二氢青蒿素抑制结肠癌细胞株HCT-116并诱导凋亡的实验研究

目的:研究二氢青蒿素(Dihydroartemisinin,DHA)对人结肠癌HCT-116细胞的体外抑制并诱导凋亡,并探讨其作用机制。方法:以不同浓度的DHA作用于体外培养的HCT-116细胞,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测细胞生长抑制率;应用流式细胞仪进行周期分析检测细胞凋亡情况;用Western Blotting法,检测不同浓度的DHA作用于肿瘤细胞时,凋亡相关蛋白Bcl-2,bax,cleavad-PARP表达情况。结果:在DHA作用后,HCT-116细胞生长受到明显抑制,IC50(半抑制浓度)值为14.18μmol/L。并呈一定的量效和时效依赖关系。流式细胞仪检测亚二倍体(sub-G0)比例增高;Western-Blotting检测药物处理细胞后Bcl-2表达水平下调,而Bax、cleavad-PARP表达水平明显上调。结论:DHA能抑制HCT-116细胞的生长增殖并诱导细胞发生凋亡。

高菜硫代葡萄糖苷提取物对人结肠癌细胞HCT116的抑制作用

为了探讨高菜(Brassica juncea var.integlifolia)中硫代葡萄糖苷(简称硫苷)的含量、种类及其对人结肠癌细胞株HCT116细胞增殖和凋亡的影响,采用紫外分光光度法检测新鲜高菜中总硫苷含量,高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术鉴定硫苷化合物结构,流式细胞仪、蛋白质印迹法和实时定量聚合酶链式反应检测高菜硫苷提取物对人结肠癌细胞株HCT116细胞增殖和凋亡的影响。结果表明:新鲜高菜中总硫苷含量为15.45 mg/g;从高菜硫苷提取物(总硫苷质量分数为73.7%)中鉴定出2-丙烯基硫苷、4-甲基硫代丁基硫苷、4-甲氧基-3-吲哚甲基硫苷3种主要的硫苷化合物;高菜硫苷提取物对正常人结肠成肌纤维细胞CCD-18Co没有抑制作用,但通过诱导细胞周期基因及相关信号蛋白(Cyclin B、CyclinD1、CyclinE)下调使HCT116细胞的细胞周期停滞,通过诱导细胞凋亡基因及相关信号蛋白(Caspase-3、Cleaved caspase-3)的上调使人结肠癌细胞株HCT116细胞凋亡,从而抑制人结肠癌细胞株HCT116细胞增殖。

青蒿琥酯对人结肠癌细胞HCT116和HT29的增殖与凋亡

目的:观察青蒿琥酯对人结肠癌细胞HCT116和HT29细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用不同浓度青蒿琥酯处理HCT116和HT29细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测青蒿琥酯对人结肠癌细胞的增殖抑制效应,采用流式细胞术检测细胞凋亡的情况。结果:不同浓度青蒿琥酯(7.5、15、30、60、120μg/m L)处理两种人结肠癌细胞48 h后,抑制率随浓度增加呈上升趋势(HCT116:19.42%、24.59%、44.84%、74.15%、92.87%;HT29:11.77%、17.63%、34.23%、48.51%、70.59%)。不同浓度青蒿琥酯(0、60、120μg/m L)处理两种人结肠癌细胞24 h后凋亡率随浓度增加逐渐上升(HCT116:2.46%、51.36%、64.10%;HT29:1.14%、35.95%、43.45%)。结论:青蒿琥酯对人结肠癌CHT116和HT29细胞具有生长抑制和诱导凋亡作用。

紫草素对人结肠癌细胞HCT116自噬和凋亡的影响

目的:研究紫草素对人结肠癌细胞HCT116自噬和凋亡的影响。方法:以0(空白对照)、10、20、40μg/mL紫草素作用于HCT116细胞48 h后,采用MTT法检测细胞增殖抑制率;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;分别采用实时荧光定量-聚合酶链式反应法和Western blotting法检测细胞中微管相关蛋白轻链3(LC3)和自噬相关蛋白Beclin-1、p62的mRNA及其蛋白表达水平。结果:与空白对照比较,10、20、40μg/mL紫草素作用48 h后HCT116细胞的增殖抑制率和凋亡率均显著升高(P<0.05或P<0.01)。10、20、40μg/mL紫草素作用于HCT116细胞48 h后均可不同程度地升高细胞中LC3、Beclin-1、p62 mRNA及其蛋白的表达水平,除10μg/mL紫草素作用后细胞中LC3 m RNA表达水平升高不显著外,其余指标水平与空白对照比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:紫草素可诱导人结肠癌细胞HCT116发生凋亡,并激活其自噬途径。

