两性霉素B产生菌的诱变育种及发酵条件优化

以结节链霉菌Streptomyces nodosus 150802为出发菌株,采用紫外诱变方法进行诱变选育出高产菌株S.nodosus UV-13,运用单因素实验设计方法优化了S.nodosus UV-13发酵生产两性霉素B(AmB)的条件.实验结果表明:紫外诱变最佳照射时间为60s,在此条件下,通过摇瓶初筛和复筛后选育出了一株稳定高产突变株S.nodosus UV-13,其AmB发酵单位为2.46g/L,较原始菌株提高了20.0%,经过传代5代后仍表现出良好的遗传稳定性.单因素实验建立的最优S.nodosus UV-13发酵条件:发酵温度28℃,摇瓶装液量每250mL添加50mL,接种量为6%,发酵周期7d.在此最优发酵条件下,AmB发酵单位达到3.80g/L.

两性霉素B生产菌培养基成分及发酵条件

两性霉素B是多烯类广谱抗真菌抗生素,已广泛应用于深部真菌感染。以结节链霉菌Streptomyces nodosus ZJB15076为出发菌种,对其发酵生产两性霉素B的培养基成分进行了优化,确定了较优的碳源和氮源及最适浓度:质量分数为葡萄糖4.5%、牛肉膏4%;在此基础上继续进行发酵条件的研究,确定了较优的发酵条件:发酵初始p H值为7.0,培养温度为28℃,装液量为40 mL/250 mL,接种量(体积分数)为2%。分析了在摇瓶内添加玻璃珠对两性霉素B产量的影响,研究结果表明,添加玻璃珠后能显著改善菌丝聚集情况并显著提高两性霉素B的产量,产量与对照组相比提高了341.1%,达到4563.2 mg/L。

两性霉素B合成基因簇及其组合生物学进展

两性霉素B(AmB)作为第一个用于深部真菌感染的药物,自上市以来已使用超过半个世纪,目前仍是临床治疗中不可缺少的药物。随着近年来AmB衍生物药物的发展,以及其生产菌株结节链霉菌(Streptomyces nodosus)全基因组和AmB体内合成代谢途径的解析,运用基因工程和代谢工程的方法对AmB组合生物合成的研究逐渐增多。由于AmB在当今临床治疗上的地位仍极其重要,因此促进AmB产业的发展具有显著的经济及社会效益。本文对AmB进行了概述,并对其合成基因簇相关基因及其当前组合生物合成的研究现况进行了总结与探讨。