模型组,低、中、高剂量果王素干预组肺组织肺泡炎和肺纤维化减轻,肺泡炎及纤维化评分降低,CTGF蛋白及CTGF mRNA表达减少(均P<0.05),低、中、高剂量果王素干预组组间比较,剂量越高上述变化越明显(P<0.05)。结论果王素对RILI具有防治作用,且防治效果与果王素浓度正相关,其机制可能与下调CTGF表达有关。

血清血管内皮生长因子、结缔组织生长因子和转化生长因子-β1水平与乙型病毒性肝炎肝硬化分级的关系分析

目的 对血清血管内皮生长因子(VEGF)、结缔组织生长因子(CTGF)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平与乙型病毒性肝炎肝硬化分级的关系进行探讨,为临床提供参考。方法 回顾性分析2020年1月至2023年8月庆阳市人民医院收治的50例乙型病毒性肝炎肝硬化患者的临床资料纳为观察组,另回顾性分析同期于庆阳市人民医院进行体检的30例健康体检者的临床资料纳为对照组。比较两组研究对象血清VEGF、CTGF和TGF-β1水平。按照肝功能分级的不同把观察组患者分为Child-Pugh A级组(18例)、ChildPugh B级组(20例)和Child-Pugh C级组(12例)。比较3组患者血清VEGF、CTGF和TGF-β1水平,并分析血清VEGF、CTGF和TGF-β1水平与乙型病毒性肝炎肝硬化患者肝功能分级的相关性。结果 与对照组比较,观察组患者的血清VEGF、CTGF和TGF-β1水平均更高(均P<0.05)。与Child-Pugh A级组和Child-Pugh B级组比较,Child-Pugh C级组患者血清VEGF、CTGF和TGF-β1水平均更高,与Child-Pugh A级组比较,Child-Pugh B级组患者血清VEGF、CTGF和TGF-β1水平均更高(均P<0.05)。Spearman相关性分析显示,血清VEGF、CTGF和TGF-β1水平与乙型病毒性肝炎肝硬化患者肝功能分级均呈正相关(均P<0.05)。结论 血清VEGF、CTGF和TGF-β1水平与乙型病毒性肝炎肝硬化分级呈正相关,可反映疾病严重程度,临床应密切监测上述指标。

人脐带间充质干细胞对大鼠肺成纤维细胞分泌Smad2蛋白、结缔组织生长因子的影响

目的探究人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对转化生长因子-β(TGF-β)诱导的大鼠肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的过程及结局的影响。方法从10只健康雌性无特定病原体级(SPF级)大鼠中提取肺成纤维细胞,用5 ng/mL TGF-β处理大鼠原代肺成纤维细胞的同时,给予不同浓度的hUC-MSCs对其共培养,其中A组(模型组,加入40μL TGF-β)、B组(5×10^(5)hUC-MSCs治疗组,加入40μL TGF-β和1 mL 5×10^(5)个hUC-MSCs)、C组(2×10^(6)hUC-MSCs治疗组,加入40μL TGF-β和1 mL 2×10^(6)个hUC-MSCs)、D组[正常组,加入磷酸盐缓冲液(PBS)40μL],采用蛋白免疫印迹法检测各组细胞内胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)、α-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)蛋白表达量;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测各组细胞内结缔组织生长因子(CTGF),Smad2 mRNA的相对表达量。用5 ng/mL TGF-β处理大鼠原代肺成纤维细胞48 h后,将其诱导转化为肌成纤维细胞,再和不同浓度的hUC-MSCs共培养24 h,其中A组(模型组,加入40μL TGF-β)、B组(5×10^(5)hUC-MSCs治疗组,加入1 mL 5×10^(5)个hUC-MSCs)、C组(2×10^(6)hUC-MSCs治疗组,加入1 mL 2×10^(6)个hUC-MSCs)、D组(正常组,不用40μL TGF-β诱导,加入PBS 40μL),采用蛋白免疫印迹法检测各组肌成纤维细胞内CollagenⅠ、a-SMA蛋白表达量;采用RT-PCR检测各组肌成纤维细胞CTGF、Smad2 mRNA的相对表达量。结果在TGF-β诱导的大鼠肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化过程中,A、B、C、D组大鼠CollagenⅠ和a-SMA的蛋白表达量均呈现降低趋势(均P<0.05);A、B、C、D组大鼠CTGF和Smad2 mRNA的相对表达量均呈现逐渐降低趋势(均P<0.05);大鼠原代肺成纤维细胞诱导转化为肌成纤维细胞后与不同浓度的hUC-MSCs共培养中,A、B、C、D组小鼠CollagenⅠ蛋白相对表达量和a-SMA蛋白相对表达量均呈现降低趋势(均P<0.05),但A组和B组小鼠CollagenⅠ蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05);A、B、C、D组大鼠CTGF和Smad2 mRNA的相对表达量均呈现逐渐降低趋势(均P<0.05),但B组和C组大鼠Smad2 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(均P<0.05)。结论hUC-MSCs可减少TGF-β诱导大鼠肺成纤维细胞转化为肌成纤维细胞过程中表达Collagen、a-SMA蛋白及CTGF、Smad2 mRNA,降低肌成纤维细胞表达CollagenⅠ、a-SMA蛋白及CTGF、Smad2 mRNA,且高浓度的hUC-MSCs效果最显著。

