SPE-HPLC-UV法测定绞股蓝提取物中皂苷的含量

本试验旨在建立固相萃取-高效液相色谱-紫外检测法(SPE-HPLC-UV)对绞股蓝提取物中绞股蓝皂苷XLIX和皂苷A进行定量分析。样品经甲醇提取,采用C_(18)固相萃取柱净化,使用Kinetex C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,2.6μm)分离,流动相乙腈/水,柱温40℃,检测波长203 nm。依照此法测定绞股蓝粗提物中三萜皂苷XLIX和皂苷A的含量。结果表明:2种绞股蓝皂苷在一定质量浓度范围内线性关系良好(r≥0.999),平均回收率为91.38%~98.4%,相对标准偏差为0.69%~2.48%。该方法的灵敏度、准确度和精密度均符合检测技术要求,且简便快速,适用于绞股蓝提取物中绞股蓝皂苷XLIX和皂苷A含量的准确测定。

绞股蓝提取物对小鼠血清CK、LDH和肝糖原、肌糖原含量的影响

为探讨绞股蓝提取物对小鼠抗疲劳能力的影响,将60只SD小鼠随机分为对照组和服药组,通过游泳训练6周后,测定安静状态、力竭后即刻、力竭后24h恢复组小鼠血清的磷酸肌酸(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌、肝糖原等指标.结果表明:绞股蓝组血清CK、LDH显著低于对照组(P<0.05),而肝糖原(LG)、肌糖原(MG)含量显著高于对照组(P<0.05).结论:绞股蓝提取物对骨骼肌和肝细胞膜的正常结构和机能可能具有保护作用,可明显增加肝糖原及肌糖原的含量,有利于延缓小鼠运动性疲劳的发生.

绞股蓝提取物体外对NG-108细胞增殖影响的实验研究

目的研究绞股蓝提取物体外对NG-108细胞增殖作用的影响。方法利用NG-108细胞,采用MTT法直接给药和含药血清法,对绞股蓝水提部位、石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位在体外对NG-108细胞增殖作用进行筛选。结果①MTT直接给药法表明,绞股蓝石油醚、正丁醇和水提取部位对NG-108细胞均有明显的增殖作用(P<0.05或P<0.01);乙酸乙酯部位对NG-108细胞有增殖趋势,但与空白对照组比较无显著性意义。②含药血清法表明,10%绞股蓝正丁醇提取部位含药血清和20%绞股蓝乙酸乙酯提取部位含药血清对NG-108细胞体外生长有促进增殖作用(P<0.05)。结论绞股蓝正丁醇部位的可促进NG-108细胞增殖,提示对NG-108细胞有一定的保护作用。

绞股蓝提取物对自由基清除能力的初步研究

用NBT光还原反应 ,在体外对绞股蓝提取物清除超氧阴离子自由基 (O 2 )的能力进行评价 ,结果显示具有不同口味特征的绞股蓝干草清除O 2 的能力不同 ,以淡味的绞股蓝清除能力最强 ,其叶提取物的清除能力达 74.0 8%。但清除O 2 的能力易受到加热 。

饲料中添加绞股蓝提取物对育肥猪生长性能、免疫机能及经济效益的影响

为评价不同水平绞股蓝提取物添加对育肥猪生长性能、免疫机能及经济效益的影响,试验选择体重相近、健康的三元杂交育肥猪120头,随机分成4组,每组30个重复,每个重复1头,1组为对照组饲喂基础日粮,试验2、3、4组分别在基础日粮中添加1.0%、1.5%、2.0%绞股蓝提取物,预试验7 d,试验期为56 d。结果表明:(1)试验3组平均日增重较1组比提高16.4%(P <0.05),试验2、3、4组平均采食量均高于1组(P> 0.05),试验3组料重比较1组比降低11.8%(P <0.05);(2)试验3、4组血清中IgG、IgA、IL-2的含量较1组比分别提高19.1%、16.8%、13.0%、13.8%、16.6%、14.8%(P <0.05),试验2、3、4组血清中IgM、IL-6含量均高于1组(P> 0.05);(3)试验3、4组猪毛利润最高,分别为579.27、542.78元/头,试验3、4组毛利润较1组比分别提高40.2%、 31.4%。综上,不同水平绞股蓝提取物添加可以提高育肥猪生长性能、免疫机能及经济效益,以1.5%添加为宜。

