溃疡性结肠炎癌变与炎症因子和益生菌的关联性研究

探究溃疡性结肠炎癌变患者群体中炎症因子和益生菌的关联性。方法 2020年1月-2023年6月开展研究,选取我院86例溃疡性结肠炎相关结直肠癌患者作为研究对象命名为观察组,择取86例健康者作为参照组,检测炎症因子水平、肠道益生菌水平,并进行相关性分析。结果 观察组肠道益生菌水平低于参照组,(P<0.05);观察组炎症因子水平高于参照组,(P<0.05);观察组肠道益生菌与炎症因子呈现负相关关系,(P<0.05)。结论 肠道益生菌的数量与炎症因子水平存在负相关关系,益生菌数量下降,可增加溃疡性结肠炎患者癌变风险。基于菌群平衡治疗反向,可从调节肠道益生菌数量方面治疗溃疡性结肠炎,从而缓解炎症降低癌变风险。

香连片对小鼠溃疡性结肠炎癌变过程中WIF-1和SFRP-1mRNA表达的影响

目的探讨香连片对小鼠溃疡性结肠炎癌变过程中Wnt抑制因子1（WIF-1）和分泌型卷曲相关蛋白（SFRP-1）的影响。方法将60只BALB／C小鼠随机分为空白组（10只）、模型组（14只）、香连片低剂量组（12只）、香连片高剂量组（12只）和柳氮磺胺嘧啶组（12只）。除空白组外，其余各组采用DMH／DSS复合法诱导小鼠溃疡性结肠炎癌变模型，造模时间为18周。各组于造模前1周给予相应的干预措施，至造模的第10周结束；其中空白组和模型组予等量蒸馏水，各给药组给予相应的药物。用药时间为11周。观察小鼠体质量、粪便、耗食和精神状态等一般情况，结肠肿瘤的形成情况，HE染色镜下病变肠组织形态学改变，并以Real-timePCR检测WIF-1和SFRP-1mRNA的表达。结果在造模后期（第13-18周），模型组小鼠耗食减少，精神委靡，体质量明显减轻，与空白组比较，差异具有统计学意义（P〈0．01）；而香连片低剂量和高剂量组小鼠体质量下降与模型组比较无明显差异（P〉0．05）。模型组结肠黏膜可见团块状肿块形成，HE染色可见模型组小鼠结肠黏膜腺体增生明显、细胞排列紊乱、核染色加深；香连片低剂量、高剂量组虽可见腺体增生，但细胞分化未见异型性。香连片各剂量组WIF-1mRNA表达上调，与模型组比较，差异具有统计学意义（P〈0．05）；香连片各剂量组与模型组比较，SFRP-1mRNA表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论香连片IJ以通过减轻小鼠溃疡性结肠炎延缓肠黏膜细胞的不典型增生，其机制与上调WIF-1基因的表达，从而抑制Wnt／13-eatenin信号通路的异常激活有一定的关系。

清肠解毒汤对溃疡性结肠炎相关癌变的治疗作用及PI3K/Akt/m TOR通路调控机制

目的观察清肠解毒汤对溃疡性结肠炎相关癌变的治疗作用,并探讨通过PI3K/Akt/mTOR信号通路的调控机制。方法取50只SPF级大鼠,随机分为5组,模型组、低、中、高剂量组采用氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠(AOM/DSS)复合法建立溃疡性结肠炎相关癌变模型,对照组饮用水不变,生理盐水替换二甲肼(DMH);低、中、高剂量组灌胃4.5、9、1.8 g/kg的清肠解毒汤,模型组和对照组灌胃生理盐水,持续8周。观察各组大鼠一般情况,并对比灌胃1 d、2周、4周时疾病活动指数评分(DAI),大肠前、中、后段典型增生/癌变数,结肠黏膜组织病理学变化,PI3K、AKT、m TOR mRNA表达情况及AKT/p AKT差异。结果模型组大鼠精神萎靡,伴血便、腹泻,3剂量组给药后精神状态逐渐好转,高剂量组好转最为明显。干预期间对照组DAI评分均为0分,DAI组间、时间、交互比较(P<0.05)。对照组大鼠无溃疡性结肠炎相关癌变,其余4组结肠前段、中段及后段不典型增生/癌变数组间比较(P<0.05)。组织病理学观察发现,模型组结肠黏膜上皮细胞脱落,部分可见低度不典型增生、癌变,固有腺体萎缩,伴有大量炎性细胞浸润,3剂量组上述病理变化均有所减轻,其中高剂量组减轻最为明显,个别低度不典型增生和淋巴滤泡出现,未见癌变。AKT mRNA相对表达量组间比较(P>0.05),PI3K、m TOR mRNA和蛋白相对表达量及AKT/p AKT组间比较(P<0.05)。结论清肠解毒汤可通过抑制PI3K/Akt/m TOR通路发挥治疗溃疡性结肠炎相关癌变的作用,其中1.8 g/kg清肠解毒汤治疗效果最佳。