结缔组织生长因子体外促进人增生性瘢痕成纤维细胞转分化的研究

目的研究结缔组织生长因子(connectivetissuegrowthfactor,CTGF)在人增生性瘢痕成纤维细胞转分化中的作用。方法培养人增生性瘢痕成纤维细胞,分别给予不同剂量CTGF刺激(10ng/ml),以及CTGFASODN转染,48h后用Westernblot方法比较各组间α平滑肌肌动蛋白(αsmoothmuscleactin,αSMA)的表达变化。结果刺激48h后,对照组表达少量αSMA蛋白;小剂量CTGF刺激组和大剂量CTGF刺激组作用48h后,αSMA表达量均显著增多,且成浓度依赖性变化(P<0.01);而CTGFASODN转染组αSMA蛋白表达与对照组比较明显减少(P<0.05)。结论CTGF在体外能促进人增生性瘢痕成纤维细胞向肌成纤维细胞(myofibroblast,MyoF)的转分化,阻断或者抑制其表达可能将更有效的治疗瘢痕挛缩。

单核细胞趋化蛋白-1和转化生长因子β_1及结缔组织生长因子在2型糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达

目的观察单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)在链脲佐菌素(STZ)诱发的2型糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达。方法将35只SD雄性大鼠随机分为对照组14只和糖尿病肾病组21只。糖尿病肾病组给予高脂饮食,产生胰岛素抵抗后一次性腹腔注射STZ,35 mg/kg;对照组给予常规饲料,腹腔注射等量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。采用免疫组织化学法检测两组大鼠肾组织3种因子的表达。结果 MCP-1、TGF-β1、CTGF在STZ诱导的2型糖尿病肾病大鼠肾组织中(主要在肾小管)有较强的表达,糖尿病肾病组大鼠3种因子的平均吸光度分别为(0.29±0.04)、(0.20±0.02)、(0.20±0.02),对照组大鼠分别为(0.21±0.02)、(0.17±0.01)、(0.16±0.02),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MCP-1、TGF-β1、CTGF在STZ诱导的2型糖尿病肾病大鼠肾组织中表达增强,参与了糖尿病肾病早期的发病。

