群结腐霉细胞壁降解酶的活性检测及基因表达分析

群结腐霉(Pythium myriotylum)是一种死体营养型病原菌,可侵染生姜引起茎基腐病,造成生姜产量损失,严重危害该产业发展。群结腐霉含有大量植物细胞壁降解酶(plant cell wall-degrading enzymes,PCWDEs),然而PCWDEs在群结腐霉侵染生姜过程中的功能和特性却鲜有报道。运用生物信息学手段预测群结腐霉细胞壁降解酶的种类和数量,并以生姜粉末和葡萄糖为碳源,比较菌丝生长的情况,利用转录组分析比较PCWDEs基因在不同碳源条件下的表达差异情况,同时对培养液中主要PCWDEs进行酶活检测。转录组数据显示,与葡萄糖培养基相比,生长在生姜粉末培养基上的群结腐霉中12个PCWDEs编码基因显著上调表达,利用CAZymes网站预测PCWDEs的底物主要为淀粉和纤维素;酶活检测发现,其中α-葡萄糖苷酶和β-葡萄糖苷酶活性较高,分别降解淀粉和纤维素。结果表明,群结腐霉在生姜粉末上生长过程中的PCWDEs以淀粉降解酶和纤维素降解酶为主。

伯克氏菌对群结腐霉引起的花生果腐病的生防潜力

花生果腐病是一种世界性的花生病害,群结腐霉是其主要致病菌之一,在花生生产过程中造成重大经济损失,生物防治是一种有效的绿色防控手段。为了控制花生果腐病的发生,从健康的花生植株上分离获得39株内生细菌,并筛选出5株对群结腐霉菌具有明显拮抗活性的菌株。结果表明,基于16S核糖体RNA序列和RecA序列,有5个菌株均被鉴定为洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia),其中,菌株PRI08对群结腐霉菌菌丝生长显示出较强的拮抗活性。通过温室和田间试验,接种洋葱伯克霍尔德菌PRI08后,再用群结腐霉侵染花生植株,发病率分别降低了29.5%和11.83%。此外,洋葱伯克霍尔德菌PRI08对花生有明显的促生作用,增加主茎高、侧枝长、荚果数量、饱果率和荚果产量,分别为20.44%,19.98%,26.61%,20.36%和21.52%。本研究表明,洋葱伯克霍尔德菌PRI08具有作为花生果腐病生物防治剂和花生生长促进菌的潜力。

生姜的病原性真菌群结腐霉和腐皮镰孢的介绍与防治方法

生姜属于多年生单子叶的草本植物,并且具有极高的经济价值,无论是在食品,药品和保健品等领域都有广泛的应用。但是生姜特别容易发生疾病,如根腐病,枯萎病,姜瘟病等,从而使得生姜产量下降,品质降低。根腐病病原菌主要是由群结腐霉引起的,而枯萎病的致病性真菌是腐皮镰孢。目前市面上的防治方法主要集中在是物理防治方面,化学防治方面和生物防治方面。生物防治只要是通过拮抗实验,进而筛选拥有最优秀效果的拮抗菌。拮抗菌可以抑制病原菌的繁殖与生长,并且拮抗物质的积累还能促进正常生姜的生长。众多的研究表明芽孢杆菌对群结腐霉和腐皮镰孢的拮抗效果较好,所以筛选出对病原性真菌抑制效果较好的芽孢杆菌是目前研究的重中之重,与此同时也可以为后来的生产实践奠定一定的实验基础。

防治花生腐霉果腐病的化学药剂筛选

花生果腐病是一种重要的土传病害,一旦发生会造成荚果腐烂落果,重病田可致绝收。群结腐霉菌(Py thium myriotylum)是引起花生果腐病最主要的病原菌。为寻找防治花生果腐病的有效药剂,本研究对6种化学药剂进行室内筛选,实验结果表明,96.8%的咯菌腈对引起花生果腐病的群结腐霉有较好的抑菌效果,EC50为3.16×10-5 mg/L,较低浓度的药剂就可以达到很好的抑制效果。盆栽接种后,用6种杀菌剂进行灌根,待荚果成熟后对病害发病情况进行调查统计,结果表明96.8%咯菌腈是防治花生果腐病最有应用潜力的药剂品种。

生姜茎基腐病病原鉴定及生物学特性研究

通过致病性测定、形态特征观察及rDNAITS序列分析,对生姜茎基腐病病原菌进行研究。结果表明:近年来山东生姜上新出现的生姜茎基腐病的病原菌为Pythium myriotylum,该病原菌生长的温度范围是1～35℃,最适温度25℃,pH值范围5～12,最适pH值为7。