日粮添加绞股蓝提取物对断奶仔猪生长性能、血液生化、免疫力及抗氧化功能的影响

为研究日粮中添加不同水平的绞股蓝提取物对断奶仔猪生长性能、血液生化指标、免疫力及抗氧化功能的影响,试验选取21日龄体重相近的“杜×长×大”仔猪250头,随机分为5个处理组,每组5个重复,每个重复10头仔猪。对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮,其余4组在基础日粮中分别添加0.5%、1.0%、1.5%、2.0%的绞股蓝提取物。预饲期7 d,正式试验期28 d。结果表明:与对照组相比,1.0%和1.5%绞股蓝提取物组的仔猪试验末重和平均日增重显著提高8.80%、8.16%和17.65%、17.23%(P<0.05);绞股蓝提取物组料重比分别显著降低8.12%、13.20%、13.20%、7.61%(P<0.05),断奶仔猪的腹泻率分别显著降低23.52%、48.52%、59.96%、44.92%(P<0.05)。1.0%和1.5%绞股蓝提取物组的仔猪总胆固醇显著降低15.92%和13.49%(P<0.05);1.0%、1.5%和2.0%绞股蓝提取物组甘油三酯分别显著降低25.00%、30.36%、28.57%(P<0.05);1.0%和1.5%绞股蓝提取物组尿素氮分别显著降低24.91%和25.66%(P<0.05);1.0%、1.5%、2.0%绞股蓝提取物组IgA分别显著提高25.66%、23.89%和28.32%(P<0.05);1.0%和1.5%绞股蓝提取物组IgG分别显著提高52.69%和53.08%(P<0.05);绞股蓝提取物组总抗氧化能力(T-AOC)分别显著提高11.55%、29.35%、25.63%和12.22%(P<0.05);1.0%和1.5%绞股蓝提取物组超氧化物歧化酶(SOD)分别显著提高32.76%和30.70%(P<0.05);1.0%和1.5%绞股蓝提取物组丙二醛(MDA)分别显著降低31.47%和31.20%(P<0.05)。本试验条件下,断奶仔猪日粮中添加1.0%~1.5%剂量的绞股蓝提取物效果较好。

绞股蓝提取物对糖尿病肾病大鼠血液流变学和炎性因子影响的实验研究

目的初步探讨绞股蓝提取物对糖尿病肾病大鼠血液流变学和炎性因子的影响。方法将40只Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、绞股蓝大剂量组(5mg/kg)和小剂量组(2.5mg/kg);模型组、大剂量组和小剂量组大鼠使用腹腔注射链脲佐菌素方法制作糖尿病肾病模型;绞股蓝大小剂量组按照上述剂量给予绞股蓝提取物灌胃,1次/d,持续10周,空白对照组和模型组则给予同剂量蒸馏水灌胃;实验结束时腹主动脉取血检测血液黏度、总胆固醇、三酰甘油及炎症因子。结果绞股蓝提取物可以有效降低糖尿病肾病大鼠血液黏度、血浆黏度及总胆固醇和三酰甘油水平,与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05);同时可明显降低糖尿病肾病大鼠血清TNF-α、IL-6和CRP水平,与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论绞股蓝提取物具有改善糖尿病肾病大鼠血液流变学及微炎症状态的作用,值得进一步研究。

