维生素D3联合低强度抗阻运动治疗老年肌少症的疗效及对患者血清炎症水平的影响

目的探究维生素D3联合低强度抗阻运动对老年肌少症疗效及对患者血清炎症水平的影响。方法选取老年肌少症患者120例随机分为观察组和对照组各60例。对照组给予碳酸钙/维生素D3片并不强制要求运动方式,观察组应用碳酸钙/维生素D3并进行低强度抗阻运动训练,患者均连续治疗6个月。检测两组治疗前及治疗结束后四肢骨骼肌质量(ASM)、四肢骨骼肌质量指数(ASMI)、优势手握力(HGS)、血清中白细胞介素(IL)-6及肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。检测两组治疗前、治疗3个月及治疗6个月后血清25羟维生素D3〔25(OH)D3〕表达水平。结果治疗后,两组ASM、ASMI及HGS水平较治疗前均显著升高,且观察组HGS水平较对照组升高更明显(P<0.05),但治疗后两组ASM及ASMI水平无显著差异(P>0.05)。治疗3个月及治疗6个月后两组血清25(OH)D3水平较治疗前均显著升高,观察组血清25(OH)D3水平均显著高于对照组(P<0.05),且两组血清25(OH)D3水平均随治疗时间增加呈逐渐升高趋势。治疗后两组血清IL-6及TNF-α水平均显著降低,且观察组各炎症相关指标降低更明显(P<0.05)。Pearson相关性分析表明,治疗结束后血清25(OH)D3与血清TNF-α水平呈显著负相关(P<0.05),与ASMI、HGS及血清IL-6均无显著相关性(P>0.05)。结论维生素D3联合低强度抗阻运动能够显著增加老年肌少症患者的骨骼肌质量并增加上肢力量,有利于患者恢复,该过程可能与患者血清25(OH)D3水平增高、全身炎症反应水平降低相关,表明该联合治疗方案对于老年肌少症具有较高的临床应用价值。

维生素D3减轻高糖暴露诱导氧化应激促进人脐带间充质干细胞的成骨分化

背景:糖尿病骨质疏松症逐渐受到公众的关注,然而鲜有研究报道高糖环境对人脐带间充质干细胞成骨分化的影响和相应的治疗策略。目的:探讨维生素D3恢复高糖环境中人脐带间充质干细胞成骨分化的潜力。方法:通过CCK-8法检测人脐带间充质干细胞活力来筛选适宜的维生素D3干预浓度。在高葡萄糖条件下,通过RT-qPCR、蛋白质印迹、免疫荧光、JC-1线粒体膜电位、茜素红染色和β-半乳糖苷酶染色等实验评估维生素D3干预后人脐带间充质干细胞的成骨分化潜能、细胞内活性氧积累、线粒体膜电位改变和细胞衰老情况,并探讨了潜在的机制。结果与结论:①维生素D3在0.1μmol/L至1 mmol/L范围内均能显著促进人脐带间充质干细胞的增殖;②高糖环境下调了人脐带间充质干细胞中成骨相关基因α1-Ⅰ型胶原蛋白、碱性磷酸酶、Runt相关转录因子2、骨钙蛋白的mRNA和蛋白表达水平,诱发了氧化应激和细胞衰老;③维生素D3在10μmol/L的干预浓度下显著恢复了高糖条件下人脐带间充质干细胞的成骨表型,并通过激活Nrf2/HO-1信号通路减轻了细胞内的氧化应激和细胞衰老;④结果表明,高糖环境中人脐带间充质干细胞的成骨分化能力降低,维生素D3可以部分提高其成骨分化能力并减轻细胞损伤。

