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TSC1-mTOR-PLK轴以阶段特异性方式调节从施旺细胞增殖到髓鞘形成的内稳态开关 被引量:2
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作者 Jiang M Rao R +7 位作者 Wang J Wang J1 Xu L Wu LM Chan JR Wang H Lu QR 聂昊(编译) 《神经损伤与功能重建》 2018年第5期271-271,共1页
恰如其分的外周髓鞘形成取决于雪旺细胞增殖与分化进程间的平衡。丝氨酸/苏氨酸激酶(mTOR)整合多种环境因素,是细胞生长、代谢、发挥作用的中枢调节者。本文报道了一种mTOR的负性调节剂——结节性硬化复合体(TSC1),通过控制细胞增殖和... 恰如其分的外周髓鞘形成取决于雪旺细胞增殖与分化进程间的平衡。丝氨酸/苏氨酸激酶(mTOR)整合多种环境因素,是细胞生长、代谢、发挥作用的中枢调节者。本文报道了一种mTOR的负性调节剂——结节性硬化复合体(TSC1),通过控制细胞增殖和髓鞘稳态,建立了雪旺细胞谱系进展和髓鞘形成的阶段依赖性程序。小鼠雪旺细胞祖细胞中TSC1的解离导致mTOR信号通路激活,继而导致雪旺细胞过量增殖,分化受阻,髓鞘形成减少。转录组分析显示,TSC1突变体中的mTOR活化使得polo样激酶(PLK)依赖性通路和细胞周期调节剂上调。弱化mTOR或者对PLK进行药理抑制部分挽救了因TSC1缺失导致的外周神经发育过程中的髓鞘形成减少。相较之下,成年小鼠成熟雪旺细胞中TSC1缺失可导致髓鞘的过度增殖和过度生长。本文的发现提示了TSC1-mTOR-PLK信号轴在控制雪旺细胞的发育过程中,从增殖到分化和髓鞘内稳态中起到的阶段特异性功能。 展开更多
关键词 雪旺细胞 结节性硬化复合体 丝氨酸/苏氨酸激酶信号通路 髓鞘形成 polo样激酶 增殖 肿瘤抑制
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LncRNA MEG3调控糖尿病肾病足细胞损伤的机制研究
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作者 马翠 龚蜇强 +1 位作者 高玉章 温秀梅 《浙江医学》 CAS 2024年第16期1719-1724,共6页
目的探讨长链非编码RNA母系表达基因3(LncRNA MEG3)调控糖尿病肾病足细胞损伤的机制。方法采用葡萄糖诱导小鼠肾足细胞(MPC5)构建足细胞损伤模型。将细胞分为高糖组、高糖+短发夹RNA的阴性对照(sh-NC)组、高糖+干扰LncRNA MEG3表达的短... 目的探讨长链非编码RNA母系表达基因3(LncRNA MEG3)调控糖尿病肾病足细胞损伤的机制。方法采用葡萄糖诱导小鼠肾足细胞(MPC5)构建足细胞损伤模型。将细胞分为高糖组、高糖+短发夹RNA的阴性对照(sh-NC)组、高糖+干扰LncRNA MEG3表达的短发夹RNA(sh-LncRNA MEG3)组、高糖+sh-LncRNA MEG3+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、高糖+sh-LncRNA MEG3+干扰结节性硬化症复合体1表达的短发夹RNA(sh-TSC1)组和对照组。采用四甲基偶氮唑盐法检测MPC5活性,采用流式细胞术检测MPC5凋亡率,采用实时荧光定量PCR检测LncRNA MEG3相对表达水平,采用Western blot检测自噬相关蛋白[重组人自噬效应蛋白(Beclin-1)、结节性硬化症复合体1(TSC1)、选择性自噬接头蛋白(p62)和微管相关蛋白轻链3(LC3)]表达,采用荧光原位杂交技术检测LncRNA MEG3的表达定位。结果高糖组MPC5活性低于对照组,高糖+sh-NC组MPC5活性低于高糖+sh-LncRNA MEG3组,高糖+sh-LncRNA MEG3+sh-TSC1组、高糖+sh-LncRNA MEG3+3-MA组MPC5活性低于高糖+sh-LncRNA MEG3组(均P<0.01)。高糖组MPC5凋亡率高于对照组,高糖+sh-NC组MPC5凋亡率高于高糖+sh-LncRNA MEG3组,高糖+sh-LncRNA MEG3+sh-TSC1组、高糖+sh-LncRNA MEG3+3-MA组MPC5凋亡率高于高糖+sh-LncRNA MEG3组(均P<0.01)。高糖组MPC5的LncRNA MEG3相对表达水平高于对照组,高糖+sh-NC组MPC5的LncRNA MEG3相对表达水平高于高糖+sh-LncRNA MEG3组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。高糖组LC3、Beclin-1、TSC1蛋白表达低于对照组,p62蛋白表达高于对照组,高糖+sh-LncRNA MEG3组LC3、Beclin-1、TSC1蛋白表达高于高糖+sh-NC组,p62蛋白表达低于高糖+sh-NC组,高糖+sh-LncRNA MEG3+sh-TSC1组TSC1蛋白表达低于高糖+sh-LncRNA MEG3组,高糖+sh-LncRNA MEG3+3-MA组、高糖+sh-LncRNA MEG3+sh-TSC1组的LC3、Beclin-1蛋白表达低于高糖+sh-LncRNA MEG3组,p62蛋白表达高于高糖+sh-LncRNA MEG3组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。高糖+sh-LncRNA MEG3组TSC1蛋白表达高于高糖+sh-NC组,差异有统计学意义(P<0.01)。LncRNA MEG3在细胞核和细胞质中均可表达。结论LncRNA MEG3可通过靶向TSC1介导MPC5自噬,进而减轻糖尿病肾病足细胞损伤程度。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 小鼠肾足细胞 长链非编码RNA母系表达基因3 结节硬化复合1 自噬
