络石藤与地瓜藤抑制NO活性及差异性化学成分研究

络石藤为药典记载的常用中药,而地瓜藤在民间部分地区用作络石藤。为明确两种药材抗炎活性及相关化学成分间的差异,初步探讨其可能的药效物质基础,该研究通过检测不同浓度络石藤与地瓜藤醇提物对RAW264.7细胞存活率的影响,采用Griess试剂法测定LPS诱导的RAW264.7细胞上清液NO释放量,利用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对络石藤与地瓜藤醇提物中的化学成分进行分析,并结合多元统计学中的OPLS-DA模型鉴定两种药材的差异性化学成分。结果表明:(1)两种药材皆具有一定的NO抑制作用,络石藤粗提物的抑制作用稍强于地瓜藤。(2)络石藤与地瓜藤的化学成分存在明显差异,络石藤中的21个差异性成分主要为木脂素类,而地瓜藤中的10个差异性成分主要为黄酮类。综上认为,差异性化学成分可能是造成这两种药材抗炎活性差异的主要活性物质。该研究结果为络石藤与地瓜藤的抗炎药效物质基础和质量控制提供了理论依据。

基于GEO数据库和网络药理学探讨鸡血藤-络石藤治疗强直性脊柱炎的作用机制

目的联合GEO数据库和网络药理学探讨鸡血藤-络石藤治疗强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)的作用机制。方法采用TCMSP筛选出鸡血藤-络石藤的中药有效成分。检索DrugBank、GeneCards及DisGeNET数据库中关于AS的疾病靶点。从Gene Expression Omnibus(GEO)数据库筛选得到GSE25101的芯片数据集,并借助R软件4.2.2进行差异基因分析后,汇总至AS疾病基因靶点。利用Cytoscape 3.9.1软件构建“中药-有效成分-靶点”网络图,并通过String平台构建蛋白质相互作用网络,筛选得到核心靶点。利用DAVID数据库对交集基因进行富集分析。运用AutoDock Vina软件进行分子对接。结果本研究共筛选得到鸡血藤-络石藤治疗AS的靶点50个,有效成分31个,涉及IL17、TNF、炎症性肠病等多条信号通路。分子对接结果显示,木犀草素、刺芒柄花素等主要成分与CAT、MMP9、TNF、IL6等核心靶点有较好的结合潜力。结论鸡血藤-络石藤可能通过调控炎症反应等基因进而发挥治疗AS的作用。

络石藤治疗类风湿关节炎的作用机制研究

目的:基于网络药理学的研究方法,探讨络石藤治疗类风湿关节炎(RA)的可能作用机制。方法:以口服生物利用度(OB)≥30%、类药性(DL)≥0.18为指标,通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库获取络石藤的活性成分、作用靶点,利用uniprot数据库将相应靶点蛋白转换为标准蛋白基因名。在Disgent数据库中检索“Rheumatoid arthritis”,获取RA疾病靶点运。利用韦恩图,得到药物成分和RA共同靶点,上传至Cytoscape 3.9.1构建“络石藤-化合物-靶点-类风湿关节炎”的网络图,并进行蛋白互作网络分析(PPI网络分析),GO富集和KEGG通路富集分析。结果:获取络石藤9种成分及109个作用靶点,RA疾病2722个相关靶点,络石藤-RA共同靶点57个,GO功能富集分析显示394个生物过程(BP)、41个细胞组成(CC)、70个分子功能(MF)。KEGG通路富集分析显示132条通路。结果:该研究初步揭示了青风藤中以青藤碱为主的6种有效活性成分发挥了抗RA的作用,治疗的关键靶点与AKT1、TP53、TNF、IL6、VEGFA、MMP9、PTGS2等有关。结论:络石藤可能是通过调节AKT1、TP53、TNF、IL6、VEGFA、MMP9、PTGS2等靶点,发挥抑制炎症反应、调节免疫功能及调控细胞凋亡等作用来治疗RA。

络石藤中的三萜类化合物

目的对络石藤中的三萜类化合物进行分离鉴定。方法采用硅胶、反相硅胶、Sephadex LH-20等柱色谱方法进行分离,NM R等波谱学方法进行结构鉴定。结果从络石藤中分离鉴定8个三萜类化合物:络石苷F(tra-che losperos ide F,Ⅰ)、络石苷B-1(trache losperos ide B-1,Ⅱ)、络石苷D-1(trache losperos ide D-1,Ⅲ)、络石苷E-1(trache losperos ide E-1,Ⅳ)、3-βO-D-g lucopyranos ide qu inov ic ac id(Ⅴ)、3β-O--βD-g lucopyrano isde qu inov ic ac id27-O--βD-g lucopyranosy l ester(Ⅵ)、3β-O--βD-g lucopyranos ide c incho lic ac id 27-O--βD-g lucopyranosy l ester(Ⅶ)、络石苷元B(trache losperogen in B,Ⅷ)。结论Ⅰ为新化合物,其余均为首次从该植物中分离得到。

