银杏叶提取物对肝星状细胞增殖及转化生长因子和结缔组织生长因子基因表达的影响

目的:研究银杏叶提取物对肝星状细胞增殖及细胞因子TGF-β1、CTGF mRNA及蛋白表达的影响,以探讨银杏叶提取物抗肝纤维化的可能机制。方法:用不同浓度(0、1、10、100、500mg/L)的银杏叶提取物处理HSC-T6,用MTT及流式细胞仪检测其对肝星状细胞增殖及细胞周期的影响,用RT-PCR及Western blotting检测培养24h及48h后各组细胞中TGF-β1、CTGF mRNA及蛋白的表达。结果:银杏叶提取物10、100、500mg/L可抑制肝星状细胞的增殖,与空白对照组相比,G0/G1期DNA含量逐渐增加(P<0.05或P<0.01),S期DNA含量则逐渐降低(P<0.01),增殖指数(PI)逐渐降低(P<0.05或P<0.01);24h各组TGF-β1mRNA及蛋白表达较对照组分别低(28±4)%、(39±4)%、(45±3)%(P<0.01);(27±4)%、(37±4)%、(41±3)%(P<0.01);48h组各组TGF-β1mRNA及蛋白表达较对照组分别低(35±4)%、(49±3)%、(54±3)%(P<0.01);(33±4)%、(48±3)%、(52±3)%(P<0.01);4h各组CTGF mRNA及蛋白表达较对照组分别低(29±6)%、(45±4)%、(56±3)%(P<0.01);(36±4)%、(48±4)%、(49±3)%(P<0.01);48h组各组CTGF mRNA及蛋白表达较对照组分别低(48±6)%、(57±4)%、(69±3)%(P<0.01);(44±6)%、(58±4)%、(62±3)%(P<0.01)。结论:银杏叶提取物可能通过抑制肝星状细胞的增殖,抑制细胞因子TGF-β1、CTGF基因的表达发挥其抗肝纤维化的作用。

病理性瘢痕中结缔组织生长因子基因的表达

目的 探讨结缔组织生长因子在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩发病机制中的作用。 方法 分别留取正常皮肤 5例、增生性瘢痕 15例和瘢痕疙瘩 7例组织标本 ,测定组织中羟脯氨酸含量 ,通过逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)和图像定量分析 ,检测组织中结缔组织生长因子基因表达水平。 结果 正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中羟脯氨酸含量分别为 (2 6 .5 2± 4 .10 )、(84 .10± 1.76 )和 (92 .38± 2 .0 4 )μg/ mg,后两者与前者比较差异有统计学意义 (P<0 .0 1) ;正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中结缔组织生长因子 m RNA指数分别为 0 .0 9± 0 .2 5、0 .78± 0 .6 3和0 .84± 0 .0 4 ,后两者与前者比较差异有统计学意义 (P<0 .0 1)。 结论 结缔组织生长因子在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩纤维化进程中可能起着促进作用。

结缔组织生长因子基因的克隆

目的 克隆细胞即刻早期基因反应产物人结缔组织生长因子 (CTGF)基因 ,对分析细胞基因反应及用于创伤修复研究的理论和应用研究均具有较大意义。方法 使用组织培养的方法 ,建立了人脐静脉内皮细胞系 ,在适当刺激后 ,提取 m RNA,应用 RT- PCR方法 ,分段克隆人结缔组织生长因子基因 ,并经无义突变形成酶切位点使之连接。结果 经序列测定 ,发现该 CTGF基因具有完整编码区及不同于文献报道的 3′端非编码区结构的结缔组织生长因子基因。结论 获得一个新的人 CTGF基因。

沙利度胺抑制TGF-β_1诱导的HELF细胞中结缔组织生长因子基因启动子的激活

目的:探讨沙利度胺(thalidomide,THD)对转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung fibroblast,HELF)结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)基因启动子激活的影响。方法:构建含有人类CTGF基因启动子的报告基因载体pGL3-CTGFP,将其瞬时转染HELF细胞,通过检测萤光素酶的活性,观察TGF-β1和THD对CTGF基因启动子活性的影响。结果:TGF-β1能以剂量依赖方式和时间依赖方式显著增加HELF细胞中报告基因的活性(P<0.05),最佳剌激浓度是5μg/L,萤光素酶相对活性为对照组的2.16倍,最佳剌激时间为12 h,萤光素酶相对活性为对照组的2.52倍;THD对报告基因的基础活性无明显影响(P>0.05),但以剂量依赖方式显著抑制TGF-β1上调报告基因活性的效应(P<0.05)。结论:TGF-β1能以剂量依赖方式和时间依赖方式上调HELF细胞中CTGF基因启动子的活性,而THD能以剂量依赖方式抑制此过程。