溃疡性结肠炎相关癌变危险因素及四君子汤干预探微

溃疡性结肠炎相关癌变(Ulcerative Colitis Associated Carcinogenesis, UCAC)作为溃疡性结肠炎的一个严重进展方向,随着发病率的升高,近年来引起了诸多学者的关注,但是对其危险因素尚未有一致的定论。祖国医学认为脾虚为溃疡性结肠炎相关癌变发病的重要病机,运用四君子汤对其进行干预亦有一定的研究基础,现围绕溃疡性结肠炎相关癌变危险因素及四君子汤干预研究做一综述。

健脾清热活血类方药介导β-catenin、C-myc表达干预溃疡性结肠炎相关癌变研究

目的探讨溃疡性结肠炎相关癌变结肠黏膜β-catenin、C-myc表达变化以及健脾清热活血方(救必应、白术、白芍、水蛭、三七、炙甘草)干预溃结癌变的机制。方法 60只清洁级Balb/c小鼠随机分5组,每组12只,正常组、模型组、低、中、高剂量治疗组;除正常组外,其余各组采用DMH/DSS复合法制备溃结癌变模型,模型组给予等剂量生理盐水、治疗组分别给予不同剂量健脾清热活血方药提取物干预20周。分别应用光镜检测结肠黏膜组织形态学变化,免疫组化及实时荧光定量PCR检测结肠黏膜β-catenin、C-myc蛋白及其mRNA表达变化。结果模型组小鼠结肠肉眼可见浆膜层散在、多处息肉状隆起变化,镜下见腺体萎缩、高级别上皮内瘤变,部分癌变,其结肠β-catenin、C-myc蛋白及其mRNA呈高表达特点;低剂量组肉眼见结肠黏膜充血水肿,部分可见溃疡样改变,镜下见黏膜充血肿胀,部分腺体萎缩,低级别上皮内瘤变,结肠β-catenin、C-myc蛋白及其mRNA表达呈下降趋势,与模型组比较,有统计学意义(P<0.05);中、高剂量组肉眼见结肠黏膜充血、水肿,糜烂,镜下见黏膜上皮脱落,充血肿胀,未见溃疡及癌变,结肠β-catenin、C-myc蛋白及其mRNA表达呈下降趋势,与模型组比较,有统计学意义(P<0.05);各治疗组比较,β-catenin、C-myc变化无统计学意义(P>0.05)。结论健脾清热活血方药可能通过介导β-catenin、C-myc表达,发挥防治溃结相关癌变的效应。

DMH/DSS复合法诱导小鼠溃疡性结肠炎相关癌变的实验研究

目的探讨DMH腹腔注射结合3%DSS自由饮用法制备溃疡性结肠炎相关癌变小鼠模型。方法适应性喂养1周后,30只BALB/c小鼠按体重随机分为4组,正常组6只,模型Ⅰ组8只,模型Ⅱ组8只,模型Ⅲ组8只。除正常组外,其余3组,分别按15,20,25 mg/kg腹腔注射0.4%DMH,每周2次,继而连续自由饮用3%DSS2周为1循环;连续3个循环。第9周末将全部小鼠脱椎处死,截取全部结肠(回盲部-肛门),肉眼及光镜下观察小鼠结肠组织形态学变化。结果模型Ⅲ组全部小鼠在造模过程中死亡。肉眼见模型Ⅰ组小鼠结肠黏膜充血水肿;模型Ⅱ组小鼠结肠散在、多处息肉状隆起变化;正常组小鼠结肠黏膜未见异常。镜下见模型Ⅰ组小鼠结肠可见腺体萎缩、低级别上皮内瘤变;模型Ⅱ组小鼠结肠可见腺体萎缩、高级别上皮内瘤变,部分癌变;正常组小鼠结肠黏膜未见异常。结论 0.4%DMH 20mg/kg腹腔注射结合3%DSS自由饮用复合法,可以成功复制溃结相关癌变模型,该方法简单易行,与人溃疡性结肠炎相关癌变较为相似,值得推广应用。

