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小麦中转基因成分PCR与实时荧光PCR的定性检测低限
被引量:
1
1
作者
白月
栾凤侠
王珣
《麦类作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期199-205,共7页
为了确定小麦转基因成分PCR和实时荧光PCR方法的定性检测低限,将转基因小麦B73与非转基因小麦(检测外源基因)、小麦与大米(检测内源基因)分别进行质量分数配比后提取DNA用于测定相对检测低限,再将100%转基因小麦B73的DNA进行浓度稀释用...
为了确定小麦转基因成分PCR和实时荧光PCR方法的定性检测低限,将转基因小麦B73与非转基因小麦(检测外源基因)、小麦与大米(检测内源基因)分别进行质量分数配比后提取DNA用于测定相对检测低限,再将100%转基因小麦B73的DNA进行浓度稀释用于测定绝对检测低限,并应用已知的NOS、bar、ubiquitin,ui-dA(GUS)外源基因和Wx012、GAG56 D内源基因的引物和探针对模板DNA分别进行PCR与实时荧光PCR扩增。结果表明,最终确定PCR方法检测小麦转基因成分的相对检测低限为0.1%(质量分数),绝对检测低限为0.5 ng/μL;实时荧光PCR方法的相对检测低限为0.1%(质量分数),绝对检测低限为0.01 ng/μL。所确定的检测低限可满足国家对转基因产品的最低标识要求。
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关键词
转基因小麦
PCR
实时荧光PCR
绝对
检测
低
限
相对
检测
低
限
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职称材料
重组酶聚合酶扩增技术快速检测转基因玉米Bt11
被引量:
5
2
作者
刘静
武国干
+5 位作者
吴潇
刘华
王金斌
吕贝贝
蒋玮
唐雪明
《上海农业学报》
CSCD
2018年第1期20-24,共5页
根据外源基因草丁膦乙酰转移酶基因(PAT)与载体骨架连接区序列设计引物,建立了基于重组酶聚合酶扩增技术(RPA)的转基因玉米Bt11特异性快速检测方法。结果表明:该方法可在37℃条件下20 min内完成转基因玉米Bt11的检测,绝对检测限为100拷...
根据外源基因草丁膦乙酰转移酶基因(PAT)与载体骨架连接区序列设计引物,建立了基于重组酶聚合酶扩增技术(RPA)的转基因玉米Bt11特异性快速检测方法。结果表明:该方法可在37℃条件下20 min内完成转基因玉米Bt11的检测,绝对检测限为100拷贝/μL,相对检测限为0.1%。
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关键词
重组酶聚合酶扩增技术
Bt11
特异性
检测
绝对检测限
相对
检测
限
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职称材料
题名
小麦中转基因成分PCR与实时荧光PCR的定性检测低限
被引量:
1
1
作者
白月
栾凤侠
王珣
机构
黑龙江出入境检验检疫局
黑龙江省农业科学院生物技术研究所
出处
《麦类作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期199-205,共7页
基金
国家质检总局科研项目(2004IK084)
科技部2002年度社会公益研究专项重点项目子课题(202DIA50034-03)
国家标准委下达的国家标准制定项目(20071660-T-449)
文摘
为了确定小麦转基因成分PCR和实时荧光PCR方法的定性检测低限,将转基因小麦B73与非转基因小麦(检测外源基因)、小麦与大米(检测内源基因)分别进行质量分数配比后提取DNA用于测定相对检测低限,再将100%转基因小麦B73的DNA进行浓度稀释用于测定绝对检测低限,并应用已知的NOS、bar、ubiquitin,ui-dA(GUS)外源基因和Wx012、GAG56 D内源基因的引物和探针对模板DNA分别进行PCR与实时荧光PCR扩增。结果表明,最终确定PCR方法检测小麦转基因成分的相对检测低限为0.1%(质量分数),绝对检测低限为0.5 ng/μL;实时荧光PCR方法的相对检测低限为0.1%(质量分数),绝对检测低限为0.01 ng/μL。所确定的检测低限可满足国家对转基因产品的最低标识要求。
关键词
转基因小麦
PCR
实时荧光PCR
绝对
检测
低
限
相对
检测
低
限
Keywords
Transgenic wheat
PCR
Realtime PCR
Relative detection limit
Absolute detection limit
分类号
S512.1 [农业科学—作物学]
S330 [农业科学—作物遗传育种]
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职称材料
题名
重组酶聚合酶扩增技术快速检测转基因玉米Bt11
被引量:
5
2
作者
刘静
武国干
吴潇
刘华
王金斌
吕贝贝
蒋玮
唐雪明
机构
上海海洋大学食品学院
上海市农业科学院生物技术研究所
农业部转基因植物环境安全监督检验测试中心(上海)
上海市农业遗传育种重点实验室
出处
《上海农业学报》
CSCD
2018年第1期20-24,共5页
基金
上海市农委科技兴农重点项目(2015-4-3)
上海市科委转基因食品与生物安全检测公共服务平台项目[沪农科攻字(2015)第4-3号]
文摘
根据外源基因草丁膦乙酰转移酶基因(PAT)与载体骨架连接区序列设计引物,建立了基于重组酶聚合酶扩增技术(RPA)的转基因玉米Bt11特异性快速检测方法。结果表明:该方法可在37℃条件下20 min内完成转基因玉米Bt11的检测,绝对检测限为100拷贝/μL,相对检测限为0.1%。
关键词
重组酶聚合酶扩增技术
Bt11
特异性
检测
绝对检测限
相对
检测
限
Keywords
Recombinase polymerase amplification(RPA)
Bt11
Specific detection
Absolute detection limit
Relative detection limit
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
小麦中转基因成分PCR与实时荧光PCR的定性检测低限
白月
栾凤侠
王珣
《麦类作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
下载PDF
职称材料
2
重组酶聚合酶扩增技术快速检测转基因玉米Bt11
刘静
武国干
吴潇
刘华
王金斌
吕贝贝
蒋玮
唐雪明
《上海农业学报》
CSCD
2018
5
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职称材料
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