绞股蓝提取物通过调控lncRNA PICSAR对IL-1β诱导软骨细胞损伤的保护作用及机制研究

目的探讨绞股蓝提取物对白介素1β(IL-1β)诱导软骨细胞损伤的作用及分子机制。方法2020年10月—2021年4月于湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院进行实验,将关节软骨细胞随机分为对照(NC)组、IL-1β组及绞股蓝提取物低、中、高剂量组、IL-1β+si-con组、IL-1β+si-lncRNA PICSAR组、pcDNA-con+高剂量组、pcDNA-lncRNA PICSAR+高剂量组,分别对其进行干预水平;用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹(Western-blot)法检测裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleave-caspase-3)蛋白表达水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测lncRNA PICSAR表达水平。结果与NC组比较,IL-1β组细胞活力及SOD、CAT活性降低,凋亡率升高,Cleave-caspase-3表达水平、MDA水平、lncRNA PICSAR表达水平升高(P<0.05)。与IL-1β组比较,绞股蓝提取物低、中、高剂量组,软骨细胞活力及SOD、CAT活性依次升高(F/P=119.735/0.000、5.289/0.002、334.948/0.000),凋亡率、Cleave-caspase-3表达水平、MDA水平、lncRNA PICSAR表达水平依次降低(F/P=430.551/0.000、137.513/0.000、383.769/0.000、254.805/0.000)。与IL-1β+si-con组比较,IL-1β+lncRNA PICSAR组软骨细胞活力升高,Cleave-caspase-3表达水平降低,细胞凋亡率降低,MDA水平降低,SOD和CAT活性升高(t/P=18.317/0.000、14.884/0.000、27.691/0.000、29.684/0.000、25.008/0.000、28.737/0.000)。与pcDNA-con+高剂量组比较,pcDNA-lncRNA PICSAR+高剂量组lncRNA PICSAR表达水平升高,软骨细胞活力降低,Cleave-caspase-3表达水平升高,细胞凋亡率升高,MDA水平升高,SOD和CAT活性降低(t/P=13.349/0.000、14.969/0.000、27.871/0.000、20.234/0.000、24.811/0.000、23.971/0.000)。结论绞股蓝提取物通过下调lncRNA PICSAR抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡和氧化应激,减轻IL-1β诱导的软骨细胞损伤。

高效液相色谱法测定绞股蓝提取物中的皂苷成分

目的建立绞股蓝提取物皂苷成分的高效液相色谱测定法,并测定市场上绞股蓝提取物皂苷含量。方法比较甲醇、乙醇、水做提取溶剂及超声、回流提取方式下的皂苷得率。色谱柱为Waters Synnetry C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm);柱温:35℃;流速1.0 m L/min;检测波长为203 nm。结果以甲醇为溶剂,超声30 min皂苷含量较高。绞股蓝皂苷XLⅨ、绞股蓝皂苷XLⅥ、绞股蓝皂苷A、皂苷XⅦ分别在2.605~130.24μg/mL(r^2=0.9992)、2.205~110.24μg/mL(r^2=0.9995)、1.981~99.04μg/mL(r^2=0.9992)、1.794~89.68μg/m L(r^2=0.9995)范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.5%~100.4%、97.3%~101.4%、98.0%~101.1%及99.1%~100.6%。结论本方法灵敏、准确、专属性强,能准确有效地检测绞股蓝提取物中4种皂苷的含量。