健脾清热活血方干预PI3K-Akt/mTOR信号通路调控CDK1表达防治溃疡性结肠炎相关癌变

目的:观察健脾清热活血方对溃疡性结肠炎相关癌变小鼠组织形态、超微结构、PI3K-Akt/mTOR信号通路中相关指标及CDK1的表达变化,探讨其防治溃结相关癌变的可能机制。方法:140只SPF级Balb/c小鼠按体质量随机分为正常组、模型组、阻断剂组、治疗组及对照组,每组20只;除外正常组,其余各组采用DMH/DSS复合法制备溃结癌变模型,模型组予等剂量生理盐水,阻断剂组予PI3K阻断剂LY294002干预,治疗组予不同剂量健脾清热活血方药,对照组予美沙拉嗪,连续干预16周。应用光镜及电镜观察溃结癌变小鼠结肠组织形态学及超微结构变化;Western-blot及Real-time PCR检测结肠黏膜P110、P85、P-AKT、mTOR、CDK1蛋白及其mRNA表达变化。结果:模型组见黏膜上皮脱落,溃疡形成,腺体萎缩,部分有浸润癌表现,治疗组所见黏膜损伤程度较模型组有不同程度改善,其中以中、高剂量组结肠黏膜损伤改善情况显著,部分可见黏膜充血并肿胀,不典型增生及淋巴滤泡出现(P<0.05)。与正常组比较,模型组P110、P85、CDK1蛋白表达量上升(P<0.05);与模型组比较,治疗组P85、CDK1蛋白表达下降(P<0.05)。与模型组比较,治疗组P85、P-Akt基因表达下调(P<0.05)。各组间P110、mTOR基因表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:健脾清热活血方可能通过下调P85、P-Akt,介导CDK1表达,诱导炎症缓解,修复肠道黏膜,发挥防治UCAC的效用。

PI3K-Akt/mTOR通路调控P-β-catenin介导溃疡性结肠炎相关癌变及健脾清热活血方防治研究

溃疡性结肠炎相关性结肠癌(ulcerative colitis associated cancer,UCAC)是溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC或溃结)患者重要死亡原因,其癌变具体机制尚未明了。β-catenin磷酸化及其核内异常转位被认为是UCAC关键事件之一,经典Wnt通路以及炎症状态下PI3K-Akt/mTOR通路过度活化、突变均可导致β-catenin不被泛素化降解,反而大量磷酸化、核内异常转位,下游靶基因过度转录,肠上皮细胞凋亡、增殖、甚至异性增生、癌变。文章就近年来关于PI3K-Akt/mTOR通路调控P-β-catenin介导UCAC,以及我们研究健脾清热活血方药干预UCAC的相关研究进行述评。