miRNA-455-3p对HCT116结肠癌细胞迁移、侵袭的影响及机制研究

目的探讨miRNA-455-3p对HCT116结肠癌细胞迁移、侵袭的影响及机制研究。方法采用脂质体LipofectamineTM3000将miR-455-3p mimics和miR-455-3p NC转入HCT116结肠癌细胞中,Real-time PCR检测细胞中miR-455-3p表达,MTT法检测细胞活力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测细胞中基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinases2,MMP2)、MMP9、磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号通路相关蛋白的表达。结果与miR-455-3p NC组比较,miR-455-3p mimics组miR-455-3p表达量显著提高(P<0.01),细胞活力、迁移能力、侵袭能力均显著降低(P<0.01),MMP2、MMP9、PI3K及p-AKT表达量均显著下调(P<0.01)。结论 miR-455-3p mimics可能通过阻断PI3K/AKT信号通路抑制HCT116细胞的迁移及侵袭。

新藤黄酸通过内质网应激诱导人结肠癌HCT116细胞凋亡的研究

目的研究新藤黄酸(gambogenic acid,GNA)诱导人结肠癌HCT116细胞凋亡的机制。方法采用不同浓度的GNA作用细胞24h,对照组是相同浓度GNA加内质网应激抑制剂4-苯基丁酸(4-phenylbutyric acid,4-PBA)共同作用HCT116细胞24h。采用甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)染色测定两组细胞增殖抑制率的差异,采用吖啶橙(acridine orange,AO)和溴化乙锭(ethidium bromide,EB)染色观察细胞的形态学变化,采用膜联蛋白Ⅴ(AnnexinⅤ,AV)-异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)/碘化丙碇(propidium iodide,PI)双重染色检测细胞凋亡率。结果内质网应激抑制剂4-PBA可以缓解GNA对HCT116细胞增殖的抑制作用;AO/EB染色后荧光显微镜观察发现GNA作用的细胞具有凋亡特征;流式细胞仪检测显示4-PBA可降低HCT116细胞的凋亡率。结论 GNA能抑制人结肠癌细胞HCT116增殖,诱导细胞凋亡,其诱导细胞凋亡的作用可能与内质网应激途径有关。

奥沙利铂与7-羟基星形孢菌素对结肠癌HCT116细胞的杀伤作用及其机制的研究

目的奥沙利铂与7-羟基星形孢菌素单独及联合应用，探讨诱导结肠癌细胞HCTl16死亡的作用机制。方法应用MTT法检测L-OHP、UCN-01单药及联用对HCTll6细胞的增殖抑制作用；应用流式细胞术、Western blot方法检测药物处理后的结肠癌细胞凋亡情况；应用HE染色法检测丝裂灾变的形态改变。结果低浓度L-OHP（6．25pμmol／L）与UCN-01（100nmol／L）联用对结肠癌HCTll6细胞的杀伤可产生协同作用，效果明显强于单独用药组；两药联用AnnexinV阳性细胞率与UCN-01单用无明显差别，但死亡细胞明显增加；两药联用HCTll6细胞的形态发生改变，巨核多核细胞较单独用药组增多约10％。结论 L-OHP与UCN-01联用对HCTll6细胞具有协同抑制作用，诱导HCTll6细胞发生凋亡和丝裂灾变。

金花茶花、种子和叶提取物对U937和HCT116细胞增殖抑制的实验观察

目的比较金花茶花、种子和叶提取物对人白血病细胞(U937)和结肠癌细胞(HCT116)增殖抑制的作用。方法常规传代培养2种肿瘤细胞,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞活性。结果金花茶花和种子的95%乙醇提取物对U937和HCT116细胞增殖均有抑制作用,且细胞存活率随样品质量浓度的加大而降低。金花茶叶乙醇提取物和水提取都显示了较强的抑制U937细胞增殖的作用,呈现出剂量效应关系。而金花茶叶子的不同提取物对HCT116细胞增殖没有作用。结论金花茶花、种子和叶子均有抗肿瘤的作用。

