水稻维生素B_1合成相关基因OsTHIC的功能研究

【目的】维生素B_(1)(vitamin B_(1), VB_(1))是生物所必需的微量元素,其作为多个酶的辅因子,参与重要的细胞代谢途径,而水稻中维生素B_(1)合成途径还有待深入研究。本研究旨在解析水稻维生素B_(1)合成相关基因OsTHIC的生物学功能。【方法】综合运用诱变技术、色素测定、Mutmap+、基因编辑及非靶向代谢组分析等手段克隆目的基因并解析其功能。【结果】从EMS诱变的水稻突变体库中发现一个心叶白化致死突变体wll1(white leaf and lethal 1)。wll1从四叶期开始出现心叶白化表型,白化表型逐渐扩展到其他叶片并导致幼苗死亡。与野生型相比,wll1的叶绿素含量与类胡萝卜素含量显著降低。利用Mutmap+及基因编辑技术,确定目的基因为维生素B_(1)合成相关基因OsTHIC。OsTHIC在叶片具有较高表达量,OsTHIC蛋白定位于叶绿体。wll1及OsTHIC的敲除突变体中维生素B_(1)含量均显著低于野生型,外施维生素B_(1)可以恢复wll1的突变表型。外施维生素B_(1)及OsTHIC突变均会影响维生素B_(1)合成相关基因的表达。非靶向代谢组测序分析表明,野生型与wll1差异代谢物在氨基酸的生物合成、辅因子的生物合成、ABC转运器及氨酰基-tRNA的生物合成等方面显著富集。【结论】OsTHIC通过调控维生素B_(1)含量,参与氨基酸合成等代谢过程,在水稻生长发育过程中发挥重要作用。

维生素B_1的镇痛作用

本研究中,作者将维生素B_1注入大鼠侧脑室或腹腔,均表现出镇痛作用。此镇痛作用可被由外周或中枢注入的纳洛酮所对抗,说明维生素B_1的镇痛作用与中枢和外周存在的阿片受体的结合有关。

中药生柿楴汤与维生素B_1穴位注射对肿瘤患者顽固性呃逆的疗效评价

目的:评价中药生柿楴汤与维生素B_1(VB_1)内关穴穴位注射对肿瘤患者顽固性呃逆的疗效。方法:选取2012年8月—2013年8月间收治的肿瘤顽固性呃逆患者80例,将其随机分为对照组和观察组,每组40例;对照组给予口服中药生柿楴汤治疗,观察组患者在对照组基础上再给予VB_1内关穴位注射治疗,评价两组患者治疗7 d后的总有效率,以及治疗后首次呃逆消失时间和再发作时间。结果:观察组患者治疗后的总有效率为87.50%高于对照组为85.00%(P>0.05);观察组患者治疗后首次呃逆消失时间为(0.386±0.023)h短于对照组为(0.523±0.052)h(P<0.05),呃逆中止首次再发作时间为(6.31±1.39)h优于对照组为(4.38±1.34)h(P<0.05)。结论:采用中药生柿楴汤与穴位注射VB_1治疗肿瘤患者顽固性呃逆的疗效与单用中药生柿楴汤的疗效相当,但联合治疗起效更快,药效长。

HPLC法测定多维元素胶囊(15)中烟酰胺、维生素B_1、维生素B_2、维生素B_6的含量

目的:建立高效液相色谱法测定多维元素胶囊(15)中的烟酰胺、维生素B_1、维生素B_2、维生素B_6的含量。方法:采用Boston Green ODS C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:庚烷磺酸钠溶液(取庚烷磺酸钠0.941 g,加冰乙酸10 ml,加水1000 ml溶解,用NaOH试液调节pH至3.8)-甲醇(70:30);进样量:20μl;检测波长为280 nm;柱温:30℃;流速1.0ml·min^(-1)。结果:烟酰胺、维生素B_1、维生素B_2、维生素B_6分别在38.83～349.44,9.88～88.94,4.03～36.25,3.97～35.77μg·ml^(-1)范围内线性关系良好(r≥0.999 6);平均回收率分别为98.7%(RSD=0.89%),98.7%(RSD=1.03%),99.0%(RSD=1.03%),99.8%(RSD=1.49%)。结论:该方法准确,灵敏度高,重复性好,可作为多维元素胶囊(15)的质量控制方法之一。

