人脐带间充质干细胞对大鼠肺成纤维细胞分泌Smad2蛋白、结缔组织生长因子的影响

目的探究人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对转化生长因子-β(TGF-β)诱导的大鼠肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的过程及结局的影响。方法从10只健康雌性无特定病原体级(SPF级)大鼠中提取肺成纤维细胞,用5 ng/mL TGF-β处理大鼠原代肺成纤维细胞的同时,给予不同浓度的hUC-MSCs对其共培养,其中A组(模型组,加入40μL TGF-β)、B组(5×10^(5)hUC-MSCs治疗组,加入40μL TGF-β和1 mL 5×10^(5)个hUC-MSCs)、C组(2×10^(6)hUC-MSCs治疗组,加入40μL TGF-β和1 mL 2×10^(6)个hUC-MSCs)、D组[正常组,加入磷酸盐缓冲液(PBS)40μL],采用蛋白免疫印迹法检测各组细胞内胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)、α-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)蛋白表达量;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测各组细胞内结缔组织生长因子(CTGF),Smad2 mRNA的相对表达量。用5 ng/mL TGF-β处理大鼠原代肺成纤维细胞48 h后,将其诱导转化为肌成纤维细胞,再和不同浓度的hUC-MSCs共培养24 h,其中A组(模型组,加入40μL TGF-β)、B组(5×10^(5)hUC-MSCs治疗组,加入1 mL 5×10^(5)个hUC-MSCs)、C组(2×10^(6)hUC-MSCs治疗组,加入1 mL 2×10^(6)个hUC-MSCs)、D组(正常组,不用40μL TGF-β诱导,加入PBS 40μL),采用蛋白免疫印迹法检测各组肌成纤维细胞内CollagenⅠ、a-SMA蛋白表达量;采用RT-PCR检测各组肌成纤维细胞CTGF、Smad2 mRNA的相对表达量。结果在TGF-β诱导的大鼠肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化过程中,A、B、C、D组大鼠CollagenⅠ和a-SMA的蛋白表达量均呈现降低趋势(均P<0.05);A、B、C、D组大鼠CTGF和Smad2 mRNA的相对表达量均呈现逐渐降低趋势(均P<0.05);大鼠原代肺成纤维细胞诱导转化为肌成纤维细胞后与不同浓度的hUC-MSCs共培养中,A、B、C、D组小鼠CollagenⅠ蛋白相对表达量和a-SMA蛋白相对表达量均呈现降低趋势(均P<0.05),但A组和B组小鼠CollagenⅠ蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05);A、B、C、D组大鼠CTGF和Smad2 mRNA的相对表达量均呈现逐渐降低趋势(均P<0.05),但B组和C组大鼠Smad2 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(均P<0.05)。结论hUC-MSCs可减少TGF-β诱导大鼠肺成纤维细胞转化为肌成纤维细胞过程中表达Collagen、a-SMA蛋白及CTGF、Smad2 mRNA,降低肌成纤维细胞表达CollagenⅠ、a-SMA蛋白及CTGF、Smad2 mRNA,且高浓度的hUC-MSCs效果最显著。

结缔组织生长因子及吞噬和细胞运动蛋白1基因多态性与2型糖尿病肾病病位、病性的相关性研究

目的 探讨结缔组织生长因子(CTGF) rs2648875位点、吞噬和细胞运动蛋白1(ELMO1) rs10951509位点基因多态性与2型糖尿病性肾病(T2DKD)病位、病性的相关性。方法 选取2017年1月—2018年6月于泉州市中医院内分泌科住院及门诊就诊的T2DKD患者195例作为T2DKD组,同时选取泉州市中医院体检中心体检的健康人群134例作为对照组。采集四诊信息,运用证素辨证分析2组病位、病性证素分布特点,采用imLDRTM多重SNP分型试剂盒检测2组CTGF和ELMO1基因中AA、GA、GG基因型的分布频率。采用无序多分类Logistic回归分析CTGF、ELMO1基因型与病位、病性的相关性。结果 T2DKD组主要病位证素为肾、肝、脾,主要实证病性证素为湿、热、痰,主要虚证病性证素为阴虚、气虚、血虚、阳虚。2组患者CTGF基因AA、GA、GG基因型及EL-MO1基因AA、GA、GG基因型分布比较,差异有统计学意义(P<0.01)。以GG基因型作为参照,与非血瘀比较,携带CTGF基因AA、GA基因型的血瘀患者明显减少(P<0.01)。以GG基因型作为参照,与非阳虚比较,携带EL-MO1基因AA、GA基因型的阳虚患者明显增多(P<0.05)。结论 T2DKD主要病位在肾、肝、脾,而病性为虚实夹杂。CTGF基因rs2648875多态性与病性血瘀形成相关,ELMO1基因rs10951509多态性与病性阳虚形成相关。