辛伐他汀对结肠癌细胞HCT116凋亡的诱导作用及其机制

目的观察辛伐他汀对结肠癌细胞HCT116凋亡的诱导作用,初探其可能机制。方法采用MTT法测定辛伐他汀对小鼠结肠癌细胞株HCT116生长的抑制作用;用Western blot法测定辛伐他汀对细胞凋亡相关蛋白PARP、cleaved-PARP和KLF2、KLF4以及细胞增殖相关蛋白P21、P-P53表达的影响情况。结果辛伐他汀对小鼠结肠癌细胞HCT116的生长具明显抑制作用;凋亡标志蛋白cleaved-PARP的水平明显上升;阻断AMPK信号途径可明显抑制辛伐他汀对cleaved-PARP蛋白的诱导作用。结论辛伐他汀具有明显的抗肿瘤作用,可能与AMPK信号途径有关。

硒代蛋氨酸对结肠癌细胞凋亡、粘附、侵袭的影响及机制

目的主要探讨硒代蛋氨酸(SeMet)对HCT116结肠癌细胞凋亡、粘附、侵袭的影响及机制。方法不同剂量(1.56,3.13,6.25,12.5,25,50,100μmol/L)SeMet处理HCT116细胞48h,每组6个复孔,四甲基偶氮唑盐(MTT)实验测定半抑制率(IC50)。接着细胞随机分为对照组及SeMet组,处理细胞48h,每组6个复孔,Hoechst染色检测细胞凋亡;Transwell检测细胞侵袭情况;细胞粘附实验检测细胞粘附情况;Western blot实验检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9、E-cadherin、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)蛋白含量及糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)/磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路的激活情况。结果SeMet孵育HCT116细胞IC50为17.07μmol/L。SeMet组较对照组细胞凋亡率升高,细胞粘附、侵袭数目减少,Bcl-2、MMP-2、MMP-9、ICAM-1及PI3K蛋白表达量降低,GSK-3β及AKT磷酸化水平降低,Bax及E-cadherin蛋白表达量升高,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论SeMet能诱导HCT116细胞凋亡并抑制细胞粘附及侵袭,可能是通过抑制GSK-3β/PI3K/AKT信号通路实现的。

DNA依赖蛋白激酶催化亚基抑制剂NU7026对结肠癌HCT116癌干细胞的放射增敏作用

目的 以结肠癌细胞HCT116为研究对象,评价DNA依赖蛋白激酶催化亚基（DNA-PKcs）抑制剂NU7026对癌干细胞的放射增敏作用及其机制。方法 以CD133＋/CD44＋为标志物,流式细胞术检测癌干细胞亚群。将HCT116细胞分为对照组、单纯药物（20 μmol/L NU7026）组、单纯照射（2 Gy γ射线）组和药物＋照射（20 μmol/L NU7026联合2 Gy γ射线）组,照射前2 h加入NU7026。细胞集落形成实验检测HCT116细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和凋亡, γ-H2AX foci的免疫荧光激光共聚焦分析DNA双链断裂损伤修复。结果 体外培养HCT116细胞中CD133＋/CD44＋癌干细胞亚群比例高达（88.14±0.47）%,HCT116细胞低密度接种无血清培养基中集落形成率为（84.75±1.35）%。与单纯照射组比较,药物＋照射组细胞存活率显著降低（t=7.22,P〈0.01）。受照后48 h,药物＋照射组的癌干细胞亚群比例较单纯照射组显著降低（t=9.55,P〈0.01）。受照后24 h,NU7026明显增加G2/M期阻滞（t=7.67,P〈0.01）,48 h细胞早期凋亡发生率也明显增加（t=8.24,P〈0.05）。药物＋照射组在照后2、4、8和24 h DNA双链断裂（γ-H2AX foci）残留比单纯照射组明显增多（t=19.58、11.95、7.01和9.45,P〈0.01）。结论 NU7026对癌干细胞为优势亚群的结肠癌HCT116细胞具有明显的放射增敏作用,显著增加对癌干细胞的杀伤效应,增敏机制包括抑制DNA修复,诱发不可逆G2/M期阻滞和增加细胞凋亡。