创面愈合及瘢痕形成中的结缔组织生长因子

背景:创面愈合是外科学研究的热点。结缔组织生长因子参与调节皮肤创面愈合过程并发挥了重要作用。目的:综述结缔组织生长因子在创面中的表达规律及其在瘢痕愈合和创面愈合中的作用。方法:运用计算机检索中国CNKI学术总库(www.cnki.net)、万方数据库、维普中文科技期刊数据库、Springer Link及Pub Med数据库相关文章。以"结缔组织生长因子;瘢痕;创面愈合;再生"为中文检索词;以"CTGF;CCN2;Wound healing;Regeneration"为英文检索词。纳入37篇关于结缔组织生长因子的基础研究及其在创面愈合实验中相关研究进行讨论。结果与结论:结缔组织生长因子在皮肤创面愈合及瘢痕形成过程中呈动态表达。在创伤修复初期,结缔组织生长因子的短暂上调可促进肉芽组织和新生血管形成等加速创面修复过程;在伤口修复和重塑阶段的持续表达可明显促进过度基质的产生、胶原沉积和瘢痕挛缩,导致病理性瘢痕的发生。结缔组织生长因子参与了皮肤创面的愈合过程,其在加速创面愈合和控制瘢痕形成方面可能具有应用前景。结缔组织生长因子作为转化生长因子β的下游产物,除本身的生物学作用外,其介导转化生长因子β的促成纤维细胞增殖、促纤维化、诱导黏附及迁移等作用是其影响创面愈合的作用机制之一。

低氧刺激结缔组织生长因子表达与肾间质纤维化

目的 :观察低氧对结缔组织生长因子 (CTGF)表达的影响 ,探讨低氧致肾间质纤维化的机制。方法 :单侧输尿管结扎 (UUO) 9d大鼠动物模型 ,用RT -PCR方法检测肾组织中低氧标记分子 -低氧诱导因子 (HIF - 1α)的mRNA水平 ,免疫组化方法观察假手术组及模型组肾组织中HIF - 1α和CTGF的表达及部位 ,Western蛋白印迹技术检测肾组织CTGF的蛋白水平。体外实验 ,正常大鼠肾间质成纤维细胞 (NRK - 4 9F)分别置于低氧 (1%O2 )和正常氧条件下培养 6h ,应用RT -PCR和Western蛋白印迹检测CTGFmRNA和蛋白表达水平。结果 :对照组肾组织未能检测到HIF - 1αmRNA和HIF - 1α蛋白表达 ;模型组肾组织有高水平HIF - 1αmRNA ,并出现HIF - 1α蛋白表达 ,主要分布在小管 -间质细胞 ;CTGF蛋白与HIF - 1α蛋白表达部位及程度一致 ;低氧 (1%O2 )培养刺激NRK - 4 9F细胞表达CT GFmRNA和蛋白。结论 :低氧刺激的CTGF的表达增加与肾间质纤维化的发生有关。

天然水蛭素对实验性肝纤维化大鼠肝脏结缔组织生长因子mRNA表达的影响

目的观察水蛭素对肝纤维化大鼠肝脏组织结缔组织生长因子(Connective tissue growth factor,CTGF)mRNA表达的影响。方法SD大鼠60只随机分为空白对照组、模型组和水蛭素组共3组,每组20只,用40%四氯化碳(carbon tetra-chloride,CC l4)复制大鼠肝纤维化模型,水蛭素干预12周后处死大鼠,采用实时荧光定量PCR法检测大鼠肝组织CTGFmRNA的表达。结果模型组CTGF mRNA 2-ΔΔC t值(3.59±0.52)显著高于正常对照组(1.02±0.23)(P<0.05),表明模型组CTGF mRNA表达上调。与模型组比较,水蛭素组CTGF mRNA 2-ΔΔC t值(1.83±0.34)显著降低(P<0.05),表明CTGF mRNA表达下调。结论水蛭素可能通过下调CTGF mRNA的表达,抑制肝脏细胞外基质异常增生发挥抗肝纤维化作用。