结缔组织生长因子诱导大鼠心肌细胞肥大的作用及其与细胞外信号调节激酶1/2的关系

目的观察结缔组织生长因子(CTGF)诱导大鼠心肌细胞肥大的作用,探讨其作用与细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的关系。方法以培养的新生Sprague-Dawley(SD)大鼠心肌细胞为实验模型,用图象分析法测定心肌细胞表面积,用[3H]亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白合成速率,用考马斯亮兰法测定心肌细胞蛋白含量,用蛋白免疫印迹法(Westernblot)测定心肌细胞总ERK1/2(t-ERK1/2)与磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)的蛋白表达水平。结果(1)随着CTGF浓度的增加,心肌细胞表面积呈剂量依赖性增加,其中10、25、50、100μg/L的CTGF组心肌细胞表面积分别为(929·9±132·2)、(1411·3±129·2)、(1732·0±153·0)、(2040·6±205·4)μm2,均明显高于对照组心肌细胞表面积[(606·3±72·7)μm2,P均<0·01];100μmol/L的PD98059明显减少CTGF诱导的心肌肥大(P<0·01)。(2)随着CTGF浓度的增加,心肌细胞蛋白合成速率与蛋白含量呈剂量依赖性增加,CTGF组心肌细胞[3H]亮氨酸掺入率明显高于对照组(P<0·01);ERK1/2抑制剂PD98059明显减少CTGF诱导的心肌细胞[3H]亮氨酸掺入率及蛋白含量(P<0·01)。(3)随着CTGF浓度的增加,心肌细胞p-ERK1/2表达呈剂量依赖性增高,5、10、25、50、100μg/L的CTGF组的心肌细胞p-ERK1/2表达明显高于对照组,而t-ERK1/2在各组表达差异不明显。结论CTGF可诱导心肌细胞肥大,该作用可能是通过ERK1/2的磷酸化来实现的。

转化生长因子β_1刺激系膜细胞的Smad_2表达及对结缔组织生长因子产生的影响

目的 研究在转化生长因子β1 (transforminggrowthfactor -β1 ,TGF- β1 )刺激下系膜细胞表达Smad2 及对结缔组织生长因子(connectivetissuegrowthfactor ,CTGF)产生的影响。方法 培养第4代大鼠肾系膜细胞分为4组:对照组、1ng/mlTGF -β1 刺激组、5ng/mlTGF -β1 刺激组、Staurosporine抑制组。在15min、3 0min、1h、2h时用RT PCR测Smad2 mRNA的表达,用免疫组化测Smad2 蛋白的表达;同样在2 4h时用RT- PCR测CTGFmRNA的表达,用免疫组化测CTGF蛋白的表达。结果 体外培养的大鼠肾系膜细胞,在TGF -β1 刺激下,Smad2 CTGFmRNA和蛋白的表达明显增加(P <0 . 0 5 ) ,应用丝、苏氨酸激酶抑制剂Staurosporine抑制Smad2 磷酸化,可以明显减少TGF- β1 刺激下系膜细胞表达CTGF(P <0 . 0 5 )。结论 在系膜细胞,TGF- β1 主要依赖Smad信号通路调节CTGF的表达。