Stat5b信号通路调控bcl-2成员表达抑制结肠癌细胞凋亡的作用及其机制

目的探讨转录信号转导子与激活子5b(Stat5b)反义寡核苷酸诱导结肠癌细胞凋亡的作用及其机制。方法用阳离子脂质体介导Stat5b反义寡核苷酸(20μmol/L)转染人结肠癌HCT116细胞,MTT法检测细胞增殖状态;流式细胞术检测细胞周期与凋亡;Westernblot检测Stat5、pStat5及凋亡家族成员bcl2、bclxL、Mcl1、Caspase3的表达。结果转染Stat5b反义寡核苷酸72h后HCT116细胞增殖受抑制,G1期细胞比率由68.9%上升至85.6%,S期细胞比率由15.4%下降至7.6%,凋亡细胞比率由5.6%增加至27.5%,Stat5,pStat5与bcl2家族成员表达水平下降。结论Stat5信号转导通路活性增高可能与结肠癌发生发展有关,阻断Stat5通路可以诱导结肠癌细胞凋亡。

延龄草皂苷通过降低成纤维细胞活化蛋白表达水平抑制人类结肠癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭

目的研究延龄草皂苷是否能通过影响纤维细胞活化蛋白(FAP)表达来抑制结肠癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭。方法将对数生长期结肠癌细胞HCT116分为5组:对照组、siRNA组、低剂量实验组、中剂量实验组和高剂量实验组。低、中、高剂量实验组分别用含浓度为30, 60, 90 mg·L^(-1)延龄草皂苷的DMEM培养基100μL进行培养,对照组用等剂量的1%甲醇溶剂DMEM培养基进行培养,siRNA组用等剂量siRNA试剂且不含药物的DMEM培养基进行培养。用四唑盐(MTT)比色法增殖细胞实验筛选半数抑制浓度(IC_(50))及药物干预浓度;用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应分析检测FAP基因表达水平;用MTT比色法检测细胞增殖情况;用流式细胞术检测细胞凋亡情况;用Transwell实验检测细胞迁移和侵袭情况。结果对照组、siRNA组、低剂量实验组、中剂量实验组和高剂量实验组的细胞增殖抑制率分别为(0.00±0.01)%,(55.03±6.32)%,(12.63±1.82)%,(28.92±2.48)%和(46.22±5.01)%;这5组的FAP基因表达分别为1.00±0.01,0.01±0.01,0.42±0.13,0.12±0.06和0.03±0.05;这5组的细胞凋亡率分别为(5.02±0.92)%,(68.92±7.01)%,(18.02±2.11)%,(35.22±4.67)和(60.18±6.33)%;这5组的细胞迁移水平分别为150.67±16.24,21.97±1.63,90.27±9.33,65.20±5.31和41.37±3.46;这5组的细胞侵袭水平分别为139.00±13.52,12.40±1.00,87.17±8.00,52.43±4.20和35.63±2.18。上述指标,实验组与对照组比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论延龄草皂苷通过降低FAP表达水平抑制人类结肠癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭。

奥沙利铂和7-羟基星形孢菌素联合用药对HCT116细胞的抑杀作用

目的:观察奥沙利铂(Oxaliplatin,L-OHP)与7-羟基星形孢菌素(7-hydroxystaurosporine,UCN-01)单独及联合应用对结肠癌细胞HCT116的增殖抑制作用,探讨其诱导细胞死亡的作用机制。方法:应用MTT法检测L-OHP,UCN-01单药及联用对HCT116细胞的增殖抑制作用;应用流式细胞术、Western blot方法检测药物处理的结肠癌细胞凋亡;应用HE染色法检测丝裂灾变的形态改变。结果:低浓度L-OHP(6.25μmol·L-1)与UCN-01(100 nmol·L-1)联用对结肠癌HCT116细胞的杀伤可产生协同作用,效果明显强于单独用药组;两药联用Annexin V阳性细胞率与UCN-01单用无明显差别,但死亡细胞明显增加;两药联用HCT116细胞的形态发生改变,巨核多核细胞较单独用药组增多约10%。结论:L-OHP与UCN-01联用对HCT116细胞的增殖具有协同抑制作用,诱导细胞发生凋亡和丝裂灾变。