黄芪甲苷对慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化和结缔组织生长因子表达的影响

目的：研究黄芪甲苷对腹主动脉缩窄术致慢性心力衰竭（CHF）大鼠心肌纤维化和结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响。方法：SD雄性大鼠100只，采用腹主动脉缩窄术建立CHF模型，实验分为假手术组（n=10）、模型组（n=12）和黄芪甲苷低、中、高3个剂量组（20、40、60mg／kg，n=12），每日灌胃给药1次，连续4周。4周后监测血液动力学指标，处死大鼠后计算左心质量指数（LVMI），常规行苏木素伊红（HE）染色法观察心肌组织形态学变化，Masson染色观察心肌纤维化程度，测量心肌胶原容积分数（CVF），逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）、免疫组化和蛋白免疫印迹（Western—blot）检测CTGF mRNA以及CTGF分子表达水平。结果：同模型组相比：黄芪甲苷低、中、高剂量组LVMI水平减弱；CVF减弱；黄芪甲苷中、高剂量组的左心室舒展末期压力下降、左心室收缩压下降，左心室内压最大变化速率上升，差异均有统计学意义（P〈0.05—0．01）。病理形态学明显改善。同假手术组的CTGF平均积分吸光度值（0．09±0．03）、心肌组织CTGF因子表达水平（0．15±0.02）相比，模型组的（0．45±0．04）、（0．57±0．06）均增加；同模型组相比，黄芪甲苷低、中、高剂量组CTGF的平均积分吸光度值（0．39±0．05、0．30±0.06、0．24±0．04）和心肌组织CTGF因子表达水平（0．44±0．05、0．35±0．02、0．28±0．03）均降低，差异均有显著统计学意义（P〈0．01）。结论：黄芪甲苷能够抑制CHF大鼠的心肌纤维化和改善心功能，具体作用机制可能是通过抑制心肌组织中CTGF的过度表达来实现的。

高糖通过SGK_1通路促进人肾小球系膜细胞合成结缔组织生长因子

目的研究血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(SGK1)在高糖诱导人肾小球系膜细胞(HMC)产生结缔组织生长因子(CTGF)中的作用,探讨SGK1在糖尿病肾病(DN)肾小球硬化中的作用机制。方法HMC分为低糖组(5·5mmol·L-1D-葡萄糖)、高糖组(25mmol·L-1D-葡萄糖)和甘露醇对照组(19·5mmol·L-1甘露醇和5·5mmol·L-1D-葡萄糖),刺激24、72h后,采用RT-PCR方法和West-ernblot方法检测CTGFmRNA及蛋白的表达;将带有SGK1显性激活型突变体质粒(pIRES2-EGFP-S422DhSGK1,SD)和带有SGK1显性失活型突变体质粒(pIRES2-EGFP-K127NhSGK1,KN)分别瞬时转染HMC;同时,设空质粒(PIRES2-EGFP,FP)转染组和未转染组(NT)为对照。分别用低糖(LG,5·5mmol·L-1D-葡萄糖)和高糖(HG,25mmol·L-1D-葡萄糖)刺激24、72h后,采用RT-PCR方法和Western blot方法检测CT-GF的mRNA及蛋白的表达。结果与低糖组和甘露醇组相比较,在高糖刺激下,HMC中CTGF mRNA及蛋白的表达明显上调;低糖环境下,转染SD的HMC与转染FP、NT组比较,其CTGFmRNA和蛋白的表达明显增加。转染KN的HMC与转染FP、NT组比较,其CTGF mRNA和蛋白的表达差异无显著性;高糖环境下转染SD的HMC与转染KN、转染FP、NT组比较,其CTGF mRNA和蛋白的表达明显增加。转染KN的HMC与转染FP、NT组比较,其CTGF mRNA和蛋白的表达明显减少。结论在DN中,高糖能促进HMC的CTGF mRNA及蛋白的表达,并且可以通过SGK1介导的信号通路来诱导人肾小球系膜细胞增加合成CTGF,这种新发现的信号通路,表明SGK1可能通过促进CTGF的合成来参与糖尿病肾病肾小球纤维化的发生。

黄芪对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织结缔组织生长因子表达的影响

目的:动态观察黄芪(AM)对单侧输尿管梗阻(UUO)所致大鼠肾小管间质纤维化的拮抗作用及对结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,初步探讨其可能的分子作用机制。方法:SD大鼠随机分为假手术(Sham)、UUO组和UUO+AM治疗组(AM组)。在造模后第7、14 d处死动物,观察肾脏病理改变。采用免疫组化方法检测肾组织中CTGF和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达。用实时荧光定量RT-PCR检测大鼠CTGF mRNA和α-SMA mRNA表达量。用Western blot检测大鼠CTGF蛋白表达量。结果:与假手术组相比,各时间点的UUO大鼠肾脏病理损害进行性加重,CTGF和α-SMA mRNA和蛋白表达随梗阻时间延长逐渐增高;黄芪治疗后可明显减轻UUO大鼠肾组织的肾小管损伤及肾间质纤维化,使UUO大鼠肾组织中高表达的CTGF和α-SMA降低(P<0.05)。结论:黄芪可能从核酸和蛋白水平抑制CTGF的表达,抑制肾小管上皮细胞转分化,减轻和改善UUO大鼠肾间质纤维化。