维生素D通过抑制NLRP3炎症小体的活化改善肾脏缺血再灌注损伤

目的:探讨维生素D(VD)在肾脏缺血再灌注(I/R)损伤中的作用及相关机制。方法:将48只雄性C57BL/6J小鼠分为4组:假手术组(Sham组)、活性VD类似物阿法骨化醇处理组(VD组)、肾缺血再灌注损伤组(I/R组)、阿法骨化醇处理的I/R组(I/R+VD组)。I/R损伤造模24 h后处死各组小鼠,收集外周血,检测血尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)和炎症因子IL-1β、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;收集各组小鼠肾组织,TUNEL染色法检测各组小鼠肾组织细胞凋亡水平,免疫组织化学检测肾组织中NOD样受体蛋白3(NLRP3)的表达阳性率;Western blot检测各组小鼠肾组织中NLRP3炎症小体相关因子NLRP3、GSDMD-N、cleaved Caspase-1及NF-κB p65、IκBα的蛋白表达水平。结果:与Sham组比较,VD组血清中BUN、SCr和IL-1β、IL-18及TNF-α水平差异无统计学意义(P>0.05),I/R组与I/R+VD组明显升高(P<0.05);与I/R组比较,I/R+VD组BUN、SCr和IL-1β、IL-18及TNF-α水平显著降低(P<0.05);与Sham组比较,VD组小鼠肾组织中TUNEL阳性率与NLRP3表达差异无统计学意义(P>0.05),I/R组与I/R+VD组明显升高(P<0.01),与I/R组比较,I/R+VD组的TUNEL阳性率与NLRP3表达均显著降低(P<0.05);Western blot检测结果显示,与Sham组相比,VD组小鼠肾组织中NLRP3、GSDMD-N、cleaved Caspase-1、IL-1β和NF-κB p65、IκBα的蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05),I/R组与I/R+VD组除IκBα蛋白表达明显降低外(P<0.05),其他蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与I/R组比较,I/R+VD组中NLRP3、GSDMD-N、cleaved Caspase-1和IL-1β和NF-κB p65蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),IκBα蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:VD可通过抑制NF-κB途径介导的NLRP3炎症小体激活,减轻I/R损伤的炎症反应,发挥肾脏保护作用。

血清25羟维生素D_(3)水平与T2DM周围血管病变的相关性研究

目的 研究血清25羟维生素D_(3)[25(OH)D_(3)]水平与2型糖尿病(T2DM)周围血管病变的相关性。方法 选取2022年1月至2023年12月我院收治的213例T2DM患者,按照是否发生周围血管病变分为发生组与未发生组。对比两组性别、年龄、病程、BMI、25(OH)D_(3)、空腹血糖(FPG)、C肽、糖化血红蛋白(HbA1c)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、总胆固醇(TC)、颈动脉超声[颈动脉内膜中层厚度(IMT)、颈动脉收缩期峰值血流速度(PSV)]等资料,采用Pearson相关性检验血清25(OH)D_(3)水平、IMT及PSV与T2DM周围血管病变发生的关系;采用Logistic回归分析影响T2DM周围血管病变发生的因素。结果 213例T2DM患者中并发周围血管病变的有83例(38.97%),未发生的有130例(61.03%)。周围血管病变组的25(OH)D_(3)、C肽、IMT及PSV与非周围血管病变组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性发现,25(OH)D_(3)、C肽、IMT与T2DM周围血管病变呈负相关(r<0,P<0.05),PSV与2DM周围血管病变的发生呈正相关(r>0,P<0.05)。经Logistic回归分析结果显示,25(OH)D_(3)、C肽及PSV是T2DM周围血管病变发生的危险因素(OR>1,P<0.05),而IMT是T2DM周围血管病变发生的保护因素(OR<1,P<0.05)。结论 25(OH)D_(3)与2DM周围血管病变的发生密切相关,其机制可能与C肽、IMT及PSV等影响有关,临床应针对上述因素给予合理的干预以减少周围血管病的发生。