结缔组织生长因子基因启动子多态性与乙型肝炎肝硬化关系的临床研究

目的探讨结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)启动子基因多态性及其与四川地区中国人乙型肝炎肝硬化发生、发展的关系。方法应用聚合酶链反应(PCR)及PCR产物直接测序技术,对121例乙型肝炎肝硬化患者和138例正常人群CTGF启动子-484G/C和-650G/C基因多态性分布进行检测。结果CTGF启动子-484T/C位点在被检测者中只发现TT型。在-650G/C位点发现GG型和GC型。在肝硬化组中GC型频率明显高于正常人群组(10.7%vs 4.3%,P<0.05);ALT水平异常组GC型频率远高于其正常组(16.4%vs3.7%,P<0.05)。GC型频率在不同肝功能水平(Child-Pugh分级)乙型肝炎肝硬化患者中分布差异有统计学意义,B级最高(30.4%),C级其次(9.5%),A级最低(3.6%)(均P<0.05)。结论人群中CTGF启动子-484位点未发现基因多态性存在。CTGF启动子-650G/C多态性与乙型肝炎肝硬化相关,其GC型频率升高可能与肝细胞损伤(丙氨酸转氨酶升高)及肝硬化的严重程度有关。

醛固酮对大鼠肾小球系膜细胞结缔组织生长因子基因表达的影响

目的探讨醛固酮(ALD)对大鼠肾小球系膜细胞结缔组织生长因子(CTGF)基因表达的影响。方法①以不同浓度的ALD(10-11、10-10、10-9、10-8、10-7mol/L)刺激肾小球系膜细胞72h后,用半定量RT-PCR法检测细胞中CTGFmRNA的表达。②以10-7mol/L的ALD刺激肾小球系膜细胞不同时间(12、24、48、72h)后,用半定量RT-PCR法检测细胞中CTGFmRNA的表达。结果半定量RT-PCR结果显示,随着ALD浓度的升高,CTGFmRNA的表达量(以CTGF/GAPDHmRNA表示)明显增加,在10-7mol/L时达高峰,与对照组比较,差异有显著性(P<0.01)。表明ALD促进肾小球系膜细胞CTGFmRNA的表达,且具有一定的剂量-反应关系。以10-7mol/L的ALD作用于大鼠肾小球系膜细胞12～72h,随着作用时间的延长,CTGFmRNA的表达量明显增加,在72h时达高峰,与对照组比较,差异有显著性(P<0.01)。表明ALD促进系膜细胞CTGFmRNA的表达,且具有一定的时间-效应关系。结论ALD促进大鼠肾小球系膜细胞CTGFmRNA的表达,从而促进慢性肾脏病进展。

介导大鼠结缔组织生长因子基因沉默的慢病毒载体转移质粒的构建及鉴定

目的:构建介导大鼠结缔组织生长因子(CTGF)基因沉默的慢病毒载体转移质粒pGCL-CTGF,为进一步包装慢病毒载体奠定基础。方法:以大鼠CTGF基因为靶基因,根据RNA干扰(RNAi)序列设计原则,设计4对有小发夹结构的RNAi靶点序列,退火形成双链DNA,双酶切后定向克隆到慢病毒载体转移质粒pGCL-GFP中,构建4个含靶基因片段的重组慢病毒载体转移质粒pGCL-CTGF,并对质粒进行PCR及测序鉴定。结果:CTGF的短发夹RNA(shRNA)片段被成功克隆到慢病毒载体转移质粒pGCL-GFP中,4个插入序列与设计的靶基因片段完全一致。结论:构建了能够表达4个含CTGF靶基因片段的慢病毒载体转移质粒,为进一步包装介导CTGF基因沉默的慢病毒载体奠定了基础。

