非小细胞肺癌组织中长链非编码RNA结肠癌相关转录子1的表达及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌组织中长链非编码RNA结肠癌相关转录子1(lncRNA CCAT1)的表达及临床意义。方法收集2018年1月至2019年12月于我院就诊的100例非小细胞肺癌患者术后癌组织及癌旁正常组织,采用RT-qPCR法检测样本中lncRNA CCAT1的表达,并分析其与非小细胞肺癌发生进展的相关性。设计合成lncRNA CCAT1质粒,转染A549细胞,检测转染后lncRNA CCAT1的表达,采用流式细胞术分析转染细胞的凋亡情况,采用噻唑蓝(MTT)实验法检测转染细胞的增殖能力。结果非小细胞肺癌组织中lncRNA CCAT1的相对表达量为(4.13±0.79),明显高于癌旁正常组织(2.28±0.56),二者比较差异显著(P<0.05)。RT-qPCR结果提示,与转染空载体阴性对照组和未转染对照组比较,转染lncRNA CCAT1质粒的A549细胞中lncRNA CCAT1表达较低(P<0.05)。流式细胞术结果提示,与转染空载体阴性对照组和未转染对照组比较,转染48h后lncRNA CCAT1质粒的A549细胞凋亡比例明显较低(P<0.05)。MTT结果提示,与转染空载体阴性对照组和未转染对照组比较,转染48h、72h、96h后lncRNA CCAT1质粒的A549细胞增殖能力均较高(P<0.05)。不同临床分期、淋巴结转移与非小细胞肺癌组织中lncRNA CCAT1的表达存在差异(P<0.05)。结论 lncRNA CCAT1在非小细胞肺癌组织中呈高表达,其或将成为非小细胞肺癌的潜在治疗靶点。

长链非编码RNA结肠癌相关转录子2在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的分析口腔鳞状细胞癌oralsquamouscellcarcinoma，OSCC）组织特征长链非编码RNA（10ngnon．codingRNA，lncRNA）表达谱，并探讨lncRNA结肠癌相关转录子2（coloncancerassociatedtranscript2，CCAT2）在OSCC中的表达及临床意义。方法采用高通量lncRNA芯片检测3例OSCC患者的癌组织及癌旁正常组织lncRNA表达水平，分析OSCC组织特征性lncRNA表达谱，进一步通过实时定量PCR（real．timequantitativePCR，RT-qPCR）检测86例OSCC及对应的癌旁组织中CCAT2的表达，并分析其与临床病理特征关系。设计合成CCAT2的靶向小干扰RNA（CCAT2-siRNA），脂质体转染舌鳞状细胞癌Tea8113细胞。实验分为阴性对照组和CCAT2-siRNA转染组（实验组），利用CCK-8实验检测CCAT2干预对Tca8113细胞增殖能力的影响。结果OSCC患者癌组织与癌旁对照样本间差异表达的lncRNA共1685个，其中936个表达上调，749个表达下调，差异表达倍数≥10的lncRNA共23个。RT—qPCR验证结果显示，与癌旁组织相比，IncRNACCAT2在OSCC组织中高表达（平均上调5．7倍；P〈0．01）。临床病理相关分析显示，CCAT2表达水平还与OSCC的细胞分化程度及病理分期相关。低分化OSCC组织中CCAT2表达水平明显高于中、高分化OSCC组织（P=0．015）；TNM分期Ⅲ＋Ⅳ期OSCC组织的CCAT2表达水平明显高于Ⅰ＋Ⅱ期标本（P=0．022）。CCK-8实验结果显示，下调舌鳞状细胞癌Tca8113细胞CCAT2表达可明显抑制细胞增殖，转染48、72h实验组A值较对照组显著降低（P〈O．01）。结论多种IncRNA在OSCC患者肿瘤组织中呈异常表达，其中CCAT2在OSCC中的表达上调可能与OSCC的发生发展有关。