维生素B_1中间体合成路线的优化

本文针对维生素B_1的关键中间体2-甲基-4氨基-5甲酰胺甲基嘧啶传统合成工艺中存在的问题进行优化,经试验探究寻求到了具有较高工业应用价值的合成路线:以丙烯腈为原料,利用新型的功能离子液作催化剂,在室温下与氨高产率加成,再与甲醇钠"一锅化"生成烯醇钠盐,最后与盐酸乙脒在氯化锌催化下直接环合生成目标产物,无需使用致癌物质和进行昂贵的衍生反应,总收率70%。该路线步骤简单、条件温和、经济、环保。

高效液相色谱串联质谱法测定大米中维生素B_1含量

建立高效液相色谱串联质谱仪测定大米中维生素B_1含量的方法,并采用多反应监测(MRM)模式分析。结果发现,分析时间小于10 min,线性关系较好(r≥0.9997),检出限为0.02 ug/L,高、中、低3个浓度加标样品加标回收率在90%~97%,相对标准偏差<3。同时,测定了兴安盟地区9种大米的维生素B_1含量。

以“维生素B_(1)质量分析”为例探索药物分析实验教学改革

以药物分析综合性实验《维生素B_(1)原料药及片剂的质量研究》为例,将新教学模式应用于药物分析综合实验项目,参照药物质量控制研究岗位的工作特点把项目培养方案与该岗位的职业需求相对接,设置岗位情景、明确岗位目标、增加岗位实例。最终提高学生的岗位适应能力和职业技能。以此,培养具备专业基础扎实、严格控制药品质量、具有良好药学职业道德的综合型药学人才。

同时测定复方四维女贞子胶囊中维生素B_(1)和维生素B_(6)的含量

目的:建立高效液相色谱法测定复方四维女贞子胶囊中维生素B_(1)和维生素B_(6)的含量。方法:采用C 18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-庚烷磺酸钠溶液(0.32 g庚烷磺酸钠,加水800 mL溶解,加三乙胺2 mL,冰醋酸10 mL,加水稀释至1000 mL)(体积比7∶93)为流动相,流速:1.0 mL/min,检测波长:274 nm,柱温为40℃,进样体积10μL。结果:维生素B_(1)在0.4988~99.76μg范围内线性关系良好,回归方程Y=12976x-2190.4(R 2=1);维生素B_(6)在0.4822~96.44μg范围内线性关系良好,回归方程Y=11071x+1567(R 2=1);维生素B_(1)回收率为100.76%(n=9),RSD为0.7%;维生素B_(6)回收率为99.51%(n=9),RSD为0.8%。结论:该方法简便、快速、准确,为复方四维女贞子胶囊中维生素B_(1)和维生素B_(6)的含量测定提供了科学的测定方法。

植物维生素B_(1)生物合成及生物强化的研究进展

维生素B_(1)是所有生物所必需的微量元素,其作为多个酶的辅因子,参与重要的细胞代谢途径。人体缺乏维生素B_(1)会增加罹患心血管及神经失调性疾病的风险。与植物和微生物不同,人类和其他动物不能从头合成维生素B_(1),必须从饮食中获取。因此,研究植物中维生素的生物合成途径,并在此基础上对植物中的维生素B_(1)含量进行生物强化具有重要意义。维生素B_(1)合成途径中有许多酶的参与,如嘧啶合成酶(THIC)、噻唑合成酶(THI1)、硫胺素磷酸合成酶(TH1)、硫胺素单磷酸酶(TH2)和硫胺素焦磷酸激酶(TPK)等。结合相关研究,对维生素B_(1)在植物中的生物学功能、生物合成途径及合成相关基因的功能进行总结,并介绍了通过代谢工程实现生物强化的研究进展,以期为进一步提高植物中维生素B_(1)含量提供参考。