益脾养胃汤治疗溃疡性结肠炎相关癌变小鼠的疗效及其机制研究

目的:观察益脾养胃汤治疗溃疡性结肠炎相关癌变小鼠的疗效,及其对TLR4/MAPKS信号通路的影响。方法:80只BALB/c雄性小鼠随机分为正常组,模型组,益脾养胃汤高、低剂量组,每组各20只。采用AOM/DSS法进行溃疡性结肠炎相关癌变小鼠模型的制备。造模后同时给予相应剂量的益脾养胃汤治疗。观察各组小鼠一般情况、结肠隐窝变化、结肠组织病理学的变化。采用ELISA法检测各组小鼠血清中炎性细胞因子IFN-γ,IL-4和IL-12的水平变化。Real-time PCR法检测IFN-γ,IL-4、IL-12及NF-κBp65 mRNA的表达。Western blot检测TLR4、p-JNK1/2、p-p38、pERK1/2、NF-κB (p65)、p-NF-κB (p65)、PCNA、COX-2、Bcl-xl蛋白的相对表达量。结果:与模型组比较,各给药组小鼠体质量和结肠长度明显增长,结肠重量、结肠重量长度比值和结肠黏膜组织学损伤评分明显降低;血清IFN-γ、IL-12水平和结肠组织中IFN-γ,IL-12 mRNA的表达量均明显降低,IL-4水平明显升高;结肠组织中TLR4、pJNK1/2、p-p38、p-ERK1/2的mRNA和蛋白表达量和p-NF-κBp65、PCNA、COX-2、Bcl-xl蛋白的表达量均显著降低(P均<0. 05)。与益脾养胃汤低剂量组比较,益脾养胃汤高剂量组结肠黏膜组织学损伤评分显著降低,各项因子水平显著优于低剂量组(P均<0. 05)。各组之间NF-κB(p65)的蛋白表达量比较差异无统计学意义(P>0. 05)。结论:益脾养胃汤可显著改善结肠黏膜的炎性损伤,减少癌瘤的形成,其机制可能与下调TLR4/MAPKS信号通路的表达有关。

健脾清热活血方对溃疡性结肠炎相关癌变小鼠结肠组织EGF、EGFR、P-β-catenin表达的影响

目的观察健脾清热活血方对溃疡性结肠炎相关癌变(UCAC)小鼠结肠组织表皮生长因子(EGF)、表皮生长因子受体(EGFR)和P-β-catenin表达的影响,探讨健脾清热活血方防治UCAC的可能机制。方法140只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、西药组、阻断剂组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组20只;除外正常组,其余各组采用1,2-二甲肼/葡聚糖硫酸钠复合法制备UCAC模型。造模后,西药组予美沙拉嗪,阻断剂组予PI3K信号通路阻断剂LY294002,低、中、高剂量组分别予低、中、高剂量健脾清热活血方水提液,正常组和模型组予等剂量生理盐水灌胃,连续16周。采用透射电镜观察小鼠结肠组织形态学以及超微结构变化,Western blot及实时荧光定量PCR检测结肠黏膜EGF、EGFR和P-β-catenin蛋白及mRNA的表达。结果模型组镜下见黏膜上皮脱落,溃疡多而大,腺体萎缩,部分呈浸润癌表现;低、中、高剂量组结肠黏膜损伤程度较模型组均有不同程度的改善,镜下可见部分黏膜充血并肿胀,个别低度不典型增生和淋巴滤泡出现,未见溃疡及癌变,其中中、高剂量组结肠黏膜损伤改善情况更显著。模型组结肠黏膜组织学损伤评分明显高于正常组(P<0.05),而西药组、阻断剂组、低剂量组、中剂量组、高剂量组则明显低于模型组(P<0.05)。模型组EGFR、P-β-catenin蛋白和mRNA表达均较正常组上调(P<0.05),而低、中、高剂量组EGFR、P-β-catenin蛋白和mRNA表达均较模型组下调(P<0.05),但各组间EGF蛋白和mRNA表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论健脾清热活血方可以下调EGFR及P-β-catenin表达,促进肠上皮细胞修复,诱导炎症缓解,发挥防治UCAC的作用。

溃疡性结肠炎癌变小鼠模型的建立

为探讨一种建立理想的溃疡性结肠炎（UC）癌变动物模型的方法，为人类UC癌变的研究提供理想的途径，本研究将84只Balb／c小鼠分为4组，即实验组（A组）和对照组（B、C、D组）：A组小鼠自由饮用5％葡聚糖硫酸钠（DSS）1周后，腹腔注射二甲肼（DMH，20mg／kg）1次，此后饮用生理盐水（NS）2周；B组小鼠自由饮用5％DSS1周后，腹腔注射1mlNS1次，然后饮用NS2周；C组和D组均自由饮用NS3周，于第1周后分别给予DMH（20mg／kg）腹腔注射（c组）和1mlNS腹腔注射（D组）。以上各组均以3周为一个循环，共重复3个循环。结果显示，单纯应用DSS（B组）3个循环仅有2只发生低级别异型增生，单纯的腹腔注射低剂量的DMH（c组）3次无明显异型增生和癌变发生；而联合使用同等剂量的DSS和DMH（A组）1周后出现UC急性期临床和病理改变，3个循环后出现典型结肠癌及高级别异型增生的临床和病理改变，第3循环末癌变率高达90．0％。结果表明，联合应用DSS和DMH可以在短时问内成功建立理想的UC癌变的动物模型。

