热化疗对转CD基因结肠癌细胞SW480的杀伤作用

目的 探讨 5 -氟胞嘧啶 ( 5 FC )热化疗对转染组织特异性胞嘧啶脱氨基酶 (CD )基因的大肠癌细胞SW 480的作用。方法 采用脂质体法将CEA基因顺式转录调控序列 (TRS )驱动CD基因的组织特异性逆转录病毒载体G 1CEACDNa转导入大肠癌细胞SW 480 ,以G 418筛选阳性克隆扩增后 ,采用水浴加温法 ,43℃作用 3 0min共 3次 ,同时给予 5 FC进行敏感试验 ;RT PCR法检测目的基因在靶细胞的表达。结果 SW 480 CEACD细胞在 43℃作用 3 0min共 3次条件下 ,CD基因能稳定表达 ;热疗本身对SW 480细胞有一定的杀伤作用 ( P <0 .0 5 ) ,转CD基因后 ,SW 480细胞对 5 FC的敏感性明显提高 (P <0 .0 1) ,热疗与前药 5 FC合用 ,对SW 480 CEACD的杀伤作用显著大于对未转基因细胞的杀伤作用 ( P <0 .0 1) ,亦大于单独应用 5 FC时对SW 480 CEACD细胞的杀伤作用(P <0 .0 5 ) ,热化疗增加了SW 480 CEACD细胞对 5 FC的敏感性 ,并可观察到明显的旁观者效应。结论 热疗与 5 FC联合应用 ,提高了CEA组织特异性CD /5 FC系统对结肠癌细胞SW 480的靶向性杀伤作用。

CK20 mRNA在大肠癌病人外周血中的表达及其临床意义

目的 探讨大肠癌病人外周血中CK2 0mRNA的表达及其临床意义。方法 以CK2 0mRNA为靶基因 ,运用逆转录 聚合酶链反应方法 (RT PCR) ,检测 47例Dukes分期结直肠癌病人及肝转移病人外周血中的大肠癌细胞CK2 0mRNA的表达。结果 2 0例大肠癌组织标本 ,均有CK2 0mRNA的表达 ;2 0例正常人外周血中均无CK2 0mRNA表达 ;DukesB ,C ,D期病人外周血中CK2 0mRNA阳性率分别为 2 5 0 % (5/2 0 ) ,41 2 % (7/1 7) ,87 5% (7/8) ,各组之间差异显著 (P <0 .0 5)。肝转移者CK2 0mRNA阳性率为 87 5% (7/8) ,无肝转移者阳性率为 30 8% (1 2 /39) (P <0 .0 1 )。肿瘤直径 >5cm者 ,CK2 0mRNA阳性率为 51 6%(1 6/31 ) ,<5cm者阳性率为 1 8 8% (3/1 6) (P <0 .0 5)。CK2 0mRNA阳性率与肿瘤原发部位、年龄、性别无关 (P >0 .0 5)。结论 以CK2 0mRNA为靶基因 ,运用RT PCR检测外周血中的大肠癌细胞 ,具有高度特异性和灵敏度。大肠癌应视为一种全身性疾病 ,血液播散或转移在其自然病程中应视为一种相对早期事件 ,并非只有到了晚期 ,才发生血行转移。外周血中CK2 0mRNA的表达与肝转移及复发有关 ,检测外周血中CK2

p16甲基化与大肠癌的发生发展及临床生物学行为的关系

目的 探讨大肠癌癌变过程中 p16蛋白表达和 p16启动子区 Cp G岛甲基化状态的变化、意义及二者的关系。方法 应用免疫组化染色和甲基化特异性 PCR系统检测大肠癌手术切缘黏膜上皮、癌旁组织、腺瘤及大肠癌中 p16蛋白的表达和启动子区 Cp G岛甲基化状态的变化。结果 在大肠癌癌变过程中 p16蛋白表达呈下降趋势 ,其在癌旁组织、腺瘤和癌组织中的表达与手术切缘黏膜上皮相比以及癌与癌旁组织或腺瘤相比差异均有显著性 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 ) ;p16甲基化程度呈增加趋势 ,且在各病变阶段甲基化程度与蛋白表达呈明显负相关 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 ) ;p16甲基化程度与癌组织分化程度 (P<0 .0 1)、浸润深度 (P<0 .0 5 )和淋巴结转移 (P<0 .0 5 )均密切相关。结论 p16启动子区 Cp G岛异常甲基化在大肠癌癌变过程中起重要作用 ,是 p16失活的主要机制 ,可作为大肠癌早期诊断和判断预后的重要分子指标。