日粮中维生素B_(1)的水平对赛马生长性能、运动性能和血清生化指标的影响

文章旨在研究日粮中维生素B_(1)的水平对赛马生长性能、运动性能和血清生化指标的影响。试验将15匹6月龄、体重(127.69±10.23)kg的健康赛马随机分为试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组,上述马匹均每日饲喂相同营养水平的日粮,并分别添加0、10、20mg维生素B_(1),进行为期30d的饲养试验,结果表明,三组马驹末重无显著差异(P>0.05);试验Ⅲ组平均日增重相对较高,但无显著差异(P>0.05);其中试验Ⅲ组末重较试验Ⅰ组、试验Ⅱ组分别提高12.75%、7.46%,但纳入研究的三组马驹在平均日采食量方面未见统计学差异(P>0.05);在研究的第30天,试验Ⅲ组马驹800m平均速度高于试验Ⅰ组、试验Ⅱ组(P<0.05);各组马驹血清生化指标均随日龄增加而降低,在正式试验第0天,三组血浆生化指标之间均无显著差异(P>0.05);试验第30天,试验Ⅲ组马驹各项血清生化指标高于其他两组,但此差异不显著(P>0.05)。对健康赛马补喂维生素B_(1)能促进赛马生长,改善血液生化指标,有利于促进赛马运动性能的提升。

HPLC-DAD法测定草鱼肉质中的维生素B_(1)和维生素B_(12)的含量

本文建立了高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-DAD)同时分离检测草鱼肉质中维生素B_(1)和维生素B_(12)的方法。草鱼样品经过酸消化和酶提取后释放出样品中蛋白结合和磷酸化的维生素B_(1)和维生素B_(12),再经固相萃取净化,结合HPLC-DAD对两种目标物进行检测。考察了高效液相色谱条件中流动相组成对分离效果的影响及固相萃取条件中样品溶液pH和洗脱剂对样品回收率的影响。采用HLB固相萃取柱对草鱼样品进行净化,甲醇/水(v/v=1/1)混合液洗脱维生素B_(1)和维生素B_(12)。色谱流动相分别为85%甲醇和50 mmol/L磷酸二氢钠(pH 3.00,含5 mmol/L己烷磺酸),进行梯度洗脱,柱温为40℃,检测波长为255 nm,进样体积为20µL,维生素B_(1)和B_(12)可在15 min内分离。在最佳分离检测条件下,维生素B_(1)和B_(12)的检出限(S/N=3)为0.21~0.36µg/mL,加标回收率为83.9%~95.1%。本文建立的方法可对草鱼肉质中维生素B_(1)和维生素B_(12)含量进行准确定量。

维生素B_(1)联合肠内营养治疗重症脑卒中的效果

目的探讨维生素B_(1)与肠内营养联合治疗重症脑卒中的临床效果。方法选取2022年1月至2023年10月萍乡市人民医院收治的80例重症脑卒中患者作为研究对象,按照随机数字表法分为研究组和对照组,各40例。对照组采用肠内营养治疗,在此基础上研究组加用维生素B1治疗。比较两组治疗前后营养指标[总蛋白(TP)、血红蛋白(Hb)、白蛋白(ALB)],免疫功能指标[免疫球蛋白(Ig)A、IgG、IgM],预后情况。结果治疗后两组TP、Hb水平低于本组治疗前,且研究组TP、Hb水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后研究组MDA、SOD水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组IgA、IgG及IgM水平低于本组治疗前,且研究组IgA、IgG及IgM水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组预后良好的占比(47.50%)高于对照组(15.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论维生素B1和肠内营养的联合应用在重症脑卒中的治疗中显示出潜在的益处,可能通过改善营养指标、增强免疫应答来促进患者的恢复。