PI3K/Akt-mTOR信号通路介导溃疡性结肠炎相关癌变的实验研究

目的观察溃疡性结肠炎相关癌变(ulcerative colitis associated carcinogenesis,UCAC)小鼠结肠黏膜PI3K/Akt-m TOR信号通路中相关指标的变化,探讨UCAC的可能机制。方法 40只Balb/c小鼠随机分为2组,其中正常组10只,模型组30只,采用DMH/DSS复合法制备UCAC模型,第20周末处死全部小鼠,截取结肠组织备测,应用光镜及电镜检测UCAC结肠黏膜组织形态学及其超微结构变化,应用实时荧光定量PCR及Western blotting技术检测结肠黏膜P110、P85、P-Akt、m TOR基因及其蛋白表达。结果基因表达变化:与正常组比较,模型组结肠黏膜P110、P85基因表达上调,差异有统计学意义(P<0.05);两组比较,结肠黏膜P-Akt、m-TOR基因表达变化不显著,差异无统计学意义(P>0.05)。蛋白表达变化:与正常组比较,模型组结肠黏膜P110、P85、m TOR蛋白表达呈上升趋势,差异有统计学意义(P<0.05);但模型组P-Akt表达与正常组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论炎症状态下,PI3K/Akt-m TOR信号通路过度活化在UCAC中发挥重要作用。

美沙拉嗪干预溃疡性结肠炎相关癌变小鼠的实验研究

目的:观察美沙拉嗪防治溃疡性结肠炎相关癌变小鼠的实验研究。方法:60只清洁级Balb/c小鼠随机分5组,每组12只,正常组、模型组、低、中、高剂量治疗组;除外正常组,其余各组采用DMH/DSS复合法制备溃结癌变模型,模型组予等剂量生理盐水、治疗组分别予不同剂量美沙拉嗪干预9周。第9周末将全部小鼠脱椎处死,截取全部结肠(回盲部-肛门),肉眼及光镜下观察小鼠结肠组织形态学变化。结果:模型组小鼠结肠肉眼可见浆膜层散在、多处息肉状隆起变化,镜下见腺体萎缩、高级别上皮内瘤变,部分癌变;低剂量组肉眼见结肠黏膜充血水肿,部分可见溃疡样改变,镜下见黏膜充血肿胀,部分腺体萎缩;中、高剂量组肉眼见结肠黏膜充血、水肿,糜烂,镜下见黏膜上皮脱落,充血肿胀,未见溃疡及癌变,与模型组比较,有统计学意义(P<0.05)。各剂量组之间比较,无统计学意义(P>0.05)。结论:美沙拉嗪具有防治溃结相关癌变的生物学效应。

