6种双歧杆菌发酵对绣球菌营养成分及抗氧化活性的影响

以筛选适宜绣球菌发酵并提升营养功效的双歧杆菌菌株为目标,选用6种双歧杆菌分别对绣球菌子实体进行液体发酵。通过测定6种双歧杆菌发酵前后绣球菌菌浆中的pH、总酸、可溶性粗多糖、总氨基酸、总多酚及抗氧化活性等指标,评价选用的双歧杆菌的发酵效果。结果表明,6种供试菌菌株均可在绣球菌菌浆中发酵产酸,其中长双歧杆菌长亚种的发酵物总酸最高,达到83.66 g·kg^(-1),发酵产物的抗氧化活性增幅也最为明显,其DPPH自由基清除率为56.06%,总抗氧化能力为0.66μmol·mL^(-1)。两双歧杆菌可显著提升发酵物中可溶性多糖的含量,相比于对照组其含量可提高74.56%。6种供试菌株均可不同程度提高发酵物中的氨基酸含量,其中青春双歧杆菌发酵产物氨基酸含量提升幅度最高,相对于对照组提高率为24.76%。

绣球菌多糖营养液发酵培养长型双歧杆菌的研究

为探索绣球菌多糖对长型双歧杆菌增殖生长的影响,以绣球菌多糖替代MRS肉汤培养基中的葡萄糖制备成发酵培养长型双歧杆菌的绣球菌多糖营养液,绣球菌多糖的质量浓度设置为0%~1.8%形成7个浓度梯度,同时选取MRS肉汤培养基和PYG液体培养基作为对照,向上述9组培养基接种少量且等量的长型双歧杆菌,发酵培养0、12、24、36、48、72 h,取样测定活性双歧杆菌生长动态变化,考察双歧杆菌在各组培养基中的增殖趋势。结果表明,绣球菌多糖能被长型双歧杆菌分解利用,活菌浓度与培养基中绣球菌多糖质量浓度存在明显的正相关性,当绣球菌多糖质量浓度为0.3%时,发酵原液的活菌峰值数量即可超过10~6CFU/mL,当绣球菌多糖质量浓度为1.0%时,发酵原液的活菌峰值数量超过10~7CFU/mL,其优势在于能够较长时间维持双歧杆菌接近峰值活菌数量水平,具有减缓双歧杆菌衰亡的作用。此项研究为液体发酵法获得更高的双歧杆菌活性菌体数量及保持液态产品较高的活菌数量提供了新材料和新方法。

绣球菌工厂化栽培研究进展

绣球菌是一种珍贵的食(药)用菌,因其含有丰富的β-葡聚糖而受到人们的广泛关注,我国已于2010年实现工厂化栽培。通过对绣球菌工厂化生产工艺参数和技术要点进行综述,并对存在的问题进行分析,为绣球菌工厂化栽培技术改进提供参考。

绣球菌子实体农艺指标动态模拟及三维重建研究

为构建绣球菌子实体工厂化生长模型,揭示绣球菌形态和产量的形成过程,并实现绣球菌子实体三维可视化及表型参数的自动提取,以闽绣1号为材料,开展2次工厂化栽培试验。每隔1 d,手动采集绣球菌子实体农艺指标,并在成熟期获取产量和子实体多视角图像数据。通过SPSS软件分析,建立绣球菌子实体高度、长度、宽度、产量及整个菌包质量等农艺指标随生长天数的模型,模型决定系数范围为0.935~0.995,经检验模型预测效果较好,平均相对误差范围为2.39%~8.09%。然后,以绣球菌子实体的高度、长度、宽度为自变量无损地评估绣球菌生产过程的产量动态变化。最后,基于绣球菌子实体多视角图片数据,实现了绣球菌子实体三维可视化以及子实体高度、长度、宽度、表面积、体积等表型参数的自动提取,三维模型算法计算值与人工测量值或者计算值相比,平均相对误差均小于14%,为绣球菌高通量表型参数自动获取及优良新品种选育提供重要支撑。