反义ERK2基因对结缔组织生长因子诱导肾小管上皮细胞向间充质转化的调控效应

目的研究细胞外信号调节激酶2(ERK2)信号转导通路对结缔组织生长因子(CTGF)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)向间充质细胞转化的调控效应。方法腺病毒介导的反义ERK2基因(Adanti-ERK2)按感染强度50、100、200转染HK-2细胞,确定最适感染强度。按作用因素的不同将HK-2细胞分为对照组、Ad-LacZ组、CTGF组和Adanti-ERK2组。免疫组织化学检测E-Cadherin和Vi mentin的表达,Western blot法检测E-Cadherin、Vi mentin及ERK2的表达变化;细胞接种Boyden小室1、3、5 d时检测各组HK-2细胞迁移数目的变化。结果①Adanti-ERK2转染HK-2细胞最适感染强度为100。②HK-2细胞在CTGF刺激下E-Cadherin蛋白表达明显减少,Vi mentin表达增加,同时细胞内的ERK2蛋白表达显著增加;而Adanti-ERK2组E-Cadherin和Vi mentin表达变化不明显,ERK2蛋白表达较对照组明显减少。③接种5 d,HK-2细胞在CTGF刺激下细胞运动能力显著高于其他各组,而Adanti-ERK2组与对照组和Ad-LacZ组相比差异无显著性意义。结论以反义ERK2基因治疗可以有效阻断CTGF诱导的肾小管上皮细胞向间充质转化。提示ERK2信号转导通路在该转化中发挥重要作用。

辛伐他汀对结缔组织生长因子诱导大鼠心肌细胞肥大的影响及其与ERK1/2的关系

目的观察辛伐他汀对结缔组织生长因子(CTGF)诱导大鼠心肌细胞肥大的影响,探讨其作用与细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的关系。方法以培养的新生的SD大鼠心肌细胞为实验模型,分为对照组(DMEM培养液)、CTGF(50ng/L)刺激组、CTGF+不同浓度辛伐他汀(Sim)组,分别用图像分析法测定心肌细胞表面积,[~3H]-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白合成速率,考马斯亮兰法测定心肌细胞蛋白含量,蛋白免疫印迹法测定心肌细胞总ERK1/2(t-ERK1/2)和磷酸化ERK1/2(pERK1/2)蛋白表达水平。结果 CTGF组的心肌细胞表面积、[3H]-亮氨酸掺入率、心肌细胞蛋白含量和p-ERK1/2表达均显著高于对照组(P<0.01);CTGF+不同浓度辛伐他汀(Sim)组的心肌细胞表面积、[3H]-亮氨酸掺入率、心肌细胞蛋白含量和pERK1/2表达分别与CTGF组比较均明显降低(P<0.01),而且随着Sim剂量逐渐增加时,这些指标也随之逐渐下降,除CTGF+10^(-5)mol/L Sim组和CTGF+10^(-4)mol/L Sim组之间的细胞蛋白含量无明显差异外,各Sim组间差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);且以上各项指标在CTGF+10^(-4)mol/L Sim组与对照组均无显著差异。t-ERK1/2的表达在各实验组间均无差异。结论辛伐他汀可剂量依赖性地抑制CTGF诱导的心肌细胞肥大,其作用机制可能与ERK1/2磷酸化有关。

LOXL2、TGF-β、CTGF在结缔组织病合并间质性肺病患者使用环磷酰胺治疗前后的变化及临床意义

目的:观察血清赖氨酰氧化酶样蛋白2(lysyl oxidase-like protein 2,LOXL2)、转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在结缔组织病合并间质性肺病(connective tissue disease and interstitial lung disease,CTD-ILD)患者使用环磷酰胺治疗前后的变化及临床意义。方法:选择2021年3月-2022年5月在内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院风湿免疫科收治的CTD-ILD并使用环磷酰胺针静脉滴注治疗的患者30例,观察患者治疗前基线期及使用环磷酰胺治疗12周后及24周后的临床资料、影像学资料及实验室资料,分析血清LOXL2、TGF-β、CTGF在CTD-ILD患者使用环磷酰胺治疗前后的变化及临床意义。结果:CTD-ILD患者使用环磷酰胺治疗24周后血清ESR、IgM、IgA、IgG水平明显降低,肺功能指标TLC、FVC、FEV1/FVC、DLCO%明显改善(P<0.05);治疗12周后及24周后血清LOXL2、TGF-β、CTGF的水平明显降低,6-MWT明显改善。HRCT评分与CRP评分明显降低(P<0.05);治疗12周后及24周后C-反应蛋白及血气分析指标PaO_(2)与PaCO_(2)变化差异不大(P>0.05)。CTD-ILD患者血清中LOXL2水平与ESR、IgA、IgG呈正相关(P<0.05);LOXL2与TGF-β、CTGF呈正相关(P=0.001、0.003);TGF-β与CTGF呈正相关(P=0.025)。结论:环磷酰胺治疗可能通过抑制血清LOXL2的表达进一步抑制TGF-β信号通路进而影响CTGF的表达而有效地控制CTD-ILD患者的肺纤维化。