过表达miR-18a靶向ATM对结肠癌细胞增殖和迁移的影响

目的研究miR-18a通过靶基因共济失调-毛细血管扩张突变基因(ataxia telangiectasia mutated gene,ATM)调控结肠癌细胞的生物学特性。方法通过软件预测miR-18a其中一个靶基因。设计合成miR-18a的模拟剂(mimics)和抑制剂(inhibitor),通过转染不同组分上调或下调内源性miR-18a在结肠癌细胞株HCT116中的表达。采用实时荧光定量(qRT)-PCR、Western blot、MTT法、克隆形成实验、Transwell等方法,检测过表达miR-18a调控ATM基因的表达对体外结肠癌细胞增殖及迁移能力的影响。结果软件预测发现miR-18a的其中一个靶基因是ATM。通过瞬时转染,过表达内源性miR-18a,可降低HCT116细胞内靶基因ATM蛋白的表达水平。转染miR-18amimics后能够下调HCT116细胞的增殖活力,同时显著降低HCT116细胞的克隆形成能力、横向迁移能力及纵向侵袭能力,以上各项改变均与miR-18a过表达有关。结论证实了miR-18a通过负向调控ATM的表达,抑制结肠癌细胞HCT116的增殖和迁移能力。

磷脂酰肌醇3激酶抑制药(LY294002)对结肠癌细胞的作用

目的探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制药—2-(4-吗啉基)-8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4酮(LY294002)对HCT116结肠癌细胞增殖、凋亡、黏附和侵袭的影响和其机制。方法以6个浓度(1.25,2.50,5.00,0.00,20.00,40.00μmol·L^(-1))的LY294002处理HCT116细胞,以四甲基偶氮唑盐实验测定半抑制率(IC50)。将细胞随机分为2组:对照组和LY294002组。以烟酸己可碱/碘化丙啶实验检测细胞凋亡;黏附实验检测细胞黏附能力;Transwell检测细胞侵袭情况;蛋白质印迹法检测PI3K蛋白相对表达水平和蛋白激酶B(Akt)、肿瘤坏死因子-κB(NF-κB)的磷酸化水平。结果 LY294002处理HCT116细胞IC50为13.55μmol·L^(-1)。对照组、LY294002组的细胞凋亡率分别为(3.56±0.37)%和(36.47±3.89)%;细胞黏附率分别为(98.59±9.27)%和(58.36±5.86)%;细胞侵袭数目分别为(173.82±12.48)和(59.60±5.96)个;PI3K蛋白相对表达水平分别为0.98±0.10和0.19±0.01;p-Akt相对表达水平分别为0.99±0.10和0.08±0.01;p-NF-κB p65相对表达水平分别为0.82±0.08和0.16±0.01。组间比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P <0.05)。结论 LY294002能显著地抑制HCT116细胞增殖、黏附和侵袭,并诱导细胞凋亡,与阻断PI3K/Akt/NF-κB信号通路有关。