绣球菌蛋白涂膜保鲜剂的研制

本研究为研制蛋白质基涂膜保鲜剂,以绣球菌子实体为原料,提取绣球菌蛋白,确定绣球菌蛋白涂膜保鲜剂的配方,并对膜的性能进行了评价;同时以苹果为实验对象进行保鲜实验,通过失重率、呼吸强度、可滴定酸含量等指标评价涂膜剂的保鲜效果。结果表明,以20%绣球菌蛋白 + 2%壳聚糖 + 0.8%的甘油研制的涂膜保鲜剂保鲜效果最好,失重率对比空白处理苹果降低2.56%、呼吸速率降低2.3 mg/(kg∙h),可滴定酸含量增加0.076%。上述涂膜剂可以有效地减少苹果的营养损失,降低失重率,抑制呼吸强度,有望进一步应用于果蔬保鲜。

种植绣球菌效益好

绣球菌又名绣球蕈、对花菌、干巴菌,属担子菌门、伞菌纲、多孔菌目。其子实体中等至大形,由一个粗壮的柄上发出许多分枝,枝端形成无数曲折瓣片,因似巨大的绣球而得名。

响应面优化法在绣球菌液体菌种培养中的应用

为获取生物活性高的绣球菌液体培养菌种,采用响应面优化法对液体培养条件进行了优化,以菌丝生物量为指标,建立了菌丝生物量与培养pH、温度、装瓶量的数据模型,得到了适宜的培养条件,即pH为4.5,培养温度为23.9℃,装液量为114 mL,在此培养条件下,菌丝生物量达5.9 g/L。

绣球菌多糖对铅诱导小鼠肾脏氧化应激和自噬损伤的影响

为研究绣球菌多糖(SLPs)对铅暴露小鼠肾脏毒性作用的缓解效应,并分析同笼饲养模式下缓解效应的传递性,将75只昆明小鼠随机分为5组,分别为空白对照组(NC组)、染铅组(Pb组)、绣球菌多糖组(SLP组)、同笼染铅组(Co-Pb组)和同笼绣球菌多糖组(Co-SLP组),每组15只。Co-Pb组Co-SLP组小鼠饲养在同一笼子里面。和除NC组外,其余小鼠均给予含1 g/L二价铅离子(Pb 2+)的水溶液作为饮用水。SLP组、Co-SLP组小鼠每天灌胃400 mg/kg BW的绣球菌多糖,NC组、Pb组和Co-Pb组灌胃相同体积的生理盐水,每天1次。饲养8周后,全自动生化分析仪检测血浆和肾脏中脂质代谢相关指标;石墨炉原子吸收光谱法检测血液和肾脏中铅含量;光学显微镜观察肾脏组织结构;酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒测定肾脏中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性及谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量;实时荧光定量PCR技术检测肾脏中炎症因子基因白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)及自噬基因自噬效应蛋白1(Beclin1)、微管相关蛋白轻链3-Ⅰ(LC3-Ⅰ)、微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、自噬相关蛋白5(Atg5)、泛素结合蛋白p62(p 62)、溶酶体关联膜蛋白2(Lamp2)的mRNA相对表达量;基因测序技术分析肠道菌群门水平相对丰度。结果显示:与NC组相比,Pb组小鼠血浆中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)与肾脏中TG、TC含量以及血液和肾脏中铅含量均显著升高(P<0.05);肾脏中T-SOD、GSH-Px、CAT活性与GSH含量显著降低(P<0.05),MDA含量显著升高(P<0.05);肾脏组织中可见肾小球萎缩和脂滴的沉积现象;肾脏中炎症因子基因IL-6、IL-1β、TNF-α和自噬基因Beclin1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Atg5、p62、Lamp2 mRNA相对表达量显著上升(P<0.05),而炎症因子基因TGF-β、IL-4、IL-10 mRNA相对表达量显著下降(P<0.05);肠道菌群中厚壁菌门的相对丰度显著升高(P<0.05),拟杆菌门的相对丰度显著降低(P<0.05)。与Pb组相比,SLP组和Co-SLP组小鼠血浆中TC、TG、FFA与肾脏中TG、TC含量以及血液和肾脏中铅含量均显著下降(P<0.05);肾脏中T-SOD、GSH-Px、CAT活性与GSH含量显著升高(P<0.05),MDA含量显著下降(P<0.05);肾脏组织中肾小球萎缩和脂滴的沉积现象明显缓解;肾脏中炎症因子基因IL-6、IL-1β和自噬基因Beclin1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Atg5、p62、Lamp2 mRNA相对表达量显著下降(P<0.05),而炎症因子基因TGF-β、IL-4、IL-10 mRNA相对表达量显著上升(P<0.05);肠道菌群中厚壁菌门的相对丰度显著下降(P<0.05),拟杆菌门的相对丰度显著升高(P<0.05)。Co-Pb组与Pb组比较,血浆TC、TG含量以及血液和肾脏中铅含量均显著下降(P<0.05),肾脏中T-SOD、CAT活性与GSH含量显著升高(P<0.05);肾脏组织中可见肾小球萎缩和脂滴沉积现象明显缓解;肾脏中炎症因子基因TGF-β、IL-4、IL-10和自噬基因Beclin1、p 62 mRNA相对表达量显著下降(P<0.05);肠道菌群中厚壁菌门的相对丰度显著下降(P<0.05)。由此可见,绣球菌多糖可以降低铅暴露小鼠血液和肾脏中铅含量、调节脂质代谢,并通过缓解氧化应激、调节炎症反应和抑制自噬损伤来缓解铅暴露导致的肾脏损伤,且还可以通过同笼饲养来传递这种保护作用。