当归注射液及前列腺素E_2对结缔组织生长因子在大鼠肺纤维化模型中表达作用的比较研究

目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)在大鼠肺间质纤维化中的表达及其在25%当归注射液、前列腺素E2(dmPGE2)的肺脏保护作用中的意义。方法SD大鼠随机分为对照组、模型组、当归组、PGE2组。按博莱霉素(BLM)5mg/kg体重复制大鼠肺纤维化模型,当归组、dmPGE2组术后分别给于25%当归注射液(腹腔内注射)、dmPGE2(肌肉注射),于第28天处死全部大鼠。制备大鼠肺组织切片,用原位杂交及免疫组化SABC法分别检测CTGF mRNA、纤维连结蛋白(FN)和Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)在肺内的表达,HE染色评价肺纤维化程度。结果模型组CTGF mRNA、FN和Col-Ⅲ的表达及肺纤维化程度明显高于对照组(P<0.01),而当归组及PGE2组明显低于模型组(P<0.01)。两治疗组间比较,除CTGF外,其余指标无显著性差异(P>0.05),各组指标的相关分析表明,CTGF表达水平与肺纤维化程度(r=0.886;P<0.01)、FN(r=0.836;P<0.01)和Col-Ⅲ(r=0.918;P<0.01)呈正相关关系。结论25%当归注射液可能通过下调CTGF而减轻肺间质纤维化。

N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸对大鼠矽肺的结缔组织生长因子和ERK1／2表达的调节作用

目的：探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸（AcSDKP）对大鼠矽肺纤维化模型肺组织中胶原含量、结缔组织生长因子（CTGF）和细胞外信号调节激酶1／2（ERK1／2）表达的影响。方法：选用非暴露式气管灌注法复制大鼠矽肺模型，并给予AcSDKP，采用羟脯氨酸测量法定量分析肺组织中总胶原蛋白的含量，免疫组织化学法、免疫印迹法检测肺组织内CTGF、phospho-ERK1／2及ERK1／2蛋白的表达。结果：AcSDKP治疗组胶原含量低于相对应的矽肺模型组。与相应的对照组相比，矽肺模型组大鼠肺组织内CTGF、phospho-ERK1／2蛋白表达均增加；与相应矽肺模型组相比，给予AcSDKP后，大鼠肺组织内CTGF、phospho-ERK1／2蛋白表达均明显降低。而各组间比较ERK1／2蛋白表达无明显改变。结论：AcSDKP可能通过阻断ERK1／2途径抑制了CTGF的表达，从而发挥抗矽肺纤维化的作用。

霉酚酸酯对2型糖尿病大鼠肾脏结缔组织生长因子表达的影响

目的:探讨霉酚酸酯对2型糖尿病大鼠肾脏结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:将实验动物分为正常对照组、糖尿病组及霉酚酸酯治疗组。霉酚酸酯组予霉酚酸酯(MMF)15m g/(kg·d)治疗。13周后检测各组大鼠尿白蛋白排泄率,内生肌酐清除率,血糖,血脂,血胰岛素;H E及PA S染色观察肾脏病理改变;免疫组化方法检测肾组织中结缔组织生长因子(CTGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIM P-1)的表达。结果:M M F可以减少2型糖尿病大鼠尿白蛋白排泄率及内生肌酐清除率;使大鼠肾脏组织中C TG F及TIM P-1的表达降低,M M P-9表达增加,并使肾脏病理改变好转。结论:霉酚酸酯对2型糖尿病大鼠肾脏有保护作用,其机制可能部分是通过下调2型糖尿病大鼠肾脏C TG F的表达及调节M M P-9和TIM P-1的平衡来实现的。