参黛清肠汤介导PI3K/Akt-mTOR通路抗溃疡性结肠炎相关癌变的作用研究

目的:探究参黛清肠汤对溃疡性结肠炎相关癌变(UCAC)的抑制作用及可能机制。方法:85只C57BL/6小鼠采用葡聚糖硫酸钠(DSS)/氧化偶氮甲烷(AOM)复合法制备UCAC小鼠模型,另取10只小鼠不予造模作为空白组。将造模成功的51只UCAC小鼠按随机数字表法分为模型组(11只)、水飞蓟宾组(10只)、参黛清肠汤低剂量组(10只)、参黛清肠汤中剂量组(10只)、参黛清肠汤高剂量组(10只)。空白组、模型组给予生理盐水灌胃,水飞蓟宾组给予36 mg/kg水飞蓟宾灌胃,参黛清肠汤低、中、高剂量组分别给予15、30、60 mg/kg参黛清肠汤灌胃,体积均为1 mL/100 g,1次/d,连续4周。观察小鼠一般情况,观察小鼠疾病活动指数(DAI)变化,HE染色观察小鼠结肠组织病理学变化,TUNEL染色检测小鼠结肠组织细胞凋亡情况,MTT法检测小鼠结肠癌细胞增殖情况,RT-qPCR检测小鼠结肠组织PI3K mRNA、Akt mRNA、mTOR mRNA、Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达,Western blotting法检测小鼠结肠组织PI3K/Akt-mTOR通路相关分子及Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:模型组小鼠饮水、进食量减少,精神萎靡、反应迟钝,懒动,体质量减轻,毛发无光泽,大便稀软,出现脓血便。模型组中2只小鼠因严重便血死亡,结肠黏膜上皮脱落,腺体萎缩,上皮内瘤变,部分出现浸润癌。水飞蓟宾组和参黛清肠汤低、中、高剂量组小鼠均较模型组好转。与空白组比较,模型组小鼠DAI评分,PI3K mRNA、Bcl-2 mRNA相对表达量,PI3K、p-Akt、p-mTOR、Bcl-2蛋白相对表达量均明显升高,结肠组织细胞凋亡数量明显减少,Bax mRNA和蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,水飞蓟宾组和参黛清肠汤低、中、高剂量组小鼠DAI评分,结肠组织PI3K mRNA、Bcl-2 mRNA相对表达量,PI3K、p-Akt、p-mTOR、Bcl-2蛋白相对表达量均明显降低,结肠组织细胞凋亡数量均明显增多,Bax mRNA和蛋白相对表达量明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);参黛清肠汤上述作用均呈剂量依赖性,且参黛清肠汤中剂量组各指标与水飞蓟宾组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:参黛清肠汤可介导PI3K/Akt-mTOR通路抗溃疡性结肠炎相关癌变。

β-catenin、C-myc表达介导溃疡性结肠炎相关癌变的实验研究

目的:观察溃疡性结肠炎相关癌变结肠黏膜β-catenin、C-myc表达变化,探讨β-catenin、C-myc在溃结癌变中的作用。方法:60只清洁级Balb/c小鼠随机分两组,每组30只,正常组、模型组;除外正常组,模型组采用DMH/DSS复合法制备溃结癌变模型,分别应用光镜检测结肠黏膜组织形态学变化,免疫组化及实时荧光定量PCR检测结肠黏膜β-catenin、C-myc蛋白及其mRNA表达变化。结果:模型组小鼠结肠肉眼可见浆膜层散在、多处息肉状隆起变化,镜下见腺体萎缩、高级别上皮内瘤变,部分癌变,其结肠β-catenin、C-myc蛋白及其mRNA呈高表达特点;与正常组比较,有统计学意义(P<0.05)。结论:β-catenin信号突变及下游靶基因C-myc过度转录在溃疡性结肠炎相关癌变发生发展中占据重要地位,调控β-catenin将有望成为防治溃疡性结肠炎相关癌变的靶点。

基于Wnt/β-catenin信号通路概述中药防治溃疡性结肠炎及其相关癌变

Wnt/β-catenin信号通路促进肠上皮细胞更新,有利于修复肠道黏膜。但在溃疡性结肠炎中,Wnt/β-catenin信号通路虽促进上皮细胞增加,但却抑制钙黏蛋白的表达,导致黏膜机械屏障功能受损。这一过程不仅导致溃疡性结肠炎难以治愈,而且为其发生相关性癌变提供了基础。对Wnt/β-catenin信号通路介导溃疡性结肠炎及其相关癌变的机制进行了综述,并总结了中药防治效果。

从免疫代谢途径探讨骨髓来源抑制细胞影响慢性肠炎癌变的效应机制

骨髓源性抑制细胞(MDSC)可形成能够影响慢性结肠炎相关癌变(CAC)进程的免疫抑制微环境。炎症条件下,异常的线粒体代谢与缺氧状态参与调控MDSC并影响CAC的进展。而AMP依赖的蛋白激酶的激活会抑制MDSC对缺氧诱导因子-1α基因的表达调控。本文拟从免疫代谢途径探究MDSC如何调控和影响慢性肠炎的癌变,以期为结直肠癌的防治提供思路和证据支撑。