鲤科鱼类结缔组织生长因子基因变异和分子进化

结缔组织生长因子(CTGF)在细胞生长、分化和凋亡及个体生长发育中具有重要的调控作用.研究CTGF基因在不同鱼类中的变异及进化,对于理解物种分化和基因差异具有重要意义.文中通过PCR扩增、克隆和测序,获得了19种鲤科鱼类(Cyprinidae)CTGF基因序列,并重建了鲤科鱼类系统发育关系,用于估计各分支的进化速率.以鳉科(Cyprinodontidae)的青鳉(Oryzias latipes)作为外类群,系统树均以较高的节点支持率支持鲤科鱼类中雅罗鱼系(Leuciscini)和鲃系(Barbini)的划分.对雅罗鱼系和鲃系的进化速率进行估算,表明雅罗鱼系进化速率小于鲃系,说明鲃系鱼类具有相对较小的选择压力,在较为宽松的环境中进化.鲤科鱼类CTGF基因5′端编码区具有一个6bp的插入或缺失(Indel)位点.雅罗鱼系均缺失这6个碱基,成为雅罗鱼系特有的序列特征,为进一步证实雅罗鱼系的单系性提供了Indel证据.鲤科鱼类CTGF蛋白质的氨基酸序列中,具简约信息的变异位点和Indel位点大多位于CTGF蛋白的信号区和IGFBP区,推测这可能与CTGF基因表达调控和蛋白质活性有关.

结缔组织生长因子基因RNA干扰复制缺陷型腺病毒载体的构建及鉴定

目的:构建能介导结缔组织生长因子(CTGF)基因RNA干扰的复制缺陷型腺病毒表达载体。方法:以大鼠CTGF基因为靶序列,设计并合成含编码短发夹RNA序列的寡核苷酸,构建腺病毒穿梭质粒p-shuttle-CTGF,酶切及测序分析正确后,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转染AD-293细胞,进行病毒包装,得到腺病毒载体Ad.H1-CTGF,用该载体感染HSC-T6细胞,观察其对CTGF基因表达抑制的效果。结果:构建的腺病毒穿梭质粒p-shuttle-CTGF经酶切、测序分析证实正确;包装的病毒载体滴度为4×1010PFU/mL,感染HSC-T6细胞后,Western印迹证实CTGF表达显著减少。结论:构建的腺病毒载体Ad.H1-CTGF可有效抑制HSC-T6中CTGF的表达,为抗纤维化研究提供了有力的工具。

结缔组织生长因子基因启动子甲基化状态与糖尿病视网膜病变关系的研究

目的:探讨结缔组织生长因子(CTGF)基因启动子区甲基化状态与糖尿病病人并发视网膜病变的关系,及其对血清CTGF水平的影响。方法:纳入于大连大学附属中山医院内分泌科住院的糖尿病病人共计120例,根据2002年糖尿病视网膜病变国际临床分形标准,行眼底检查或者眼底荧光造影,明确糖尿病视网膜病变诊断,分为糖尿病视网膜病变组(DR组)57例,糖尿病不合并视网膜病变组(NDR组)63例,另选取大连大学附属中山医院体检中心体检的正常人58名作为健康对照组(NC组)。提取外周血白细胞DNA,应用甲基化特异PCR(MSP)检测CTGF基因启动子区甲基化状态,应用ELISA法测定各组标本中血清CTGF水平从而进行分析。结果:DNA甲基化特异性PCR统计分析结果显示DR组CTGF基因启动子甲基化阳性率为24.45%,低于NDR组(42.86%)和NC组(78.95%)(P<0.05和P<0.01)。DR组血清CTGF水平明显高于NDR组和NC组(P<0.01)。结论:从表观遗传学角度,CTGF基因启动子低甲基化导致血清CTGF水平升高,可能是糖尿病视网膜病变发生发展的机制之一。

转化生长因子β1诱导肾间质成纤维细胞表型转化及其对结缔组织生长因子基因表达的影响

目的 研究转化生长因子β1（transforming growth factor beta-1,TGF-β1）诱导大鼠正常肾间质成纤维细胞（NRK-49F）表型转化过程中结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）基因表达的变化.方法 以不同浓度的TGF-β1（0、0.5、1、2、5、10 ng/ml）刺激NRK-49F细胞,分别应用MTT比色法、Western Blot、Northern Blot方法,检测TGF-β1刺激后肾间质成纤维细胞的增殖、Ⅰ型、Ⅲ型前胶原mRAN的表达、细胞表型标志物α-SMA mRNA及蛋白质表达、CTGFmRNA的表达变化.结果 1 ng/ml浓度以上TGF-β1能显著促进NRK-49F细胞增殖,上调Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达水平,诱导肌成纤维细胞表型标志α-SMA mRNA及蛋白质的表达,显著上调CTGF mRNA的表达水平（P＜0.01或P＜0.05）;以上效应均呈浓度依赖性.同时CTGF mRNA表达水平的增高与细胞表型转化的程度相一致.结论 TGF β1能诱导肾间质成纤维细胞发生表型转化,并促进了细胞增殖及细胞外基质的合成;该效应与TGF β1显著上调CTGF的基因表达一致.