儿童矮小症与25羟基维生素D,IGF-1,IGFBP-3的相关性

目的探讨儿童矮小症与25-(OH)D、IGF-1、IGFBP-3的相关性。方法以60例儿童矮小症作为观察组;另选择同期于本院体检健康的儿童32例作为参照组。采用化学发光免疫分析法测定IGF-1,IGFBP-3表达;采取酶联免疫吸附试验对血清内的25-(OH)D含量开展检测。比较两组25-(OH)D、IGF-1、IGFBP-3表达阳性率,分析其与儿童矮小症的相关性。结果入组儿童的性别、年龄以及父母身高比较无差异(P>0.05);相比参照组,矮小症三组患儿的25-(OH)D、IGF-1、IGFBP-3均呈下降趋势,其中ISS组、PGHD组的25-(OH)D、IGF-1、IGFBP-3水平高于CGHD组,差异有统计学意义(P<0.05),ISS组、PGHD组的25-(OH)D、IGF-1、IGFBP-3水平比较无差异(P>0.05),25-(OH)D、IGF-1、IGFBP-3水平与矮小症均呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论儿童矮小症与25-(OH)D、IGF-1、IGFBP-3之间关系密切,对矮小症的诊断和综合评价具有重要意义,可作为该病的确诊指标之一。

老年慢性失眠患者认知功能与失眠严重程度和血清25-羟维生素D3及肿瘤坏死因子α水平的相关性研究

背景慢性失眠是老年人群常见的疾病之一,常伴有不同程度的认知功能损害,严重影响老年人生活质量,而关于老年慢性失眠患者认知功能损害的生物学机制尚不明确。目的探讨老年慢性失眠患者认知功能与失眠严重程度、血清25-羟维生素D3[25(OH)D3]及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平的相关性。方法选取2020年6月—2022年6月在中国人民解放军联勤保障部队第九〇一医院诊治的老年慢性失眠患者105例为研究对象,入组前进行匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)、老年抑郁量表(GDS-15)、广泛性焦虑障碍量表(GAD-7)测试,并根据PSQI评分将患者按照失眠严重程度进行分组,其中轻度失眠组32例、中度失眠组38例、重度失眠组35例。运用光电容积脉搏波描记法(PPG)评估患者客观睡眠质量,监测总睡眠时间、睡眠潜伏期、睡眠效率及觉醒次数;采用简易智能精神状态量表(MMSE)和蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评估患者的认知功能;运用酶联免疫吸附试验法检测患者血清25(OH)D3、TNF-α水平。结果重度失眠组睡眠潜伏期长于轻度失眠组和中度失眠组,觉醒次数高于轻度失眠组和中度失眠组,总睡眠时间少于轻度失眠组,睡眠效率低于轻度失眠组和中度失眠组;中度失眠组睡眠潜伏期长于轻度失眠组,睡眠效率低于轻度失眠组(P<0.05)。重度失眠组MMSE、MoCA评分均低于轻度失眠组和中度失眠组,中度失眠组MMSE、MoCA评分均低于轻度失眠组(P<0.05)。重度失眠组血清TNF-α水平高于轻度失眠组和中度失眠组,25(OH)D3水平低于轻度失眠组和中度失眠组(P<0.05);中度失眠组血清TNF-α水平高于轻度失眠组,25(OH)D3水平低于轻度失眠组(P<0.05)。Spearman秩相关分析结果显示,MMSE、MoCA评分与总睡眠时间、睡眠效率和25(OH)D3水平呈正相关(P<0.05),与失眠严重程度、睡眠潜伏期、觉醒次数和TNF-α水平呈负相关(P<0.05)。结论老年慢性失眠患者认知功能损害可能与失眠严重程度及血清25(OH)D3水平降低、TNF-α水平升高有关。

维生素D3联合沙美特罗替卡松治疗支气管哮喘患儿的效果观察

探讨维生素D3(VitD3)联合沙美特罗替卡松治疗支气管哮喘患儿的疗效。方法:选取2022年07月~2023年06月本院收治的84例支气管哮喘患儿,按照抽签法均分为观察组与对照组。对照组使用沙美特罗替卡松,观察组使用沙美特罗替卡松 VitD3。比较两组治疗疗效、肺功能、炎性因子、免疫功能。结果:观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组FVC、FEV1、FEV1/FVC均升高,且观察组高于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组25-OH(D)高于对照组,IL-17水平低于对照组(P<0.05)。治疗后,两组IgA、IgG、IgM水平均升高,有观察组高于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组TLR4、NF-κB蛋白水平低于对照组(P<0.05)。结论:VitD3联合沙美特罗替卡松治疗支气管哮喘患儿的疗效较好,可改善其肺功能及免疫功能,抑制炎性因子表达,调节TLR4、NF-κB蛋白表达。