络石藤中黄酮类化学成分研究

目的:研究络石藤中的黄酮类化学成分。方法:采用柱色谱等方法进行分离,NMR等波谱学方法进行结构鉴定。结果:分离鉴定了6个黄酮类化合物:芹菜素(Ⅰ)、芹菜素7-O-β-葡萄糖苷(Ⅱ)、芹菜素7-O-β-新橙皮糖苷(Ⅲ)、木犀草苷(Ⅳ)、柚皮苷(Ⅴ)、芹菜素6,8-二-C-β-D-葡萄糖苷(Ⅵ)。结论:其中化合物Ⅴ、Ⅵ为首次从该植物中分离得到。

络石藤三萜总皂苷抗疲劳作用的实验研究

目的探讨络石藤三萜总皂苷的抗疲劳作用。方法 ICR小鼠72只,随机分成6组。通过小鼠力竭游泳实验制备疲劳模型,络石藤三萜总皂苷以100、200、400 mg/kg的剂量灌胃给药,连续15 d,观察小鼠的体质量变化、负重游泳时间、全血乳酸及血浆尿素氮、丙二醛含量。结果络石藤三萜总皂苷能延长小鼠负重力竭游泳时间,降低定量负荷游泳后全血LD及血浆MDA、BUN含量。结论络石藤三萜总皂苷各剂量组对力竭游泳所致疲劳模型小鼠均有不同程度的抗疲劳作用。

络石藤石油醚萃取部位化学成分的研究

目的研究络石藤80%乙醇提取物的石油醚萃取部位的化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20等柱色谱方法进行分离纯化,运用现代波谱方法和化合物的理化性质鉴定其结构。结果从络石藤醇提物的石油醚萃取部位中分离得到11个化合物,分别鉴定为cycloeucalenol(1),α-香树脂醇(2),羽扇豆醇(3),α-香树脂醇乙酸酯(4),β-香树脂醇乙酸酯(5),α-香树脂醇棕榈酸酯(6),熊果酸(7),豆甾-4-烯-3-酮(8),大黄素(9),棕榈酸(10),β-谷甾醇(11)。结论化合物1、4、6～10为首次从本属植物中分离得到。

中药络石藤的研究进展

目的:对中药络石藤化学成分及其抗风湿作用的研究进展进行综述。方法:查阅国内外最新研究文献,进行归纳、分析与总结。结果:络石藤是一味临床应用较频繁的抗风湿中药,疗效确切,化学成分研究和药理实验研究也取得了一些基础性成果,但其具体的抗风湿活性成分并未被阐明。结论:应用现代药物设计研究方法思路研究络石藤的抗风湿有效成分,将是阐明络石藤药效物质基础的一个可靠有效的手段,并能对抗风湿类新药的研发提供有意义的参考。

紫外分光光度法测定络石藤提取物中的总木脂素含量

目的建立测定络石藤提取物中总木脂素含量的紫外分光光度法。方法利用总木脂素提取物中黄酮类代表成分芹菜素在波长360nm和278nm等吸收的特点,以络石苷为对照品,测定波长278nm,参比波长360nm,测定总木脂素含量。结果以络石苷为对照品,线性回归方程为ΔA=0.0057+9.7033C,r=0.9997,线性关系良好,平均回收率为99.8%,RSD为2.31%,14批络石藤提取物中木脂素平均含量为87.57%。结论本研究建立的方法测定结果准确,操作简便。

中药络石藤及其习用品的DNA条形码鉴定

目的:本研究应用ITS2序列鉴定区分络石藤及其习用品广东络石藤、地瓜藤、薜荔藤和扶芳藤。方法:提取以上5种中药基原植物基因组DNA,扩增不同样品的ITS2序列。采用隐马尔科夫模型HMMer进行序列注释,Clustal W法进行序列比对,K2P模型计算种内和种间遗传距离分析,邻接法和最大似然法构建进化树。结果:5个物种的ITS2序列长度各不相同,在220-243 bp之间。遗传距离分析显示,5个物种的最大种内遗传距离为0.038,最小种间遗传距离为0.113,最大种内遗传距离大于最小种间遗传距离。同时5个物种可以在进化树上区分开来。结论:ITS2序列可以用于中药络石藤及其习用品的分子鉴定,为准确区分该类药材提供新的技术手段。