地龙成分对高糖刺激下人肾小球系膜细胞转化生长因子β_1和结缔组织生长因子表达的研究

目的:研究地龙成分含药血清对高糖刺激下人肾小球系膜细胞(HMC)增殖、分泌转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)的影响,并探讨其对糖尿病肾脏疾病的可能防治机制。方法:以HMC为研究对象,将培养的HMC分为空白对照组、高糖刺激组、地龙成分低、中、高剂量组和福辛普利组,用家兔的含药血清给药,分别给予相应处理24h、48 h和72 h后,采用4-甲偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,48 h的上清液采用ELISA法检测TGF-β1和CTGF的表达。结果:在同一时间点内,地龙低、中、高剂量组对HMC增殖的抑制作用不断增加,福辛普利组对HMC增殖的抑制作用和地龙中剂量组相当,在24 h、48 h和72 h内,各药物干预组对HMC增殖的抑制作用也不断增大,以地龙高剂量组最佳;与空白对照组比较,高糖刺激组上清液中TGF-β1和CTGF的含量明显增多;与高糖刺激组比较,地龙成分低、中、高剂量组随着药物浓度的增加,TGF-β1和CTGF的含量减少,福辛普利组上清液中TGF-β1和CTGF的含量与地龙成分中剂量组相当,但高于高剂量组,都具有统计学意义。结论:地龙成分对HMC增殖的抑制作用在一定范围内呈浓度、时间依赖关系,能够降低TGF-β1和CTGF的含量,以高剂量组最佳,优于福辛普利组,提示地龙成分可能通过抑制HMC的异常增殖和下调TGF-β1和CTGF的表达而发挥对糖尿病肾病的保护作用。

病理性瘢痕中胶原纤维形态和结缔组织生长因子表达的检测

目的 探讨结缔组织生长因子的表达与病理性瘢痕形成的相关性。方法 分别留取正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织标本 ,应用天狼猩红偏振光法检测组织纤维化程度 ,应用SABC免疫组织化学法和图像分析技术检测组织中结缔组织生长因子的表达。结果 和正常皮肤相比 ,增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织纤维化严重 ,结缔组织生长因子的表达显著增强。

隔药灸与电针对克罗恩病大鼠结肠转化生长因子β1和结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原和纤维连接蛋白表达的影响