健脾清热活血方介导β-catenin,TCF-4表达防治溃疡性结肠炎相关癌变研究

目的:观察溃疡性结肠炎相关癌变(ulcerative colitis associated carcinogenesis,UCAC,简称溃结相关癌变)小鼠组织形态、超微结构以及结肠黏膜β-catenin、T细胞因子4(T cell factor-4,TCF-4)的表达变化,探讨健脾清热活血方药防治溃结相关癌变的可能机制。方法:120只清洁级BALB/c小鼠随机分6组,每组20只,设正常组、模型组、美沙拉嗪0.4 g·kg-1阳性对照组、健脾清热活血方低、中、高剂量治疗组(4.29,8.58,17.16 g·kg-1);除外正常组,其余各组采用1,2-二甲肼(DMH)/葡聚糖硫酸钠(DSS)复合法制备溃结相关癌变模型,模型组予等剂量生理盐水,对照组予美沙拉嗪,治疗组予不同剂量健脾清热活血方药水提液,连续干预16周。应用光镜、透射电镜观察溃结相关癌变小鼠结肠组织形态学以及超微结构变化;免疫组化、Western-bolt及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测结肠黏膜β-catenin、TCF-4蛋白及其mRNA表达变化。结果:模型组小鼠结肠光镜下可见黏膜上皮脱落,腺体萎缩、高级别上皮内瘤变,部分癌变,电镜下可见大、小不等、排列紊乱的上皮细胞,胞核不规则、核仁增大并上移;治疗组光镜下见黏膜充血肿胀,个别轻度不典型增生和淋巴滤泡出现,未见溃疡及癌变,电镜下可见上皮细胞体积明显变小,核染色质边集、核固缩或碎裂,核膜断裂,凋亡小体形成;与模型组比较,治疗组结肠黏膜损伤有不同程度改善(P<0.05)。模型组结肠β-catenin,TCF-4蛋白及其mRNA呈高表达特点;治疗组结肠β-catenin、TCF-4蛋白及其mRNA表达均呈下降趋势,与模型组比较,有统计学意义(P<0.05)。结论:健脾清热活血方药可能通过调控β-catenin,TCF-4表达,促进炎症缓解,发挥防治溃疡性结肠炎相关癌变的效应。

炎症小体与炎症性肠病及其癌变的关系

炎症性肠病(IBD)是一组慢性非特异性肠道炎症性疾病,结肠炎相关癌变是IBD的主要并发症之一。炎症小体是先天免疫系统中一类重要的多蛋白复合体,在识别和清除肠道致病菌、维持肠道内稳态等方面发挥重要作用,其功能异常参与了IBD及其癌变的发生。本文就炎症小体与IBD及其癌变关系的研究进展作一综述。

FOXO3调控NF-κBp50表达介导肠上皮细胞凋亡参与溃疡性结肠炎相关癌变及健脾清热活血方药干预研究

目的观察溃疡性结肠炎相关癌变(ulcerative colitis associated carcinogenesis,UCAC)结肠黏膜FOXO3、NF-κBp50、C-myc、肠上皮细胞凋亡及健脾清热活血方药对上述指标的影响,探讨健脾清热活血方药防治UCAC的可能机制。方法120只SPF级雄性Balb-c按体质量随机分为正常组、模型组、对照组(美沙拉嗪组)、治疗组(低、中、高剂量组),采用DMH/DSS复合法制备UCAC模型,除正常组同步饲养外,其余各组分别予不同药物干预20周,第20周末处死全部动物。采用TUNEL染色检测肠上皮细胞凋亡;采用Real-time PCR及Western-bloting技术检测FOXO3、NF-κBp50、C-myc表达变化。结果 UCAC模型组小鼠结肠黏膜上皮细胞凋亡率为(18.65±2.47)%,结肠Foxo3、NF-ΚBp50、C-myc基因及其蛋白表达上升,该变化与UCAC组织病理学积分呈正相关;治疗组结肠黏膜上皮细胞凋亡率为(6.54±1.13)%,结肠FOXO3、NF-κBp50、C-myc基因及其蛋白表达较模型组比较明显下降,有统计学意义(P<0.05)。结论 FOXO3上调NF-κBp50表达诱导肠上皮细胞凋亡加速,破坏肠黏膜屏障,导致炎症持续在UCAC发病中占据重要地位;健脾清热活血方药可能通过下调FOXO3、NF-κBp50、C-myc表达,介导肠上皮细胞凋亡,修复肠黏膜屏障而发挥缓解UCAC的效用。