广西东南沿海生姜茎腐病病原菌鉴定

茎腐病是生姜种植业最具破坏性的病害之一,具有发病时间短、病程进展快、病株致死率高的特点。本研究从广西东南沿海生姜种植区采集到生姜茎腐病病株,经过分离纯化得到多个腐霉菌株,通过形态学观察、分子生物学和致病性鉴定,将病原菌鉴定为群结腐霉(Pythium myriotylum)。该病原菌的鉴定,对控制广西地区生姜茎腐病的发生和扩散具有重要的理论指导意义。

绿豆根腐病病原菌分离和致病力鉴定

从采集自我国6个省(市)具有根腐症状的绿豆植株中分离得到73株分离菌株,进一步通过离体叶片接种检测获得54株致病菌株。通过形态学和保守序列分析共鉴定出14种致病病原菌,其中尖孢镰刀菌检出率最高,首次检测出群结腐霉可以侵染绿豆并引起根腐症状。对来自国内外12个绿豆品种进行群结腐霉接种试验,结果表明,群结腐霉对不同绿豆品种均表现出强致病力,病情指数在45~96之间;进一步分析表明,皖绿2号对群结腐霉表现出相对较强的抗性水平。

生姜根腐病的病原菌鉴定及抗菌脂肽的防治效果

[目的]本文旨在分离和鉴定生姜根腐病病原菌,研究芽胞杆菌源抗菌脂肽对病原菌的抑菌作用,并在土壤环境中测定抗菌脂肽对生姜根腐病的防治效果。[方法]采用组织分离法、形态学和分子生物学手段分离、鉴定山东潍坊生姜根腐病病原菌;测定5种芽胞杆菌源抗菌脂肽(fengycin,bacillomycin D,iturin A,brevibacillin V和brevibacillin)对病原菌的抑菌作用;通过生姜切片侵染试验验证抗菌脂肽对根腐病的防治效果。[结果]形态学和分子生物学鉴定结果表明,生姜根腐病病原菌为群结腐霉(Pythium myriotylum)。5种抗菌脂肽对群结腐霉均有抑菌效果,其中分离自侧孢短芽胞杆菌(Brevibacillus laterosporus)的脂肽brevibacillin对群结腐霉的抑制活性最强,其EC50为13.08μg·mL^-1。brevibacillin能抑制群结腐霉孢子囊和卵孢子的形成,改变其细胞膜的通透性,并导致其胞内蛋白质和核酸泄露,引起群结腐霉菌丝形态发生皱缩,从而发挥抑菌作用。生姜切片侵染试验中,26和52μg·mL^-1 brevibacillin处理后,生姜根腐病发病率分别下降了40.0%和56.7%,病情指数分别下降了41.0和58.9。[结论]芽胞杆菌源抗菌脂肽brevibacillin能有效抑制生姜根腐病的发生,在生物防治、保障食品安全和减少土壤污染方面有较好的应用前景。

生姜群结腐霉对烟草的致病性及其一种类Nep1蛋白对烟草的毒性作用分析

烟草(Nicotiana tabacum)作为重要的经济作物在世界范围内广泛种植。群结腐霉(Pythium myriotylum)引起的烟草苗期根腐病是影响烟草产量的重要因素。对分离自我国3个主要烟草种植区(重庆、河南、四川)生姜上的6株群结腐霉菌(ChY1、ChY3、HNP1、HNP10、SiL1和SiL2)进行烟草致病力及致病因素分析。多位点序列分析(Multilocus Sequence Analysis,MLSA)显示6菌株处于4个不同的分组,具有一定的遗传差异。幼苗实验结果表明,6株群结腐霉菌均能侵染三生烟及其他3种商品化烟草品种(红花大金元、云烟87和K326),同种菌株对不同品种烟草的致病性差异不显著(P>0.05)。盆栽实验和离体叶片实验与幼苗实验结果一致,6株群结腐霉菌均能侵染三生烟,而且致病力存在差异,其中分离自四川的SiL1和SiL2致病性最强。异源产生的群结腐霉NLP蛋白(Nepl-like proteins)能导致三生烟叶片细胞坏死,表明群结腐霉产生的NLP蛋白是侵染烟草的致病因素之一。

喀麦隆芋艿根腐病病原菌鉴定

从采自喀麦隆不同地区的芋艿(Xanthosoma mafaffa L.)病根及田土中分离菌株,分别从雅温得(Yaound(?))和巴马约(Mbalmayo)分离到的腐霉菌株XPMY和XPMM1,根据其形态学及生理学特征鉴定为群结腐霉Pythium myriotylum,用上述腐霉菌株的游动孢子悬液或菌丝体片断悬液人工接种,表现叶黄化及根腐等典型症状。用经常伴随群结腐霉的立枯丝核菌Rhizoctonia solani及茄镰孢Fusarium solani人工接种后均未表现症状。研究结果表明:群结腐霉Pythium myriotylum Drechsler是喀麦隆芋艿根腐病的致病菌。