络石藤的研究现状

络石藤是夹竹桃科植物络石Trachelospermum jasminoides的带叶藤茎,有祛风通络、凉血消肿的功效,治疗风湿热痹等症。络石藤中主要含有黄酮类、木质素类、甾醇类、三萜类、紫罗兰酮衍生物类等物质。本文主要介绍其化学成分的结构及活性,并对其含量分析方法研究进展进行综述。

HPLC法测定络石藤中水杨酸的含量

目的:建立测定中药络石藤中水杨酸含量的高效液相色谱方法。方法:甲醇提取药材,大孔吸附树脂吸附,10%乙醇洗脱,反相高效液相色谱法测定,采用Symmetry C_(18)(150mm×3.9mm,5μm),以甲醇-水-磷酸(60:40:0.04)为流动相,流速1.0ml·min^(-1),检测波长为313nm。结果:水杨酸溶液在20.65～413.00μg·ml^(-1)时与其吸收值呈良好线性关系(r=0.9999),平均加样回收率99.46%,RSD=1.01%。结论:本方法操作简便、快捷,结果准确,适用于络石藤中水杨酸的含量测定。

配伍应用海风藤、络石藤、忍冬藤治疗顽固性过敏性紫癜经验

过敏性紫癜是多种因素引起的系统性血管炎病变,主要累及皮肤、胃肠道、关节和肾脏等多器官。丁樱教授在过敏性紫癜的治疗上善用藤类药物,取其疏风通络、活血养血之功效,配伍使用海风藤、络石藤、忍冬藤三药,临床上取得了显著疗效。

络石藤黄酮类化学成分研究

目的对络石藤中的黄酮类化学成分进行分离鉴定。方法采用硅胶,Sephadex LH-20等柱色谱方法进行分离,光谱和化学方法进行结构鉴定。结果分离鉴定了5个黄酮,分别是:芹菜素(Ⅰ),4′,5,7-三羟基-3′-甲氧基黄酮(Ⅱ),槲皮苷(Ⅲ),大豆苷(Ⅳ),芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅴ)。结论化合物Ⅱ,Ⅲ和IV为从络石属植物中首次分离。

紫外分光光度法测定络石藤中总黄酮含量

目的对中药络石藤中所含总黄酮的含量进行测定。方法采用紫外分光光度法于500nm波长处测定。结果总黄酮在8．4～50、4μg／ml范围内线性关系良好，其回归方程为：A=0．006714C＋0．0706（r=0．9997）；平均加样回收率为96．2％（RSD=1．42％）。结论该方法简便、准确，可用于络石藤的质量控制。

HPLC法测定络石藤中络石苷元的含量

目的建立测定中药络石藤中络石苷元含量的高效液相色谱方法。方法甲醇-水(7∶3)提取药材,经酸水解、碱水解后调pH值为6.0沉淀用甲醇溶解,高效液相色谱法测定,Symmetry C18(3.9 mm×150 mm,5μm),流动相甲醇-水(45∶55),流速0.8 ml.min-1,检测波长280 nm,采用外标法峰面积计算含量。结果络石苷元溶液在5.07～81.12 mg.L-1时与其吸收值呈良好线性关系(r=0.999 7),平均加样回收率为99.76%,RSD=0.83%。结论该方法操作简便、快捷,结果准确、可靠,适用于络石藤中络石苷元的含量测定。

络石藤质量标准研究

目的建立络石藤的质量标准。方法采用TLC法对络石藤中牛蒡子苷元、络石苷元和去甲络石苷元进行了定性鉴别;应用HPLC法对络石藤中络石苷进行了含量测定。结果薄层定性特征明显,专属性强。络石苷在0.20～4.03μg范围内线性关系良好,平均回收率为98.9%。结论鉴别和含量测定方法可行,重现性好,可用于络石藤的质量控制。

中药络石藤的紫外光谱法鉴别

本文报道络石、石血、蔓九节和薜荔不育枝的零阶和一阶紫外吸收光谱鉴别特征,上述四种络石藤的氯仿和水提取液的紫外吸收光谱,不同种间在峰位、谷位、零交点和相邻第一、二强谷的吸收度比值均有显著不同,可作为鉴别依据。

火焰原子吸收法测定中药络石藤茎中六种金属元素的含量

目的：运用火焰原子吸收光谱法测定中药络石藤茎中的Fe、 Zn、 Mg、 Ca、 Cu、 Mn 6种金属元素的含量。方法用浓HNO3-HClO4消解样品，采用标准曲线法测定其6种金属元素含量。结果所测的样品中含有丰富的人体必需微量元素。回收率在99.56％～105.0％之间，样品相对偏差小于5％。结论该法简单、准确，结果令人满意。