高精料日粮中添加维生素B_(1)和丙酸钙对牦牛生长性能、瘤胃发酵和血清激素水平的影响

文章旨在探究高精料日粮中添加维生素B_(1)和丙酸钙对牦牛生长性能、瘤胃发酵和血清激素水平的影响。试验将120头(189.46±13.31)kg健康的公牦牛随机分为6组,每组5个重复,每个重复4头牛。基础日粮精粗比为65∶35,试验1~6组分别在基础日粮基础上组合添加50、150和300 mg/kg维生素B_(1)和2%、4%的丙酸钙。试验为期52 d,包括7 d预饲期和45 d正试期。结果表明:与试验组1相比,试验组5和6牦牛的平均日增重(ADG)分别显著提高3.37%和2.94%(P<0.05);平均日采食量(ADFI)分别显著提高2.46%和2.15%(P<0.05);此外,各试验组牦牛末重和料重比均无显著差异(P>0.05)。试验组5和6的牦牛瘤胃pH显著高于其他各组(P<0.05);试验组5和6的微生物蛋白质(MCP)含量较其他各组显著提高(P<0.05);总挥发性脂肪酸(T-VFA)和丙酸含量显著降低(P<0.05);不同维生素B_(1)和丙酸钙梯度组合对牦牛瘤胃NH_(3)-N、乙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸含量均无显著影响(P>0.05)。试验组4、5和6牦牛血清胰岛素样生长因子(IGF-1)含量显著高于其他各组(P<0.05);试验组5和6组牦牛血清胰岛素(INS)含量较其他各组显著提高(P<0.05);试验组4、5和6牦牛血清生长激素(GH)含量较其他各组显著提高(P<0.05);不同维生素B_(1)和丙酸钙梯度组合对牦牛血清皮质醇(Cort)和胰高血糖素(GN)含量均无显著影响(P>0.05)。结论:150或300 mg/kg的维生素B_(1)及4%的丙酸钙组合对高精料牦牛的饲喂效果最佳。

两种方法测定饲料添加剂硝酸硫胺(维生素B_(1))含量的比较

分析比较了硅钨酸沉淀法和电位滴定法在硝酸硫胺(维生素B_(1))含量测定上的差异,以期为实际检测工作提供参考。分别用两种方法在0、3、6、9、12、18、24、36 d后测定硝酸硫胺含量,硅钨酸沉淀法的RSD为0.1%,电位滴定法的RSD为0.1%,两种方法的稳定性均良好。分别采用两种方法测定3个企业不同批次的样品42个,硝酸硫胺含量(干基计)硅钨酸沉淀法与电位滴定法均在98.0%~101.0%;硅钨酸沉淀法与电位滴定法两次独立测定结果的绝对差值均小于0.4%,两种方法测定结果差异不显著(P>0.05)。硅钨酸沉淀法耗时长,操作步骤多,但使用试剂和仪器更易得;电位滴定法操作简便快速,准确度高,精密度好,但考虑到饲料企业实际状况和我国对乙酸酐的管制状况,电位滴定法更适用于有条件的生产商、使用方、检验机构使用。

高效液相色谱-荧光法测定饲料中维生素B_(1)和维生素B_(2)

为建立以高效液相色谱-荧光法测定饲料中维生素B_(1)和维生素B_(2)的分析方法,实验通过高温高压法对饲料进行前处理,而后衍生,以乙酸钠-甲醇为流动相,分别在不同波长下对维生素B_(1)和B_(2)进行测定。结果显示:维生素B_(1)和维生素B_(2)在0.03~5.00μg/mL线性范围内,相关系数R均大于0.9999;加标回收率为92.7%~98.1%;维生素B_(1)和维生素B_(2)的检出限分别为0.04、0.06 mg/kg,定量限分别为0.15、0.18 mg/kg。本方法对饲料中维生素B_(1)和维生素B_(2)的测定,具有便捷、准确的优势。

穴位敷贴联合维生素B_(1)肌内注射治疗在剖宫产术后肠胀气患者中的应用效果

目的探讨穴位敷贴联合维生素B_(1)肌内注射治疗在剖宫产术后肠胀气患者中的应用效果。方法选取2022年10月至2023年10月于上饶市妇幼保健院行剖宫产术后发生肠胀气的70例患者作为研究对象,采用随机数字表法将其分为对照组与观察组,每组各35例。对照组采用维生素B_(1)治疗,观察组采用维生素B_(1)联合穴位敷贴治疗。比较两组患者的症状改善时间、腹胀情况、肠胀气症状评分、焦虑程度[汉密尔顿焦虑情绪量表(HAMA)]、疼痛程度[视觉模拟评分量表(VAS)]、生活质量。结果观察组的肠鸣音恢复时间、肛门首次排气时间、首次排便时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗后的腹胀情况优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗前的肠胀气症状评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组治疗后的腹痛、腹胀、恶心呕吐症状评分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前的HAMA、VAS评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组治疗后的HAMA、VAS评分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者治疗前的生活质量中生理评分、心理评分、环境评分、社会评分比较,差异无统计学意义(P>0.05),观察组治疗后的生活质量四个维度评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论穴位敷贴联合维生素B_(1)肌内注射治疗在剖宫产术后肠胀气可以改善症状及焦虑程度,减轻疼痛,提高生活质量。