绣球菌浓缩液抑制黑色素合成和抗氧化活性研究

目的探究绣球菌浓缩液(concentrated Sparassis crispa extract,SCE)对黑色素合成和氧化损伤成纤维细胞的影响。方法以酵母β-葡聚糖为对照,通过检测酪氨酸酶酶活抑制率、黑色素瘤B16细胞内黑色素产生、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率及人成纤维细胞存活率、细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和细胞合成胶原蛋白、弹性蛋白的浓度,探讨SCE抑制黑色素合成和成纤维细胞氧化损伤的保护作用。结果在本研究的测试浓度范围内,SCE对酪氨酸酶活性抑制率为35.0%~79.4%,对黑色素瘤B16细胞黑色素产生抑制率为24.6%~52.1%,并表现出浓度依赖性。同时,SCE能有效清除DPPH自由基,对H_(2)O_(2)诱导的人成纤维细胞凋亡具有保护作用,并可降低细胞内ROS水平;与模型组比较,SCE在10~100μg/mL范围内对成纤维细胞合成Ⅲ型胶原蛋白提高了67%~79%、弹性蛋白合成提高了124%~199%,且效果优于酵母β-葡聚糖。结论SCE具有抑制黑色素合成、保护氧化损伤成纤维细胞和提高成纤维细胞合成胶原蛋白、弹性蛋白的作用,这为其应用于美容功能食品提供依据。

绣球菌–枸杞复合饮料的研制

绣球菌与枸杞都是药食同源性食物,二者都具有丰富的营养功效。本研究以绣球菌和枸杞为主要原料,辅以蜂蜜、柠檬酸等,根据复合饮料的一系列加工工艺,对绣球菌–枸杞复合饮料的配方工艺进行了优化,目的在于结合两者的诸多营养价值和功效,研制出一款营养价值高、口感好的复合饮料。研究方法主要采用单因素和正交试验,以感官评价值为考察指标,进行复合饮料的配方优化。研究结果显示,通过测定总糖含量和沉淀率分别得到了绣球菌的制汁工艺为浸提温度60℃,浸提时间90 min。枸杞汁的澄清条件为:果胶酶0.1%、澄清温度50℃、时间3 h。绣球菌–枸杞复合饮料的最佳配方为:绣球菌汁与枸杞汁的体积比(V/V)为3:1、蜂蜜添加量为8%、柠檬酸添加量为0.06%。在此条件下得出的复合饮料,通过感官评定评分标准得出感官评分为86,同时具有绣球菌特有的鲜味和枸杞的香味。成功结合了两者的营养功效,滋味酸甜爽口,口感细腻爽滑。