慢病毒载体介导的结缔组织生长因子基因沉默对下游基因的影响

目的利用RNA干扰技术,以慢病毒为载体,介导结缔组织生长因子(CTGF)基因沉默,并观察其对下游基因表达的影响。方法用构建的CTGF小干扰RNA(siRNA)慢病毒转移质粒与包装质粒、包膜蛋白质粒共转染293T细胞,包装成介导CTGF基因沉默的慢病毒载体;感染肝星状细胞系HSC-T6,应用Real-time PCR和Western免疫印迹法筛选基因沉默效率最高的慢病毒载体;再根据绿色荧光蛋白(GFP)表达水平检测感染效率;应用Real-time PCR法检测CTGF基因沉默后HSC-T6中金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)、TIMP-2和I型胶原mRNA表达水平。结果包装的慢病毒载体感染HSC-T6细胞的效率高于50%;感染HSC-T6细胞后,CTGF的表达在mRNA和蛋白水平均受到明显抑制,其中TS1具有最佳的抑制效率;HSC-T6细胞CTGF基因沉默后,其TIMP-1、TIMP-2和I型胶原mRNA水平也显著降低。结论包装的慢病毒载体在HSC-T6中具有较好的感染效率和CTGF基因沉默效果,基因沉默后可进一步抑制HSC-T6细胞TIMP-1、TIMP-2和I型胶原的基因表达,这在抗纤维化的研究中具有积极的意义。

结缔组织生长因子基因表达与大鼠肝纤维化关系初步研究

目的探讨结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)基因在肝纤维化大鼠肝组织中的表达及其在肝纤维化发展中的作用。方法采用四氯化碳(CC l4)皮下注射制备肝纤维化模型,并于注射后1、4、8周取大鼠肝组织,免疫组化检测CT-GF的表达,RT-PCR检测肝组织结缔组织生长因子和Ⅰ型胶原α2[COLⅠ(α2)]基因的转录,并作图像扫描和统计学分析。结果CTGF免疫组化显示正常大鼠肝组织未见明显阳性着色,模型组大鼠注射CC l41周后,肝窦周和汇管区细胞出现阳性染色,随着CC l4注射时间的延长,其表达逐渐增强趋势。正常大鼠肝组织COLⅠ(α2)无表达,注射CC l41周后有弱表达,注射CC l44周后表达增强,8周时达到高峰。CTGF基因的表达与Ⅰ型胶原α2的表达呈正相关。结论CTGF作为TGF-β1的下游细胞因子在肝纤维化的发生和发展中可能发挥重要作用。

小鼠结缔组织生长因子基因克隆及其真核表达载体构建

背景:研究证实结缔组织生长因子在动脉粥样硬化血管平滑肌中呈高表达,构建结缔组织生长因子真核表达载体以特异性上调结缔组织生长因子在血管平滑肌内的表达是进一步通过细胞及动物实验研究其作用机制的基础。目的:克隆小鼠结缔组织生长因子基因、构建其真核表达载体,并在血管平滑肌细胞中瞬时表达。设计、时间及地点:单一样本观察,实验于2007-09/2008-04在辽宁医学院省高校分子细胞生物学与新药开发重点实验室完成。材料:1个月龄昆明小鼠10只。真核表达载体pcDNA3.1(+)由辽宁医学院分子生物学实验室保存。方法:以小鼠肾脏总RNA为模板,通过反转录-聚合酶链反应方法获得结缔组织生长因子(CTGF)目的基因,连接到pMD18-T载体上,酶切鉴定测序,克隆入pcDNA3.1(+)真核表达载体。主要观察指标:酶切测序鉴定重组体pcDNA3.1(+)-CTGF。将pcDNA3.1(+)-CTGF转入血管平滑肌细胞,Western观察结缔组织生长因子蛋白表达。结果:酶切、测序鉴定证实成功扩增出小鼠结缔组织生长因子目的基因并构建其真核表达载体,Western检测证实,重组体转入血管平滑肌细胞后,细胞内高表达结缔组织生长因子蛋白。结论:成功克隆小鼠结缔组织生长因子目的基因并构建其真核表达载体,重组体能在血管平滑肌中表达。