MG132对脂多糖作用下大鼠腹膜间皮细胞ERK1/2、结缔组织生长因子表达的影响

目的:观察在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激下,泛素蛋白酶体途径(ubiquitin proteasome pathway,UPP)对大鼠腹膜间皮细胞(RPMC)细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达的影响,并以蛋白酶体抑制剂MG132为阻断剂,探讨该途径在腹膜纤维化中的作用。方法:胰蛋白酶消化法原代和传代培养RPMC,经鉴定后第2代用于实验。按数字随机表法分为:(1)正常对照组;(2)LPS组:不同浓度LPS(1、10、100μg/ml)作用24h,10μg/mlLPS分别作用于RPMC0h、12h、24h、48h;(3)药物组:MG1320.5,1,2μmol/L预孵30min后加10μg/mlLPS作用24h。West-ern印迹测ERK1/2蛋白的表达。ELISA法检测细胞培养上清液中CTGF的含量。结果:与正常对照组相比,LPS可刺激RPMCp-ERK1/2蛋白的表达增高,24h是表达高峰(P<0.01),48h表达量降低,但仍高于正常组(P<0.01);t-ERK1/2各组表达差异无统计学意义。LPS诱导RPMCCTGF蛋白的表达增高,且呈现时间、剂量依赖性(P<0.05)。MG132能显著降低LPS所致的腹膜间皮细胞p-ERK1/2、CTGF蛋白的表达(P<0.05)。结论:MG132可降低由LPS诱导的腹膜间皮细胞p-ERK1/2、CTGF蛋白的表达,提示泛素蛋白酶体途径参与了腹膜间皮细胞的纤维化发展,阻断该途径有利于防治腹膜纤维化。

塞来昔布对2型糖尿病大鼠肾脏结缔组织生长因子表达的影响

目的:探讨塞来昔布对2型糖尿病大鼠肾脏结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:36只大鼠分成对照组及模型组,模型组通过采用4周高糖高脂饮食配合链脲佐菌素(STZ)诱导的方法来制备类似2型糖尿病的动物模型,然后随机将大鼠分成糖尿病组及治疗组,给药8周后观察血肌酐、血胰岛素、尿微量白蛋白、血糖的变化;HE及PAS染色观察肾脏病理改变;免疫组化方法检测肾组织中CTGF的表达。结果:塞来昔布可以减少2型糖尿病大鼠尿蛋白排泄率及血肌酐;使大鼠肾脏组织中CTGF的表达降低,并使肾脏病理改变好转。结论:塞来昔布对2型糖尿病大鼠肾脏有保护作用,其机制可能部分是通过下调2型糖尿病大鼠肾脏CTGF的表达来实现的。

结缔组织生长因子在2型糖尿病大鼠虹膜中的表达

目的探索2型糖尿病大鼠虹膜新生血管(new vascularization of iris,NVI)的形成与虹膜组织中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)表达的关系。方法将Wistar大鼠40只随机分为实验组和对照组,每组各20只大鼠。实验组大鼠通过腹腔注射STZ制备2型糖尿病大鼠模型,对照组为正常大鼠。造模成功后取出大鼠眼球,将实验组及对照组各取15只眼球用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,Elisa)定量分析大鼠虹膜中CTGF的表达情况,实验组及对照组另25只眼球取虹膜进行光镜和电镜观察(其中光镜观察各15只眼球,电镜观察各10只眼球)。结果光镜和电镜下将实验组与对照组相比较,实验组大鼠虹膜有明显的NVI的特征性改变,而对照组无显著改变。在实验组大鼠虹膜中CTGF的含量为(1010.49±8.18)ng·L-1,而在对照组大鼠虹膜中CTGF的含量为(644.82±8.08)ng·L-1,差异有统计学意义(P<0.001)。结论 2型糖尿病大鼠虹膜中CTGF的含量与其NVI的生成有一定关系。