补充维生素D对≥6岁支气管哮喘患儿肺功能及血清免疫球蛋白、Gal-3、IL-17A水平的影响

目的探究补充维生素D对≥6岁支气管哮喘患儿肺功能及血清免疫球蛋白、半乳糖凝集素3(Gal-3)、白细胞介素-17A(IL-17A)水平的影响。方法选取2019年12月—2022年12月秦皇岛市第一医院诊治的150例≥6岁支气管哮喘患儿作为对照组,行常规治疗;选取2023年5月—2024年5月秦皇岛市第一医院诊治的150例≥6岁支气管哮喘患儿作为研究组,行维生素D补充治疗。比较两组临床疗效、哮喘急性发作次数及症状体征消失时间,并对两组肺功能[用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、FEV_(1)/FVC、最大呼气峰流速(PEF)]、血清免疫球蛋白[免疫球蛋白E(Ig E)、免疫球蛋白A(Ig A)、免疫球蛋白G(Ig G)]、气道炎症指标痰液呼出气一氧化氮(Fe NO)值及血清Gal-3、IL-17A水平进行治疗前、治疗3个月后对比。结果研究组治疗总有效率94.67%,比对照组的84.00%高(P<0.05)。研究组治疗后哮喘急性发作次数比对照组少,各症状体征消失时间比对照组短(P均<0.05)。两组治疗后FVC、FEV_(1)、FEV_(1)/FVC、PEF比治疗前高,且研究组比对照组高(P均<0.05)。两组治疗后Ig E比治疗前低,Ig A、Ig G比治疗前高,且研究组优于对照组(P均<0.05)。两组治疗后Fe NO、Gal-3、IL-17A比治疗前低,且研究组比对照组低(P均<0.05)。两组不良反应总发生率相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论补充维生素D可改善≥6岁支气管哮喘患儿肺功能、免疫球蛋白及血清Gal-3、IL-17A水平,降低机体炎症反应,提升疗效。

补充普通维生素D3对肥胖伴黑棘皮、高胰岛素青少年空腹胰岛素、体重指数的影响

目的:分析补充普通维生素D3对肥胖伴黑棘皮、高胰岛素青少年空腹胰岛素、体重指数的影响。方法:选取2020年3月~2022年3月威海市立医院收治的肥胖伴黑棘皮、高胰岛素青少年64例为研究对象,根据随机数字表法,将其分为对照组(n=32)和观察组(n=32)。对照组采用常规治疗方案,观察组在对照组治疗基础上口服维生素D3治疗。两组疗程均8周。比较两组患者的基本指标、血糖、血脂相关指标。结果:治疗后两组的体重指数、腰围、收缩压、舒张压均降低,且观察组低于对照组,观察组黑棘皮程度为轻度的占比高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组空腹血糖、餐后2 h血糖、空腹胰岛素含量均下降,且观察组低于对照组(P<0.05)。治疗后,两组的总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白水平均降低,且观察组更低,低密度脂蛋白水平均上升,且观察组更高(P<0.05)。结论:肥胖伴黑棘皮、高胰岛素青少年补充维生素D3不仅可降低其体重指数、腰围等基本指标,还可提高对糖脂代谢的有效控制。