雌二醇对奶牛子宫内膜组织中结缔组织生长因子基因表达的影响

观察雌二醇(17β-estraidol,E_2)对奶牛子宫内膜组织中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)mRNA表达的影响,并探讨雌激素对奶牛子宫内膜组织修复的机制。体外培养奶牛子宫内膜组织,应用荧光定量PCR技术检测E_2对奶牛子宫内膜组织中CTGF mRNA表达的影响。结果显示,与空白对照组相比较,E_2能够极显著(P<0.01)地抑制CTGF mRNA的表达。由研究结果可知,E_2能够对奶牛子宫内膜组织中CTGF的基因表达产生调节作用。

沉默结缔组织生长因子基因对肝星状细胞生长和细胞周期的影响

目的·探讨沉默结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,Ctgf)基因对大鼠肝星状细胞HSCT6的生长、细胞周期及其转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Smad3和Smad7表达的影响。方法·采用RNA干扰技术构建Ctgf基因的pCDH/Ctgf-shRNA重组慢病毒载体。该重组载体经病毒包装后获得高感染力的pCDH/Ctgf-shRNA病毒颗粒用于感染HSCT6细胞。荧光显微镜观测被感染HSCT6细胞的绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达情况;CCK-8试剂盒检测被感染HSCT6细胞的生长变化;流式细胞术检测被感染HSCT6细胞的周期变化。Real-time PCR和Western blotting分别检测pCDH/CtgfshRNA病毒对HSCT6细胞的Ctgf基因的沉默效应及对TGF-β1、Smad3和Smad7表达的影响。结果·成功构建Ctgf基因的重组病毒载体pCDH/Ctgf-shRNA。荧光显微镜观测表明,被感染重组病毒的HSCT6细胞显著表达GFP。CCK-8检测结果证实,与对照细胞相比,沉默Ctgf基因的HSCT6细胞生长明显受抑,72 h开始两者差异具有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术检测表明,沉默Ctgf基因的HSCT6细胞可被阻滞于S期。Real-time PCR和Western blotting检测表明,pCDH/Ctgf-shRNA病毒能有效沉默HSCT6细胞的Ctgf基因,下调TGF-β1、Smad3基因及其蛋白的表达,上调Smad7基因及其蛋白的表达;与对照比较,差异皆有统计学意义(均P<0.05)。结论·沉默Ctgf基因能抑制HSCT6细胞生长,使其TGF-β1、Smad3的表达下调,同时上调其Smad7的表达;这种生长受抑可能与其TGF-β1/Smads(Smad3/Smad7)信号通路受阻紧密相关。

冠心宁对冠心病舒张性心力衰竭患者血清转化生长因子β1及结缔组织生长因子的影响

目的:观察冠心宁对冠心病舒张性心力衰竭(DHF)患者血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)的影响。方法:选取100例DHF患者,按随机数字表法分为常规组及治疗组各50例。常规组采用强心、利尿、扩管等基础治疗,治疗组在常规组治疗基础上加用冠心宁片。比较2组临床疗效及不良反应发生率,比较2组治疗前后TGF-β1、CTGF水平、Lee氏心衰评分、改良早期预警量表(MEWS)评分的变化,进行Pearson相关性分析。结果:治疗组临床总有效率为96.00%,常规组为84.00%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组TGF-β1、CTGF水平均较治疗前下降(P<0.05),治疗组TGF-β1、CTGF水平均低于常规组(P<0.05)。治疗后,2组Lee氏心衰评分、MEWS评分均较治疗前下降(P<0.05),治疗组Lee氏心衰评分、MEWS评分均低于常规组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,Lee氏心衰评分、MEWS评分与TGF-β1、CTGF的表达水平均呈正相关。其中Lee氏心衰评分与TGF-β1呈中度相关,与CTGF呈高度相关,MEWS评分与TGF-β1、CTGF均呈正相关。常规组不良反应发生率为16.00%,治疗组为6.00%,2组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:冠心宁治疗冠心病DHF可提升疗效,改善患者的病情及预后,安全性高。

