从结肠黏膜超微结构变化及Claudin-2、5表达探讨健脾清热活血方干预溃疡性结肠炎的临床研究

[目的]从治疗前后中医症状、Claudin-2、5表达水平及黏膜超微结构变化,探讨健脾清热活血方干预溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。[方法]选取临床符合纳入标准的50例UC患者,随机分为治疗组和对照组,每组各25例,分别给予健脾清热活血方和美沙拉嗪治疗,疗程为12周。应用结肠镜复查及组织病理学技术比较治疗前后结肠黏膜组织学Geboes评分;应用免疫组化检测结肠黏膜Claudin-2和Claudin-5表达;应用透射电镜检测结肠黏膜超微结构改变;记录治疗前及治疗后4、8、12周中医证状积分,主客观指标合参评估健脾清热活血方的临床效用。[结果]从总体疗效分析,治疗组(80.0%)和对照组(76.0%)对比差异无统计学意义。从主要效应指标分析,治疗后,2组患者肠镜评分、肠黏膜组织学评分较治疗前显著降低(P<0.05),但组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。从次要效应指标分析,治疗前2组患者中医症状积分比较差异无统计学意义;治疗后12周综合症状积分较治疗前明显降低(P<0.05);治疗后4周及8周症状积分虽有下降,与治疗前比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后Claudin-2表达比治疗前显著下调;Claudin-5表达比治疗前显著上调(P<0.05)。电镜下治疗前上皮细胞微绒毛稀疏、变短,细胞间连接松散间隙增宽;治疗后上皮细胞微绒毛排列整齐结构基本完整,细胞间相互连接紧密。[结论]健脾清热活血方可能通过下调Claudin-2、上调Claudin-5表达,修复肠黏膜机械屏障,诱导肠黏膜炎症缓解,从而发挥治疗效用。

四君子汤对溃疡性结肠炎模型小鼠claudin-1/3的影响

目的观察四君子汤对溃疡性结肠炎模型小鼠的治疗作用及可能机制,以及对结肠黏膜超微结构变化和结肠黏膜claudin-1、claudin-3蛋白及其mRNA表达的影响。方法将90只Balb/C小鼠分为正常对照组、模型对照组、美沙拉嗪组及四君子汤小、中、大剂量组。除正常对照组外,其余各组小鼠均自由饮用3%葡聚糖硫酸钠2周建立溃疡性结肠炎模型。自第3周起美沙拉嗪组予美沙拉嗪灌胃,四君子汤小、中、大剂量组分别灌胃给予四君子汤3.12,6.24,12.48 g·kg-1灌胃,每天1次,连续1周。透射电镜分析结肠黏膜超微结构变化,实时-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blotting技术检测结肠黏膜claudin-1、claudin-3蛋白及其mRNA表达。结果模型对照组小鼠结肠黏膜上皮细胞绒毛稀疏,上皮细胞连接增宽,杯状细胞减少,线粒体肿胀或空泡变,可见细胞凋亡小体;四君子汤各剂量组微绒毛形态较规则,排列整齐,杯状细胞较多,线粒体肿胀,嵴结构不清,个别内质网扩张。模型对照组小鼠结肠黏膜claudin-1、claudin-3蛋白及其mRNA表达减少;四君子汤各剂量组结肠黏膜claudin-1、claudin-3蛋白及其mRNA表达较模型对照组增加,差异有统计学意义(P<0.05),四君子汤各剂量组claudin-1、claudin-3蛋白及其mRNA表达与正常对照组比较,差异无统计学意义。结论四君子汤通过调控claudin-1、claudin-3蛋白变化,加速结肠黏膜上皮修复,促进溃疡愈合,发挥缓解溃疡性结肠炎的功效。