绣球菌多糖粗提物对小鼠抗疲劳作用的研究

为研究绣球菌多糖对小鼠抗疲劳能力的作用,将小鼠分成4个试验组,分别为对照组(生理盐水)、绣球菌多糖低剂量组(100 mg/kg)、中剂量组(200 mg/kg)和高剂量组(400 mg/kg),连续灌胃32 d。绣球菌多糖低、中、高剂量组分别与对照组比较,分析小鼠抗疲劳相关数据。结果表明:绣球菌多糖中、高剂量组小鼠爬杆力竭时间比对照组均显著增加(P<0.05);绣球菌多糖低、中、高剂量组小鼠跑台力竭时间比对照组均极显著增加(P<0.01);绣球菌多糖低、中、高剂量组小鼠负重游泳力竭时间比对照组均显著增加(P<0.05);力竭运动后绣球菌多糖剂量组与对照组相比糖原含量增加(P<0.01),乳酸含量降低(P<0.01),表明绣球菌多糖对机体运动具有一定的抗疲劳作用。

绣球菌冻干片对S180荷瘤小鼠抗肿瘤作用

目的:为探究绣球菌冻干片对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及机理。方法:选择破壁灵芝孢子粉和茯苓多糖口服液作为阳性对照,将50只S180荷瘤小鼠随机分为模型组(Model)、破壁灵芝孢子粉组(Ganoderma lucidum Spore Powder,GS)、茯苓多糖组(Poria cocos Polysaccharides,PCP)、绣球菌低剂量组[0.31 g/(kg·d),Sparassis crispa Low-Dose Group,SCL]和绣球菌高剂量组[0.62 g/(kg·d),Sparassis crispa High-Dose Group,SCH],连续灌胃样品18 d,测定小鼠体重、肿瘤重量和体积,检测脏器指数、白细胞计数、细胞因子(IL-2、IL-6、IL-8和TNF-α)浓度、脾淋巴细胞增殖活性、自然杀伤(Natural killer,NK)细胞活性和结肠内容物中短链脂肪酸(Short Chain Fatty Acids,SCFAs)水平,并分析瘤体指数与免疫功能指标的相关性。结果:GS、PCP、SCL和SCH的肿瘤抑制率分别为52.2%、36.7%、37.4%和49.0%,3种试验样品均可提高荷瘤小鼠胸腺指数、促进IL-2和TNF-α分泌、增强脾淋巴细胞增殖活性和NK细胞杀伤活性,且绣球菌冻干片高剂量优于低剂量,但3种样品对荷瘤小鼠结肠内SCFAs浓度无明显影响。Pearson相关性分析发现瘤体指数与IL-2、TNF-α水平负相关(P<0.05)。结论:绣球菌冻干片抑制S180肿瘤作用可能是通过非SCFAs依赖途径的增强小鼠细胞免疫和体液免疫功能实现。

嗜水气单胞菌脂多糖及绣球菌多糖对泥鳅免疫功能及消化功能的影响

以灭活的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)脂多糖和绣球菌(Sparasis crispa)多糖作为免疫增强剂,对接种免疫后的泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)进行抗氧化性能、免疫功能及消化功能等指标进行测定。结果表明:嗜水气单胞菌脂多糖和绣球菌多糖不仅可以提高泥鳅的抗氧化性能和免疫功能,而且可以增强泥鳅的消化功能,质量浓度为1g/L的灭活嗜水气单胞菌脂多糖和9g/L的绣球菌多糖对泥鳅的作用效果较明显,能较明显地提高泥鳅抗氧化性能、免疫功能及消化功能,与注射灭活的嗜水气单胞菌脂多糖相比,9g/L绣球菌多糖对泥鳅的作用时间更持久。

绣球菌子实体营养成分分析

绣球菌[Sparassis crispa（Wulf．）Fr．]又名绣球蘑、属担子菌亚门（Basidiomycotina）、异隔担子菌纲（Heteroba—sidiomycetes）、无隔担子菌亚纲（Holobasidi—omycetidae）、无褶菌目（Aphyllophorales）、绣球菌科（Sparassi—daceae）。该属全世界目前只发现1个种，即绣球菌，其子实体肉质洁白细嫩，鲜美可口，营养丰富，是一种珍贵的食用菌。