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大黄素调控树突状细胞Tsc1/mTORC1通路对Th1/Th2细胞极化治疗脓毒症的影响
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作者 宋珈 张建成 +1 位作者 潘旭鸣 王爱平 《浙江医学》 CAS 2024年第20期2135-2142,共8页
目的探讨大黄素(Emo)调控树突状细胞结节性硬化症复合体1(Tsc1)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)通路对Th1/Th2细胞极化治疗脓毒症的影响。方法将小鼠分对照组、模型组(采用盲肠结扎和穿刺法构建小鼠脓毒症模型)、模型+Emo组;采... 目的探讨大黄素(Emo)调控树突状细胞结节性硬化症复合体1(Tsc1)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)通路对Th1/Th2细胞极化治疗脓毒症的影响。方法将小鼠分对照组、模型组(采用盲肠结扎和穿刺法构建小鼠脓毒症模型)、模型+Emo组;采用脂多糖(LPS)构建树突状细胞(通过小鼠股骨骨髓获取)脓毒症模型,分为对照组、LPS组、LPS+Emo组;采用Transwell构建树突状细胞与CD4^(+)T细胞(通过腹腔灌洗液获取)共培养体系,分为LPS组、LPS+Emo组、LPS+Emo+sh-NC组、LPS+Emo+sh-Tsc1组细胞;采用HE染色观察各组小鼠心、肺、肝组织损伤情况;采用流式细胞术分离CD4^(+)T细胞,以及检测Th1和Th2细胞分化情况;采用ELISA法检测小鼠血清中TNF-α和IL-1β的表达情况以及小鼠脾脏和树突状细胞培养上清液中IL-12和IL-4的表达情况;采用Western blot法检测各组小鼠脾脏和各组树突状细胞中Tsc1和mTORC1信号通路关键蛋白(S6、pS6)的表达情况。结果小鼠体内模型中,与对照组相比,模型组小鼠心、肝、肺显著损伤,脾脏中TNF-α和IL-1β表达显著升高,Th1/Th2细胞比例显著升高,Tsc1蛋白表达显著降低,S6蛋白磷酸化水平显著增高;与模型组相比,模型+Emo组小鼠心、肝、肺组织损伤部分恢复,脾脏中TNF-α和IL-1β表达显著降低,Th1/Th2细胞比例显著降低,Tsc1蛋白表达显著升高,S6蛋白磷酸化水平显著降低。体外树突状细胞模型中,与LPS组相比,LPS+Emo组细胞培养上清液中Tsc1蛋白表达升高,pS6蛋白表达降低,IL-12和IL-4表达显著降低,Th1/Th2细胞比例显著降低;抑制Tcs1表达后,与LPS+Emo+sh-NC组相比,LPS+Emo+sh-Tsc1组细胞培养上清液中IL-12和IL-4表达显著升高,Tsc1蛋白表达降低,pS6蛋白表达升高,Th1/Th2细胞比例显著升高。结论Emo对脓毒症有明显的治疗作用,其作用机制可能为通过调控树突状细胞中Tsc1/mTORC1通路,影响树突状细胞分泌T细胞极化因子IL-12和IL-4,从而影响Th1/Th2细胞极化以治疗脓毒症。 展开更多
关键词 脓毒症 树突状细胞 结节硬化复合1 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1 Th1/Th2细胞极化
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B淋巴细胞及相关细胞因子在骨免疫系统中对破骨细胞分化的作用 被引量:5
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作者 何易祥 赵宇昊 +2 位作者 高昭 赵海燕 王文己 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第29期4709-4714,共6页
背景:作为免疫系统组成中重要的免疫细胞--B淋巴细胞可参与骨代谢过程的调控,对破骨细胞的分化发育发挥着重要的作用。目的:就B淋巴细胞的特征及其对破骨细胞分化过程产生的作用进行综述。方法:以关键词"骨免疫;B细胞;破骨细胞&qu... 背景:作为免疫系统组成中重要的免疫细胞--B淋巴细胞可参与骨代谢过程的调控,对破骨细胞的分化发育发挥着重要的作用。目的:就B淋巴细胞的特征及其对破骨细胞分化过程产生的作用进行综述。方法:以关键词"骨免疫;B细胞;破骨细胞"在CNKI、万方等数据库中检索;以关键词"osteoimmunology;B lymphocyte;osteoclast"在PubMed、Web of Science等数据库中检索。检索自建库至2020年9月发表的相关文献,排除与主题不相关及重复性研究的文献,对最终纳入的58篇文献进行归纳分析。结果与结论:研究认为,体内的多种活性物质在调控免疫细胞分化的同时,也可对成骨细胞及破骨细胞产生调控作用。B细胞可能参与了骨破坏形成,并与疾病的活动度相关。B细胞通过维持RANKL/RANK/OPG通路中各因子的平衡,来维持骨代谢平衡。有多种物质可通过上调或下调B淋巴细胞诱导成熟蛋白1水平,参与破骨细胞的调控。B淋巴细胞可产生自身抗体参与破骨过程,也可通过非抗体依赖途径产生骨破坏效应。在人体内环境中,免疫系统和骨骼系统除了二者的关键细胞直接作用外,也可通过转录因子、细胞因子及相关受体等间接联系,并对二者的发育过程产生相互调节的作用。 展开更多
关键词 骨免疫学 B淋巴细胞 破骨细胞 RANKL/RANK/OPG通路 结节硬化复合1 B淋巴细胞诱导成熟蛋白1
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