一种新型大鼠结肠纵行肌细胞分离培养方法的建立

目的对大鼠结肠纵行肌细胞分离培养的方法进行改进,建立一种取材方便,纯度高的新型大鼠结肠纵行肌细胞的原代分离培养方法,并观察乙酰胆碱和去甲肾上腺素对结肠纵行肌细胞的作用,为结肠纵行肌生理、病理的研究提供细胞模型。方法取Wistar大鼠结肠,从外侧刮去外膜层,剥离外膜下结肠纵行肌,消化后过滤所剩组织进行贴块培养。观察乙酰胆碱和去甲肾上腺素对纵行肌细胞的作用,用NTS-Elements BR3.60分析软件进行分析。结果经α-SM-actin免疫组织化学染色确定培养的细胞为平滑肌细胞,且纯度高;乙酰胆碱对大鼠结肠纵行肌细胞具有收缩作用,当浓度为5.5×10-1μmol.L-1时,收缩作用最强。去甲肾上腺素对纵行肌细胞具有舒张作用,当浓度为4.86×10-2mmol.L-1时,舒张作用最强。结论从结肠外膜分离肠纵行肌层,消化后过滤,所剩组织进行贴块培养,此方法简便易行、纯度高,且对乙酰胆碱和去甲肾上腺素反应良好。

蜘蛛香环烯醚萜类成分ethoxyviburtinal-11对大鼠结肠纵行肌细胞收缩效应的影响

目的:研究蜘蛛香环烯醚萜类成分ethoxyviburtinal-11对大鼠结肠纵行肌细胞的直接作用及初步机制探讨。方法:原代培养大鼠结肠纵行肌细胞,观察不同时间、不同浓度的ethoxyviburtinal-11对大鼠结肠纵行肌细胞的作用及ethoxyviburtinal-11对工具药5-羟色胺(5-HT)、乙酰胆碱(Ach)和去甲肾上腺素(NE)引起结肠纵行肌细胞收缩效应的影响。结果:当浓度为4.04mmol/L,作用30s时,ethoxyviburtinal-11对结肠纵行肌细胞具有最强的舒张效应。ethoxyviburtinal-11对5-HT引起的结肠纵行肌细胞收缩效应有显著抑制作用,而对Ach、NE的效应无显著性影响。结论:ethoxyviburtinal-11对结肠纵行肌细胞具有直接的舒张作用,其舒张作用可能与5-HT有关。