绞股蓝总皂苷及其不同提取物对实验性高血压大鼠的降压作用

目的研究绞股蓝总皂苷和绞股蓝不同提取物对大鼠血压的影响。方法将大鼠分为9组,除空白对照组外,高血压模型组、绞股蓝总皂苷对照组、绞股蓝总皂苷干预组(绞股蓝总皂苷180 mg/kg、360 mg/kg、720 mg/kg,低、中、高剂量组)、总提取物组、乙酸乙酯提取物组和正丁醇提取物组的大鼠均被喂养高脂高糖饲料和饮用糖盐水(糖4%、盐1%)和果糖水(6%)。绞股蓝总皂苷对照组、绞股蓝总皂苷干预组、总提取物组、乙酸乙酯提取物组和正丁醇提取物组的大鼠均给予相应剂量的药物灌胃。给药8周后处死大鼠,测定大鼠血清中一氧化氮(NO)、内皮素(ET)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量。结果与空白对照组相比,高糖高脂饮食能明显使大鼠血压的增高[收缩压增高(34.9±9.8)%,舒张压增高(17.9±8.5)%],差异有统计学意义(P<0.05)。与高血压模型组相比,绞股蓝总皂苷对照组收缩压降低(39.7±6.9)%、舒张压降低(36.7±7.3)%,血压显著性降低(P<0.05)。与空白对照组相比,绞股蓝总皂苷对照组、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组收缩压、舒张压相差不大(P>0.05)。绞股蓝总皂苷明显降低大鼠的血压,同时能显著增加大鼠血清NO含量,降低大鼠血清ET和AngⅡ的含量。结论绞股蓝总皂苷及其乙酸乙酯、正丁醇提取物可预防高糖高脂诱导的大鼠血压的增高。绞股蓝总皂苷可能通过降低ET、AngⅡ含量和升高NO含量来发挥对大鼠的降压作用。

绞股蓝皂苷联合银杏叶提取物对2型糖尿病合并NAFLD大鼠脂肪肝程度的影响

目的观察绞股蓝皂苷(GPS)和银杏叶提取物(GBE)混合物对2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠脂肪肝程度的影响。方法 40只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组、T2DM合并NAFLD模型组,造模周期8周。将T2DM合并NAFLD模型随机分为模型组(给予同等体积的纯净水灌胃)、对照组[给予GPS 0.5 g/(kg·d)灌胃]、治疗组[给予GPS 0.5 g/(kg·d)加GBE0.1 g/(kg·d)灌胃]。继续予高糖高脂饲料,自由饮水;治疗周期为6周;实验周期14周。检测血糖(BS)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、ALT、AST。检测肝组织TG及肝脏病理学。结果空白组、模型组、治疗组、对照组BS水平分别为(5.50±0.51)mmol/L、(18.76±4.20)mmol/L、(10.78±3.38)mmol/L、(14.62±3.32)mmol/L,治疗组、对照组低于模型组(P<0.01),治疗组低于对照组(P<0.01)。空白组、模型组、治疗组、对照组TG水平分别为(0.81±0.11)mmol/L、(1.29±0.14)mmol/L、(0.90±0.09)mmol/L、(1.09±0.10)mmol/L,治疗组、对照组低于模型组(P<0.01),治疗组低于对照组(P<0.05)。空白组、模型组、治疗组、对照组TC水平分别为(1.39±0.13)mmol/L、(3.69±0.27)mmol/L、(2.59±0.19)mmol/L、(3.11±0.18)mmol/L,治疗组、对照组低于模型组(P均<0.01),治疗组低于对照组(P<0.01)。空白组、模型组、治疗组、对照组ALT水平分别为(35.12±3.34)U/L、(60.68±5.12)U/L、(42.13±4.99)U/L、(50.12±4.68)U/L,治疗组、对照组低于模型组(P均<0.01),治疗组低于对照组(P<0.05)。空白组、模型组、治疗组、对照组AST水平分别为(81.15±7.14)U/L、(168.12±10.49)U/L、(112.23±10.12)U/L、(139.12±11.68)U/L,治疗组、对照组低于模型组(P<0.01),治疗组低于对照组(P<0.01)。空白组、模型组、治疗组、对照组肝组织TG水平分别为(30.26±2.48)mg/G、(228.46±8.48)mg/G、(153.12±9.98)mg/G、(196.24±9.78)mg/G,治疗组、对照组低于模型组(P<0.05),治疗组低于对照组(P<0.01)。空白组为正常肝组织,模型组为重度脂肪肝,治疗组和对照组为中-重度脂肪肝,脂肪肝程度治疗组轻于对照组。结论 GPS和GBE混合物通过调整血糖、脂质代谢,减少肝组织TG沉积,保护肝细胞,达到降低T2DM合并NAFLD大鼠模型脂肪肝程度的目的。