血清结缔组织生长因子、血管生成素-2及糖类抗原125水平与子宫肌瘤患者术后转归的相关性

目的探讨血清结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、血管生成素-2(angiogenin-2,Ang-2)及糖类抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125)水平与子宫肌瘤患者术后转归的相关性。方法选取2015年6月至2016年6月湖北省中西医结合医院手术治疗的子宫肌瘤患者临床资料为研究对象,共纳入85例符合标准的子宫肌瘤患者,随访失联3例,根据术后3年是否复发分为复发组(25例)和未复发组(57例),分析影响子宫肌瘤术后复发的危险因素。结果①82例子宫肌瘤患者术后3年内复发25例,复发率为30.49%;②25例子宫肌瘤复发患者中无症状6例(24.00%),有症状表现19例(76.00%),临床表现以月经改变最为常见(11例,44.00%);③复发组多发肌瘤、最大肌瘤直径≥6cm患者比例显著高于未复发组,且复发组患者血清CTGF、Ang-2及CA125水平均高于未复发组(P<0.05);④肌瘤数目、最大肌瘤直径、血清CTGF、Ang-2及CA125水平为导致子宫肌瘤术后复发的独立危险因素(P<0.05)。结论子宫肌瘤患者行术后3年复发率较高,肌瘤数目、最大肌瘤直径及血清CTGF、Ang-2、CA125的表达与子宫肌瘤术后复发有关。

结缔组织生长因子增加TGFβ活化成肌纤维细胞的作用

探讨结缔组织生长因子 (CTGF)对转化生长因子 β1(TGFβ1)诱导成肌纤维细胞的影响及其与Smad信号通路的关系。细胞免疫组化检测成纤维细胞表型转化。Western免疫印迹法检测细胞α 平滑肌肌动蛋白 (α-SMA)及磷酸化Smad2的水平 ,免疫共沉淀检测Smad2 / 3与Smad4复合物的水平 ,提取核蛋白后再用Western免疫印迹法检测Smad2在细胞核内的聚积。结果显示CTGF不能使细胞表达α-SMA ,TGFβ1显著促进α- SMA表达 (p <0.0 1) ,CTGF加TGFβ1共同刺激又明显高于TGFβ1(p <0. 0 5 )。TGFβ1可明显诱导Smad2磷酸化、Smad2 / 3,4复合物形成以及Smad2在细胞核内的聚集 ,CTGF加TGFβ1联合刺激与TGFβ1相比没有明显变化。提示CTGF可以增强TGFβ1诱导的成肌纤维细胞生成 。

结缔组织生长因子对血管生成和细胞功能的调节

结缔组织生长因子(CTGF)是CCN家族的主要成员,是研究较多的CCN蛋白之一。CTGF能促进细胞的增殖、存活、迁移和黏附,调节血管生成分子(bFGF,VEGF)以及一些影响胞外基质完整性和稳定性的分子(胶原、MMPs和TIMPs)的活性。CTGF可以在多个控制位点采取直接或间接的机制调控细胞功能和血管生成。结合新的发现和新的视点,阐述CTGF对细胞功能和血管生成的调控作用以及与肿瘤生长的关系。

结缔组织生长因子联合尿β_2-微球蛋白检测在糖尿病肾病早期病变中的诊断价值

目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)联合尿β2-微球蛋白(β2-MG)检测在糖尿病肾病早期病变中的诊断价值。方法选取107例2型糖尿病患者,并根据24h尿蛋白排泄量将其分为正常尿蛋白组(35例)、微量尿蛋白组(35例)及临床尿蛋白组(37例),同时选取40例健康者作为对照组。采用酶联免疫吸附法测定糖尿病患者与对照组健康者血清GTGF与尿β2-MG水平,并测定其蛋白排泄量(UAER)、血浆尿素氮(BUN)及血肌酐(SCr)水平,对各组间上述指标的检测结果进行比较。结果糖尿病患者的CTGF与β2-MG明显高于对照组(P<0.05);糖尿病患者的CTGF与β2-MG水平与UAER呈正相关(r分别为0.761、0.533,P<0.05);CTGF与β2-MG联合检测的ROC曲线下面积为0.937,大于其单独检测。结论 CTGF联合β2-MG在糖尿病肾病早期病变中有重要诊断价值,且对疾病的进展有较好的预示作用。

