续断丹加骨碎补对激素性股骨头坏死兔骨组织及PI3K/Akt信号通路的影响

目的观察续断丹加骨碎补(DPRD)对激素性股骨头坏死(SANFH)兔的治疗作用及其机制。方法24只2.5~3.0 kg普通级4周龄健康雄性新西兰兔,随机数字表法分为空白组、模型组、DPRD低剂量组(L组)和DPRD高剂量组(H组),每组6只。模型组、L组及H组通过注射大肠埃希菌内毒素联合糖皮质激素进行造模,6周后行MRI检测评定造模结果。造模成功后,空白组和模型组每天采用5 ml/kg生理盐水灌胃,L组及H组分别予以2.5、5.0 ml/kg的DPRD汤剂灌胃。干预6周后进行MRI检测,随后处死动物,取出兔股骨头。免疫组织化学、Western blot检测各组兔股骨头中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、丝苏氨酸蛋白激酶(Akt)、磷酸化蛋白激酶(P-Akt)、人叉头框蛋白O1(FOXO1)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平。结果造模6周后MRI发现模型组、L组和H组造模兔股骨头出现塌陷,扁平症状,股骨头内出现线性或圆形高信号影。DPRD干预6周后,MRI发现DPRD能有效改善模型兔股骨头坏死情况。Western blot及免疫组织化学检测结果显示,与空白组比较,模型组PI3K、Akt、P-Akt的表达水平增高,FOXO1的表达水平降低(P<0.05);与模型组比较,L组及H组PI3K、Akt、P-Akt的表达水平降低,FOXO1的表达水平显著升高(P<0.05);与L组比较,H组P13K、P-AKT、FOXO1的表达水平升高(P<0.05),L组与H组Akt表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。此外,与空白组比较,模型组Akt、P-Akt的表达水平升高,VEGF的表达水平下降(P<0.05);与模型组比较,L组及H组AKT、P-AKT的表达水平下降,VEGF的表达水平提升(P<0.05);L组与H组的Akt、P-Akt、VEGF比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论DPRD通过调控PI3K/Akt通路,增加FOXO1、激素性股骨头坏死VEGF等因子的表达,逆转了糖皮质激素的作用。