长链非编码RNA结肠癌相关转录子2在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的 观察长链非编码RNA结肠癌相关转录子2（CCAT2）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达,并探讨CCAT2的生物学功能.方法 选取91例病理学确诊为NSCLC患者的癌组织及癌旁组织,实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）法检测CCAT2的表达.设计合成CCAT2的靶向小干扰RNA （siRNA）,脂质体法转染NCL-H1975细胞.实验分阴性对照组和CCAT2-siRNA转染组（实验组）：细胞计数试剂盒（CCK-8）实验检测CCAT2对增殖活性的影响;划痕实验及Transwell实验检测CCAT2对NSCLC侵袭转移的影响.结果 CCAT2在NSCLC肿瘤组织中高表达（平均上调7.21倍）,并与肺腺癌密切相关（P＜0.05）.CCK-8实验结果显示：24、48、72、96 h实验组450mm吸光度值较对照组显著降低（P＜0.05）;划痕实验显示：实验组与阴性对照组宽度为（194.2±18.3） mm比（62.4±5.2）mm（P ＜0.01）;Transwell实验显示：实验组与阴性对照组穿膜细胞数为（79.8 ±6.8）个比（244.2±14.8）个（P＜0.01）.结果表明siRNA沉默CCAT2表达后,抑制了NCl-H1975细胞的增殖和迁移侵袭.结论 CCAT2是肺腺癌特异的长链非编码RNA,能促进NSCLC的增殖和迁移侵袭.

OSCC组织特征性lncRNA表达谱及lncRNA CCAT2在口腔鳞状细胞癌发生发展中的作用

目的分析口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织特征性长链非编码RNA(lncRNA)表达谱及lncRNA结肠癌相关转录子2(CCAT2)在疾病发生发展中的作用。方法回顾性将十堰市太和医院收治的73例OSCC患者作为研究对象,取其癌组织与癌旁正常组织,通过高通量lncRNA芯片对其lncRNA表达情况进行测定,对OSCC组织特征性lncRNA表达谱进行分析,进而利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)法对其癌组织与癌旁正常组织CCAT2表达水平进行测定,进而分析CCAT2表达与OSCC临床病理特征的相关性。结果共检出lncRNA差异表达1 697个,在芯片lncRNA总数中占5.55%(1 697/30 586);其中,呈现表达下降754个,表达升高943个;共有21个lncRNA差异表达倍数至少为10倍,其中表达下降的lncRNA9个,表达升高的lncRNA12个。RT-q PCR检测结果发现,在OSCC癌组织中,ENST00000458468与UCAl表达较癌旁正常口腔黏膜组织显著升高(P<0.01)。OSCC癌组织中CCAT2表达量较癌旁正常组织明显升高(P<0.01)。不同肿瘤分化程度与TNM分期的OSCC患者CCAT2表达量的比较,均存在显著差异(P<0.01);其中,低分化、Ⅲ~Ⅳ期的患者CCAT2表达量较中/高分化、Ⅰ~Ⅱ期者显著升高(P<0.01)。而CCAT2表达量与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位及颈淋巴结转移均无显著相关性(P>0.05)。结论在OSCC癌组织中,诸多lncRNA出现表达异常,其中CCAT2在OSCC肿瘤组织中的表达量增多,提示可能参与OSCC的病理过程。

长链非编码RNA CCAT1在肝细胞癌组织及细胞株中的表达及临床意义

目的探讨长链非编RNA结肠癌相关转录子1(LncRNA-CCAT1)在肝细胞癌(HCC)组织及细胞株中的表达及临床意义。方法采用QPCR法检测CCAT1在4种肝癌细胞株(SMMC-7721、Hep3B、Hub7和HepG 2)、正常肝细胞株LO2和42例HCC组织及其癌旁组织中的差异性表达,分析CCAT1表达与HCC临床病理特征的关系(性别、年龄、甲胎蛋白、肿瘤大小、肿瘤数量、淋巴结转移、分化程度和TNM分期)。结果与正常肝细胞株LO2相比,CCAT1在SMMC-7721、Hep3B、Hub7和HepG 2细胞株中均呈高表达(P<0.05),其中在HepG 2细胞中表达水平最高。CCAT1在HCC组织中的表达水平高于其癌旁组织,差异有统计学意义(P=0.016);CCAT1在肝癌组织中的表达水平与肿瘤大小、甲胎蛋白、分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤数量无关(P>0.05)。结论 LncRNA CCAT1与HCC发生、发展及预后有关,其作用机制值得进一步研究。