结缔组织生长因子在糖尿病大鼠肾脏损伤中的作用及丝胶的干预效果

目的观察2型糖尿病大鼠肾脏结缔组织生长因子(CTGF)的变化及丝胶的干预作用。方法健康成年雄性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组(n=12)。链脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型,丝胶治疗组大鼠按照2.4 g·kg-1·d-1的剂量灌胃给予丝胶、阳性对照组大鼠按照55.33 mg·kg-1·d-1的剂量灌胃给予二甲双胍。ELISA法检测各组大鼠血清纤维连接蛋白的含量;Western印迹和RT-PCR法检测各组大鼠肾脏CTGF蛋白和mRNA的表达。结果丝胶治疗组较模型组,血清纤维连接蛋白的含量、肾脏CTGF蛋白和mRNA的表达明显降低(P<0.01,P<0.05)。结论丝胶可通过下调糖尿病大鼠肾脏CTGF的表达,恢复肾脏细胞外基质代谢的平衡,从而发挥对糖尿病肾脏损伤的保护作用。

结缔组织生长因子在自发性高血压大鼠肾脏的表达及意义

为了研究结缔组织生长因子在自发性高血压大鼠肾脏中的表达及其与高血压肾损害的关系 ,以同龄雄性WKY大鼠和自发性高血压大鼠为研究对象 ,测量 12周和 32周时尾动脉压、肾功能和尿 β2微球蛋白 ,并用免疫组织化学法检测结缔组织生长因子在肾脏中的表达。结果发现 ,与同龄WKY大鼠比较 ,自发性高血压大鼠的尿素氮和血肌酐的差异无显著性统计学意义 ,而尾动脉压明显增高 (12周时前者为 138± 17mmHg ,后者为 16 9± 6mmHg ,P <0 .0 1;32周时前者为 133.4± 14 .2mmHg ,后者为 185 .7± 12 .3mmHg ,P <0 .0 1) ;尿β2微球蛋白也显著增高 (12周时前者为 4 8.1± 9.3ng/L ,后者为 76 .4± 11.2ng/L ,P <0 .0 5 ;32周时前者为 6 1.5± 14 .7ng/L ,后者为 135 .2± 2 7.6ng/L ,P <0 .0 5 ) ,且在自发性高血压大鼠组 ,32周龄大鼠的尿 β2微球蛋白也比 12周龄的明显增加 (P <0 .0 5 )。免疫组织化学半定量检测发现 ,自发性高血压大鼠组肾脏中结缔组织生长因子的表达相对与同龄WKY大鼠明显升高 (12周时前者为 0 .4 9± 0 .0 7,后者为 0 .2 8± 0 .0 5 ,P <0 .0 5 ;32周时前者为 0 .81± 0 .0 8,后者为 0 .32± 0 .0 4 ,P <0 .0 1)。同样在自发性高血压大鼠组 ,结缔组织生长因子在 32周龄大鼠肾脏的表达也比 12周龄?

转化生长因子-β刺激人近端肾小管上皮细胞结缔组织生长因子的表达

目的:探讨转化生长因子-β(TGF-β)对人近端肾小管上皮细胞结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RTP-CR)和蛋白印迹技术,观察TGF-β1对人近端肾小管上皮细胞(HK-2)α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和CTGFmRNA及其蛋白质表达的影响,同时观察肾小管上皮细胞形态改变。结果:HK2细胞有基础量的CTGFmRNA和蛋白质分子表达,在TGF-β1刺激下,其表达量显著增加,经不同浓度TGF-β1干预24h后,CTGFmRNA表达量明显升高,且呈剂量依赖性。1ng/mlTGF-β1刺激时,CTGFmRNA表达量开始显著增加,5ng/ml时达到高峰,10ng/ml时略有下降,CTGFmRNA表达量分别为对照组的2.40倍,3.34倍和2.73倍(P<0.05)。CTGFmRNA表达量呈时间依赖效应。TGF-β1(5ng/ml)干预30min后,CTGFmRNA表达量开始呈现增加趋势,为对照组的1.48倍(P>0.05),2h后出现显著差异,为对照组的2.14倍(P<0.05);CTGFmRNA表达量在24h达到高峰,持续至36h,分别为对照组的3.19倍和2.75倍(P<0.005);0.5ng/mlTGF-β1刺激时,CTGF蛋白表达量略有增加,5ng/ml时达到高峰,10ng/ml时略有下降。在TGF-β1(5ng/ml)干预下,HK2细胞由立方形铺路石样逐渐转变为长梭形长条样,免疫荧光检测见梭形细胞胞浆中有大量αSMA表达。大部分细胞转分化的时间(72h)明显晚于CTGFmRNA?