消痰散结方对结肠癌干细胞样细胞凋亡的影响及相关机制研究

目的探讨消痰散结方对结肠癌干细胞样细胞(CCSCs)凋亡的影响及相关机制。方法采用无血清培养法由HCT116结肠癌细胞诱导培养CCSCs,通过检测CCSCs标志物CD44进行鉴定。消痰散结方浸膏冻干粉末溶解在细胞培养液中,制备消痰散结方保存液。以不同浓度消痰散结方(0.125、0.25、0.5、1.0 mg/mL)作用CCSCs 72 h,Annexin-V/PI双染色结合流式细胞术检测各浓度消痰散结方对CCSCs的影响。Western blot检测药物干预后Bax、Bcl-2蛋白表达变化。结果 HCT116细胞在无血清培养下成球生长,CCSCs中CD44+细胞占(49.69±1.89)%。消痰散结方可诱导CCSCs,其凋亡率与对照组(0 mg/mL)比较,差异有统计学意义(P<0.05),其凋亡效应呈浓度依赖性。消痰散结方作用后,Bcl-2家族的促凋亡蛋白Bax表达增强,抑凋亡蛋白Bcl-2表达减弱,以0.5、1.0 mg/mL两组浓度效应更为显著。结论从HCT116结肠癌细胞成功诱导富集CCSCs,消痰散结方能剂量依赖性地诱导CCSCs,其机制可能与促凋亡蛋白Bax表达增强、抑凋亡蛋白Bcl-2表达减弱相关。