透析液中结缔组织生长因子、纤溶酶水平与腹膜透析患者腹膜溶质转运速率的关系

目的 探讨透析液中结缔组织生长因子(CTGF)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)水平与腹膜透析(PD患者腹膜溶质转运速率(PSTR)的关系。方法 选取2020年1月至2022年12月江苏省连云港市第二人民医院收治的152例PD患者,根据标准腹膜平衡试验分为快速转运组和非快速转运组。采用酶联免疫吸附试验检测透析液中CTGF、PAI-1水平。采用多因素logistic回归分析PD患者PSTR快速转运的影响因素,采用受试者操作特征曲线分析透析液中CTGF、PAI-1水平对PD患者PSTR快速转运的评估价值。结果 152例PD患者PSTR快速转运发生率为57.24%(87/152)。快速转运组透析液中CTGF、PAI-1水平高于非快速转运组(P<0.05)。快速转运组透析龄、夜间超滤量高于非快速转运组,白蛋白水平低于非快速转运组(P<0.05)。透析龄延长(OR=1.051,95%CI:1.023~1.081)和CTGF(OR=1.298,95%CI:1.165~1.446)、PAI-1(OR=1.408,95%CI:1.205~1.646)升高为PD患者PSTR快速转运的独立危险因素(P<0.05)。透析液中CTGF联合PAI-1预测PD患者PSTR快速转运的曲线下面积大于二者单独预测(P<0.05)。结论 透析液中CTGF、PAI-1水平升高与PD患者PSTR快速转运独立相关,二者联合对PD患者PSTR快速转运评估价值较高,可能成为PD患者PSTR快速转运的辅助评估指标。

反义寡核苷酸对人瘢痕疙瘩成纤维细胞结缔组织生长因子基因表达和胶原合成的作用

目的 研究结缔组织生长因子 (CTGF)在人瘢痕疙瘩发病机制中的作用。 方法 体外分离、培养人瘢痕疙瘩成纤维细胞 (HKF)。在脂质体介导下 ,将异硫氰酸荧光素标记的硫代磷酸化CTGF反义寡核苷酸 (ASODN)转染至HKF中 ,设为CTGFASODN治疗组 (AT组 ) ,同时设脂质体对照组 (LC组 ,仅加入脂质体 )和空白对照组 (C组 ,不加脂质体和ASODN)。于荧光显微镜下观察CT GFASODN在各组细胞中的分布 ;通过逆转录聚合酶链式反应检测细胞中CTGFmRNA指数 (RI);采用3 H 脯氨酸掺入法检测细胞的胶原合成量。 结果 转染后 12h,AT组细胞胞浆内可见大量荧光 ,LC、C组HKF内无此现象。AT组转染后 4 8hRI值为 0 .12± 0 .6 2 ,明显低于LC组值 0 .5 1± 0 .18及C组值 0 .5 4± 0 .35 (P <0.0 1)。AT组的3 H 脯氨酸掺入率为 10 8.96± 79.0 5 ,较LC组值 171.2 4± 14 .99及C组值 16 5 .38± 4 3.6 1低 (P <0.0 1)。 结论 CTGFASODN能够抑制体外培养的HKF中CTGF基因表达和胶原合成 ,表明CTGF在人瘢痕疙瘩纤维化进程中发挥了一定作用。

TGF-β1影响肺成纤维细胞结缔组织生长因子基因表达的研究

目的研究转化生长因子-β1(TGF-β1)对体外培养早产鼠的肺成纤维细胞(LFs)结缔组织生长因子(CTGF)基因表达的影响。方法以孕19dWistar大鼠剖宫取出的仔鼠为对象,原代培养LFs,实验组分别采用不同浓度(1ng/mL、5ng/mL、10ng/mL)和不同作用时间(12h、24h、48h)TGF-β1刺激LFs,对照组无血清培养基培养(即0ng/mL)。应用RT-PCR方法检测LFs的CTGFmRNA表达。结果与对照组比较,实验组LFs的CTGFmRNA水平增高(P<0.05),且随TGF-β1作用浓度的增加、作用时间的延长CTGFmRNA表达逐渐上升,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TGF-β1能刺激肺成纤维细胞中CTGF基因表达,并且以剂量和时间依赖方式上调CTGF基因表达。