6种鸢尾黄素曼尼希碱衍生物的合成及其抗肿瘤活性研究

目的:对鸢尾黄素进行结构修饰,寻求新的具有抗肿瘤活性的化合物。方法:以鸢尾黄素为先导化合物,分别加入乙醇胺、甲胺、乙胺、二甲胺、二乙胺、正丙胺等胺类试剂和甲醛溶液,经曼尼希(Mannich)反应得到鸢尾黄素曼尼希碱衍生物,根据红外光谱、紫外光谱、质谱、核磁共振等确定其结构。采用溶解度试验法考察鸢尾黄素及其衍生物的水溶性;采用MTT法考察鸢尾黄素及其衍生物对人结肠癌细胞株HCT116、人肺癌细胞株A549、人肝癌细胞株HepG2的增殖抑制作用,并计算半数抑制浓度(IC50);以H22肝癌荷瘤小鼠为模型,考察鸢尾黄素及其衍生物(剂量均为100 mg/kg)的体内抑瘤率。结果:共合成6个鸢尾黄素曼尼希碱衍生物,分别为8-(N-羟乙基)-亚甲基胺基-5,7,4′-三羟基-6-甲氧基异黄酮、8-(N-甲基)-亚甲基胺基-5,7,4′-三羟基-6-甲氧基异黄酮、8-(N,N-二乙基)-亚甲基胺基-5,7,4′-三羟基-6-甲氧基异黄酮、8-(N,N-二甲基)-亚甲基胺基-5,7,4′-三羟基-6-甲氧基异黄酮、8-(N-乙基)-亚甲基胺基-5,7,4′-三羟基-6-甲氧基异黄酮、8-(N-正丙基)-亚甲基胺基-5,7,4′-三羟基-6-甲氧基异黄酮(依次记为化合物1~6)。与鸢尾黄素比较,6个衍生物的水溶性明显提高,溶解度是鸢尾黄素的5~20倍;其中化合物1、3、5对HCT116细胞的IC50分别为(34.82±3.27)、(16.21±4.13)、(33.12±3.25)μmol/L,均强于鸢尾黄素的IC50[(45.23±5.74)μmol/L];对A549细胞的IC50分别为(37.05±5.74)、(26.88±4.52)、(30.13±6.23)μmol/L,均强于鸢尾黄素的IC50[(53.24±6.34)μmol/L];对HepG2细胞的IC50分别为(23.74±1.45)、(18.96±2.34)、(30.95±2.87)μmol/L,均强于鸢尾黄素的IC50[(48.98±2.58)μmol/L];对H22肝癌荷瘤小鼠的抑瘤率分别55.51%、57.20%、49.15%,且均高于鸢尾黄素的抑瘤率(33.05%),其余3个化合物相比鸢尾黄素的抗肿瘤活性无明显优势。结论:在本研究合成的6个鸢尾黄素曼尼希碱衍生物中,化合物1、3、5均具有强于鸢尾黄素的抗肿瘤活性。

6-姜烯酚对H_2O_2诱导NCM460和HCT116氧化损伤的作用研究

建立结直肠癌细胞氧化损伤模型,加入H_2O_2刺激,通过体外细胞实验研究6-姜烯酚对H_2O_2诱导人正常肠上皮细胞(NCM460)和原位结肠癌细胞(HCT116)氧化损伤的不同作用及可能的分子机制。利用倒置显微镜观察不同浓度6-姜烯酚对H_2O_2诱导NCM460和HCT116后细胞形态的改变。CCK8法筛选6-姜烯酚的浓度区间,并测定细胞存活率。Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测不同分组细胞凋亡。Western-blot检测分析相关凋亡蛋白(Caspase3、PARP1、MCC1、A2F、BCL2)的表达。结果显示,与对照组相比,6-姜烯酚可降低H_2O_2诱导的NCM460中Caspase3、PARP1、MCC1、A2F表达,促进BCL2的表达(p<0.05),具有抗氧化作用,并促进H_2O_2诱导的NCM460增殖(p<0.05),但是在HCT116中。6-姜烯酚却促进Caspase3、PARP1、MCC1、A2F表达,抑制BCL2表达(p<0.05),不同程度加强H_2O_2对HCT116的氧化损伤,抑制细胞增殖(p<0.05)。因此可以得出6-姜烯酚对H_2O_2诱导NCM460及HCT116具有明显不同的相反作用,这一发现可为进一步研究6-姜烯酚抗结直肠肿瘤具体相关机制或通路提供指导意义。

癌细胞表面表达人绒毛膜促性腺激素的免疫荧光检测

目的筛选可供体外和动物体内肿瘤抑制试验的候选癌细胞株。方法通过间接免疫荧光法,用兔抗人绒毛膜促性腺激素(hCG)多克隆免疫球蛋白(IgG)和小鼠抗hCG单克隆免疫球蛋白(IgG),对人结(直)肠癌细胞(HCT15、HCT116、KM12、WiDr、LoVo、LS-174)、前列腺癌细胞(PC3)、小细胞肺癌细胞(A549)的细胞表达hCG情况进行检测。结果被检的8个癌细胞株均对兔抗hCG多克隆免疫球蛋白(IgG)呈阳性反应。其中4株结(直)肠癌细胞(HCT115、HCT116、Lo-Vo、LS-174)和小细胞肺癌(A549)能被小鼠抗hCG单克隆免疫球蛋白染色。结论这5株能与小鼠抗hCG单克隆免疫球蛋白结合的细胞株都适用于以后的肿瘤杀伤试验。