绞股蓝正丁醇提取物对快速老化小鼠Aβ蛋白的影响

目的探讨壮药绞股蓝Gynostemma pentaphyllum正丁醇提取物对快速老化SAMP8小鼠淀粉样蛋白(Aβ蛋白)的影响。方法 50只快速老化SAMP8小鼠随机分为模型组、石杉碱甲组[0.15 mg/(kg·d)]和绞股蓝正丁醇提取物高、中、低剂量组[500、250、125 mg/(kg·d)],10只正常老化SAMR1小鼠为正常对照组。灌胃给药8周后,取小鼠血清和脑匀浆,以ELISA法检测其Aβ蛋白的水平,RT-PCR和免疫组织化学法检测App基因和APP蛋白的表达。结果与模型组比较,绞股蓝正丁醇提取物给药组小鼠脑组织中的APP基因表达和蛋白表达明显下调,血清和脑组织中的Aβ蛋白水平显著降低。结论绞股蓝正丁醇提取物可通过抑制APP蛋白的生成,使Aβ蛋白的表达减少,从而起到防治阿尔茨海默症(AD)的作用。

绞股蓝提取物防辐射的小鼠实验研究

目的:研究绞股蓝提取物对60Co射线辐射损伤小鼠的影响。方法:采用健康小鼠作为实验对象,绞股蓝提取物绞股蓝总苷灌胃给药,使用60Co作为辐射源制备辐射损伤模型,采取眼眶取血计数外周血白细胞和淋巴细胞数。取肝组织测定其蛋白质、MDA含量及SOD、GSH活性。观察绞股蓝提取物对辐射小鼠的保护作用。结果:绞股蓝提取物能减轻辐射小鼠白细胞、淋巴细胞数量,减轻辐射对肝脏合成功能的损伤,增加SOD、GSH活性,降低MDA含量。结论:湖南麓山制药出品的绞股蓝提取物—绞股蓝总苷颗粒对辐射损伤的小鼠具有保护作用,其保护机制可能与绞股蓝总苷抗氧化作用有关。

海南绞股蓝甲醇提取物抗心律失常的实验研究

目的:研究海南绞股蓝甲醇提取物对心律失常的作用。方法:分别制作乌头碱、氯化钡和哇巴因引起的心律失常模型;观察其对抗作用。结果:绞股蓝甲醇提取物(SB)能够明显增加引起大鼠室性心律失常的乌头碱用量;显著减少氯化钡所致的双相性室性心律失常的动物个数,明显推迟心律失常的出现时间,综合维持时间,并明显增加引起豚鼠室性心律失常的哇巴因用量。结论:绞股蓝甲醇提取物具有明显的抗心律失常作用。

反相高效液相色谱法测定绞股蓝50%总皂苷提取物中芦丁和槲皮素的含量

目的建立绞股蓝50％总皂苷提取物中芦丁与槲皮素的含量测定方法。方法采用高效液相色谱仪，使用TURNER Kromasil^TN C18色谱2（250mm×4．6mm，5μm），流动相为0．4％磷酸水溶液-甲醇-乙腈进行梯度洗脱，流速为0．5ml·min^-1。检测波长为360nm；柱温为40℃。结果芦丁在0．37～3．70μg范围内有良好的线性关系，r=0．9999。槲皮素在0．05—0．50μg范围内有良好的线性关系，r=0，9999；芦丁的平均加样回收率为99．2％，RSD为1．69％；槲皮素的平均加样回收率为99．1％，RSD为2．21％。结论该方法简便快捷，准确度高。