背景:肠壁纤维化是克罗恩病的常见表现。转化生长因子β1是炎症性肠病中控制胶原合成和介导肠纤维化复杂调节机制中的重要生长因子,结缔组织生长因子是转化生长因子β特异性下游效应分子。目的:实验拟观察隔药灸与电针对克罗恩病大鼠结肠转化生长因子β1、结缔组织生长因子、Ⅰ型胶原及纤维连接蛋白表达的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-07/12在上海中医药大学实验动物中心和国家中医药管理局针灸免疫三级实验室、临床免疫三级实验室完成。材料:健康雄性SD大鼠60只,48只用于制备大鼠克罗恩病模型;三硝基苯磺酸由Sigma公司提供。方法:60只大鼠随机数字表法分为5组,模型组:不作任何治疗,作与隔药灸组相同的固定。隔药灸组:取天枢(双)、气海穴,每次每穴灸2壮,每日隔药饼灸1次,连续10d。电针组:取天枢(双)、气海穴,采用LD202H型韩氏神经穴位刺激仪电针刺激,频率2/50Hz,20min/次,1次/d,连续10d。药物组:美沙拉嗪灌胃治疗,2次/d,连续10d。正常组:无任何干预措施,作与隔药灸组相同的固定。主要观察指标:苏木精-伊红染色后光镜下观察结肠病理组织学变化;免疫组织化学方法检测结肠转化生长因子β1、结缔组织生长因子、Ⅰ型胶原及纤维连接蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链反应检测结缔组织生长因子mRNA的表达。结果:纳入SD大鼠60只,每组各取1只用于模型鉴定。模型组4只大鼠死亡,7只进入结果分析;其他4组随机取8只进入结果分析。①苏木精-伊红染色正常组可见正常结肠壁组织,黏膜完好;模型组溃疡形成,黏膜下层可见大量纤维组织增生而明显增宽,肉芽组织增生。隔药灸组、电针组和药物组病理组织学均较模型组改善。②与正常组比较,模型组大鼠Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白、转化生长因子β1、结缔组织生长因子蛋白表达以及结肠结缔组织生长因子mRNA表达均升高(P<0.01)。经治疗后,隔药灸组、电针组大鼠结肠Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白、转化生长因子β1、结缔组织生长因子蛋白表达均降低(P<0.05或P<0.01),但结缔组织生长因子mRNA变化不显著(P均>0.05);隔药灸组对结缔组织生长因子蛋白的下调作用较电针组更显著(P<0.01);药物组Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白、转化生长因子β1蛋白表达也显著降低(P<0.05或P<0.01),但结缔组织生长因子蛋白及mRNA变化不显著(P均>0.05)。结论:隔药灸和电针治疗能够下调克罗恩病大鼠结肠Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白、转化生长因子β1、结缔组织生长因子蛋白表达,隔药灸对结缔组织生长因子蛋白的调节作用优于电针。

冬虫夏草对糖尿病肾病模型鼠肾组织转化生长因子β_1、结缔组织生长因子表达的影响

目的:观察冬虫夏草制剂对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病肾病(DN)模型大鼠肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,探讨冬虫夏草制剂抗肾纤维化的作用机制。方法:45只Wistar大鼠随机分为正常组、DN模型组、冬虫夏草组。虫草组予人工冬虫夏草粉5·0g/(kg·d)进行干预。第2、4、6周处死大鼠(每组5只)。检测24h尿蛋白定量、血肌酐(SCr)水平和肾组织病理变化;用免疫组化法检测肾组织CTGF、Ⅳ胶原(ColⅣ)的表达;用RT-PCR法检测肾组织TGF-β1、CTGF、ColⅣmRNA的表达。结果:DN模型组尿蛋白排泄明显增加(P<0·01),SCr水平上升(P<0·05)同时肾组织内细胞基质增多,TGF-β1、ColⅣ和CTGF出现高表达。冬虫夏草制剂干预,与DN模型组比较,虫草干预组尿蛋白排泄明显减少,SCr水平降低,肾组织病理改变减轻,并且肾组织中TGF-β1、CTGF、ColⅣ表达均有下调(P<0·05或P<0·01)。结论:冬虫夏草制剂对DN具有一定肾保护作用及抗肾小球纤维化的作用,其作用机制可能是通过使TGF-β、CTGF的表达下调而实现的。

结缔组织生长因子在糖尿病大鼠肾脏中的表达及其意义

目的 :研究结缔组织生长因子 (CTGF)在链脲佐菌素 (STZ)诱导的糖尿病大鼠肾脏中的表达及其与肾小球肥大的关系。方法 :将SD大鼠随机分为正常对照 (N)组与糖尿病肾病(DN)组。大鼠单侧肾切除后 ,腹腔注射STZ诱导糖尿病模型 ,观察第 4、8、12周血糖、体重、尿白蛋白排泄 (Ualb)和 2 4h尿蛋白定量 (2 4hUpro)的变化 ,同时观察 12周时肌酐清除率(Ccr)、肾小球面积及体积、肾重、肾组织总蛋白含量和肾皮质CTGF表达的改变。结果 :DN组 2 4hUpro、Ualb和Ccr较N组明显增加 (P <0 .0 1) ,肾小球面积及体积、肾重和肾组织总蛋白含量均较N组显著增加 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。免疫组织化学半定量检测结果显示 ,DN组肾皮质CTGF表达较N组明显增加 (P <0 .0 1) ,CTGF表达与肾小球体积及 2 4hUalb呈显著正相关关系 (均为P <0 .0 5 )。结论