珍稀食用菌绣球菌液体发酵工艺条件优化

为研究绣球菌最适的液体发酵条件,同时保证其多糖的产量,以绣球菌菌丝干重和胞外多糖(EPS)产量为评价指标,采用单因素和正交试验L9(34)优化绣球菌液体发酵工艺。结果表明,最佳液体发酵工艺条件为:碳源为葡萄糖,氮源为蛋白胨,无机盐为硫酸镁,pH值5.5,C/N=20/1,培养温度27℃,此工艺条件下菌丝干重和EPS产量最高,分别为1.5 g·L^(-1)和2.87 mg·L^(-1)。本研究结果为绣球菌后续的相关研究提供了理论依据。

不同光质光量对绣球菌菌丝生长及原基形成的影响

探讨白、红、黄、绿、蓝光5种不同光质光量对绣球菌菌丝、原基形成的影响,结果表明,红光对菌丝生长最为有利,最适光照强度为200lx,菌丝生长速度为1.32mm.d–1,菌丝长势最好;黄光对原基形成有较强的诱导作用,当光照强度为400lx,原基生长周期最短,形成率高,出菇同步性好。

碳源和氮源对绣球菌菌丝生长的影响

采用平板培养方法研究了碳源、氮源对绣球菌(Sparassis crispa)菌丝生长的影响,并用二元二次正交回归实验对绣球菌的母种培养基配方进行优化。结果表明,适宜绣球菌菌丝生长的最佳碳氮源为葡萄糖和鱼粉蛋白胨,优化后的母种培养基配方为:马铃薯20%,葡萄糖2.10%,鱼粉蛋白胨0.32%,琼脂2%。

绣球菌蛋白质的营养评价

采用国际上通用的营养评价方法,对绣球菌[Sparassis crispa(Wulf.)Fr.]子实体进行了蛋白质营养价值评价。结果为绣球菌子实体的粗蛋白质含量为12.9%,氨基酸总量为9.33%,其中必需氨基酸含量占氨基酸总量的33.9%。绣球菌的赖氨酸为第一限制氨基酸,苏氨酸相对过剩。绣球菌子实体蛋白质的化学评分(CS)、氨基酸评价(AAS)、必需氨基酸指数(EAAI)、生物价(BV)、营养指数(NI)和氨基酸比值系数分(SRCAA)分别为80.9,87.3,78.3,73.6,10.1和87.9。绣球菌的营养价值高于松口蘑(Tricholoma matsutake)和茶树菇(A-grocybe aegerita)。因此,绣球菌子实体是良好的菌类蛋白源。

绣球菌生物学特性若干问题的研究

绣球菌菌丝在蛋白胨培养基中生长最佳,硫酸铵、尿素、复合肥对菌丝生长有抑制作用。选用基础培养基或在基础培养基中添加0.3%蛋白胨作为绣球菌母种培养基较为合适。栽培料中添加淀粉可促进绣球菌的生长,接种50d后观察发现,添加新鲜去皮马铃薯块比马铃薯淀粉效果好,前者100%菌袋出现原基,后者只有50%菌袋出现原基,且原基正处在胶质片时期。添加大米淀粉,小麦淀粉效果与马铃薯块接近,甘薯淀粉与马铃薯淀粉效果接近。

响应面法优化绣球菌多糖脱色工艺研究

利用弱酸性离子树脂HZ-830对绣球菌多糖进行脱色,通过Box-Benhnken中心组合试验和响应面分析法,在前期单因素试验基础上,以脱色温度、脱色pH和脱色时间为自变量,脱色率为响应值,将HZ-830树脂对绣球菌多糖的脱色工艺进行优化。优化后确定的最佳脱色工艺条件为:脱色温度(A)=41℃,pH(B)=8,脱色时间(C)=3.5h,平均脱色率为87.73%。