新斯的明注射液联合四磨汤口服液及维生素B_(1)注射液在剖宫产术后患者中的临床效果

目的探讨新斯的明注射液联合四磨汤口服液及维生素B_(1),注射液在剖宫产术后患者中的应用价值。方法选取2021年1月至12月赣州市妇幼保健院收治的90例剖宫产术后患者为观察对象,按照随机数字表法分为对照组(45例)和治疗组(45例)。对照组采用维生素B_(1),注射液治疗,治疗组采用新斯的明注射液联合四磨汤口服液及维生素B_(1),注射液治疗,比较两组患者的胃肠功能恢复时间、术后腹胀发生率与腹胀程度、不同时间内初乳分泌情况与肠梗阻发生率。结果治疗组肠鸣音恢复时间、首次排气、排便时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组术后腹胀发生率低于对照组,腹胀程度轻于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组术后24h初乳分泌率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组术后48、72h初乳分泌率比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组肠梗阻发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论对剖宫产术后患者实施新斯的明注射液联合四磨汤口服液及维生素B_(1)注射液治疗,可缩短胃肠功能恢复时间,降低术后腹胀发生率,减轻腹胀程度,促进初乳分泌。

维生素B_(1)与慢性病关系的研究进展

目的:阐述维生素B_(1)与慢性病的关系,为营养补充提供科学依据。方法:综述了维生素B_(1)与慢性病关系的研究进展。结果:补充维生素B_(1)可能在防治2型糖尿病、阿尔茨海默病等慢性病中具有潜在的健康效应;维生素B_(1)与肥胖、抑郁和癌症等其他慢性病也存在关联。结论:适宜剂量的维生素B_(1)或其衍生物补充可能有利于降低2型糖尿病的发生风险,并有利于改善阿尔茨海默病患者的认知功能。

顶空-气相色谱法同时测定维生素B_(1)片中9种溶剂残留量

目的 建立维生素B_(1)片中甲醇、乙醇、丙酮、甲酸乙酯、乙腈、正己烷、乙酸乙酯、四氢呋喃和正庚烷9种残留有机溶剂气相色谱分离测定方法。方法 采用顶空毛细管气相色谱法,6%(V/V)氰丙基苯基-94%(V/V)二甲基聚硅氧烷(DB-624)为固定液的毛细管柱(30 m×0.530 mm×3.00 μm),氢火焰离子化检测器(FID),载气为氮气,溶剂为N,N-二甲基甲酰胺(DMF)∶水(1∶1),按外标法计算残留溶剂的含量。结果 9种有机溶剂均能有效分离,峰响应与浓度均呈良好线性关系,相关系数r均大于0.999 64;平均回收率在92.2%~111.7%(n=9);精密度RSD值在0.3%~1.0%(n=6)。结论 该方法分离效果好、灵敏、可靠、准确,适用于维生素B1片中9种溶剂残留量的同时测定。

滋补丸剂中维生素B_(1)的含量测定

通过高效液相色谱法,建立滋补丸剂中维生素B 1的测定方法。采用十八烷基键合相硅胶为填充剂(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.05 mol/L乙酸钠溶液-甲醇(V_(乙酸钠溶液)∶V_(甲醇)=65∶35)为流动相进行等度洗脱,流速1 mL/min,柱温为室温。结果表明,维生素B_(1)在0~1.0μg/mL质量浓度范围线性关系良好,r=0.9997;精密度验证中,峰面积的RSD为1.31%,保留时间的RSD为0.178%;准确度实验验证中RSD为1.17%;重复性实验验证中RSD为0.779%;不同烘干时间的研发工艺中,稳定性含量测定偏差为1.05%。研究为维生素B_(1)的含量测定和特膳食品的研发工艺提供参考和借鉴。