绞股蓝及山楂提取物的抗衰老作用

目的:观察绞股蓝及山楂提取物对抗衰老大鼠皮肤中超氧化物歧化酶(SOD)活性及羟脯氨酸(HYP)含量的影响,判断绞股蓝及山楂提取物对皮肤抗衰老发挥一定的作用,并进而探讨其混合物抗衰老的机制。方法:大鼠颈背部皮下注射D-半乳糖建立衰老模型,灌胃给予绞股蓝及山楂提取物,检测大鼠皮肤组织中HYP含量以及SOD的活力。结果:绞股蓝及山楂提取物协同提高HYP含量和SOD活力水平。结论:绞股蓝及山楂提取物协同具有显著的抗氧化作用,对大鼠的皮肤衰老有延缓作用。

绞股蓝的国内研究现状

绞股蓝在我国分布广泛,资源丰富。本文综述了近年来国内有关对绞股蓝的植物资源、化学成分和药理作用等的研究概况,提示绞股蓝在医药领域的应用有着广阔的前景。

绞股蓝正丁醇提取物对快速老化小鼠学习记忆的影响及其机制

目的研究绞股蓝正丁醇部位对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠学习记忆的影响。方法采用Morris水迷宫方法对小鼠记忆行为进行检测;采用ELISA法测定SOD、GSH-PX和MDA的含量;采用HE法染色观察对小鼠大脑海马组织的影响。结果绞股蓝正丁醇部位能改善老年痴呆小鼠的学习记忆能力;能促进SOD和GSH-PX生成,抑制MDA的生成。结论绞股蓝正丁醇部位可提高AD小鼠的抗氧化能力,从而起到防治AD的作用。

葛根、山楂、绞股蓝的提取物与红曲米合用降血脂作用研究

目的观察葛根、山楂、绞股蓝的提取物与红曲米合用对实验性高血脂大鼠的降血脂作用效果。方法根据《保健食品检验与评价技术规范》辅助降血脂检测评价方法,将SPF级雄性大鼠(体重180.3~206.4g)随机分为200、400、800mg/kg·bw 3个剂量组、一个模型对照组和一个空白对照组,每组10只。连续灌胃30d后测定血清总胆固醇水平(total cholesterol,TC)、甘油三酯水平(Triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(High-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)。结果高剂量组血清甘油三酯(2.38±1.00)mmol/L和血清总胆固醇(3.08±0.72)mmol/L均显著低于模型对照组(P <0.05或P <0.01);中、高剂量组低密度脂蛋白胆固醇分别为(0.34±0.05)mmol/L、(0.30±0.08)mmol/L,显著低于模型对照组,差异有统计学意义(P <0.05或P <0.01),而各剂量组血清高密度脂蛋白胆固醇与模型对照组比较无显著差异(P>0.05)。结论葛根、山楂、绞股蓝的提取物与红曲米合用具有较好的降血脂作用。

绞股蓝醇提取物对猫脂肪肝综合征脂质代谢的影响

为了研究绞股蓝醇提取物对猫脂肪肝综合征的治疗效果,试验将48例患脂肪肝综合征的猫随机等分成常规治疗组(对照组)和绞股蓝治疗组(试验组)进行治疗,试验前后分别检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)及天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性,总胆红素(T-BIL)、总胆固醇(CHOL)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)的含量,B型超声波检查肝脏脂肪情况,计算肝脏B型超声波积分(LUI)、门静脉内径(PVD)、门静脉流速(PW)。结果表明:与治疗前比较,试验组血清中ALT、AST、ALP活性及T-BIL、TG、CHOL、LDL-C含量都极显著降低(P<0. 01),HDL-C含量极显著升高(P<0. 01),LUI极显著降低(P<0. 01),PVD显著变窄(P<0. 05),PW显著变快(P<0. 05);与对照组治疗后比较,ALT活性、TG、CHOL含量及LUI均显著降低(P<0. 05),ALP活性和T-BIL含量均极显著降低(P<0. 01),试验组疗效评价的总有效率高于对照组。说明绞股蓝醇提取物可以通过护肝降酶,改善肝脏血流状态及血液中脂肪代谢等来治疗猫的脂肪肝综合征。