1α,25-二羟基维生素D_(3)对哮喘小鼠SIRT1、GATA-3表达及气道炎症水平的影响

目的探究1α,25-二羟基维生素D_(3)对哮喘小鼠气道炎症变化的影响及可能机制。方法将24只SPF级BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、哮喘+1α,25-二羟基维生素D_(3)(哮喘+VD_(3))组,每组8只。哮喘组和哮喘+VD_(3)组小鼠于第1、8、15天给予卵清蛋白(OVA)混悬液0.2 ml致敏,对照组给予生理盐水0.2 ml;哮喘组和哮喘+VD_(3)组于第22~28天使用1%OVA雾化吸入激发,对照组给予等量生理盐水雾化吸入,每次雾化30 min,1次/d,连续激发7 d;哮喘+VD_(3)组每次雾化前30 min给予1α,25-二羟基维生素D_(3)注射液(4μg/kg),对照组和哮喘组给予等量生理盐水。最后一次激发后麻醉处理采集小鼠血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织标本。采用HE染色和PAS染色观察肺组织病理学改变及气道黏液水平的变化;ELISA法检测血清IgE及BALF中炎性因子白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-13水平;免疫组化、Western blotting检测小鼠肺组织中沉默信息调节因子1(SIRT1)和GATA结合蛋白-3(GATA-3)的表达情况。采用Pearson直线相关分析肺组织SIRT1、GATA-3表达水平(SIRT1、GATA-3的平均OD值)与小鼠血清IgE及BALF中IL-4、IL-5、IL-13浓度的相关性。结果与对照组比较,哮喘组小鼠肺组织气管及伴行血管周围炎性细胞浸润明显增多,其中以嗜酸性粒细胞为主,支气管管腔狭窄,气道黏膜上皮增生,气管内黏液分泌增多;哮喘+VD_(3)组小鼠上述改变较哮喘组减轻。与对照组比较,哮喘组小鼠血清IgE和BALF中IL-4、IL-5、IL-13等炎性因子水平及肺组织中GATA-3表达均增高(P<0.05),肺组织中SIRT1表达降低(P<0.05);与哮喘组比较,哮喘+VD_(3)组小鼠血清IgE和BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平及肺组织GATA-3表达均降低(P<0.05),肺组织SIRT1表达增高(P<0.05)。相关性分析结果显示,小鼠肺组织SIRT1表达水平与GATA-3表达量、血清IgG及BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平均呈负相关(P<0.05);小鼠肺组织GATA-3表达水平与血清IgG及BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平均呈正相关(P<0.05)。结论1α,25-二羟基维生素D_(3)可缓解哮喘小鼠的气道炎症,其机制可能是通过上调肺组织中SIRT1的表达,抑制GATA-3的表达,进而降低炎性因子(IL-4、IL-5、IL-13)水平。

头胎和经产围产期奶牛对25-羟基维生素D_(3)营养效应的对比分析

【目的】探究不同胎次奶牛对25-羟基维生素D3的机体反应,分析胎次对奶牛生产性能、产后疾病发生率及后代犊牛生长性能的影响,进而揭示围产期奶牛胎次对25-羟基维生素D3营养效应的具体作用。【方法】选择体况评分一致(3.25)、预产期前21 d的健康荷斯坦奶牛26头,按照胎次分配头胎组(胎次=1,n=11)和经产组(胎次≥2,n=15)。试验奶牛饲喂统一饲粮,每日补充3 mg/头25-羟基维生素D3。试验期82 d(第22天为预计产犊日)。记录产犊后奶牛日乳产量,同时采集产犊后0、7、21 d的乳样,用于检测乳成分。于产犊前21、7 d(-21、-7 d),分娩当天(0 d),产犊后7、21 d采集饲料及母牛、后代犊牛血液样品,分别用于检测饲料常规营养成分、血液免疫及抗氧化指标,以及血液骨、胶原代谢相关指标,并检测0、60日龄犊牛的体重和体尺指标。【结果】(1)与头胎奶牛相比,经产奶牛产后7、21 d乳产量极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05),产后7 d非脂乳固体率显著降低(P<0.05)。(2)经产奶牛较头胎奶牛血液中免疫球蛋白G(IgG)含量显著升高(P<0.05)。与头胎奶牛相比,在产犊前21和7 d时经产奶牛血液中降钙素(CT)含量显著升高(P<0.05);在产犊7 d时,经产奶牛血液中抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)含量极显著升高(P<0.01),经产奶牛血液中CT和IgM含量极显著降低(P<0.01),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量极显著升高(P<0.01);在产犊21 d时,经产奶牛血液IgM和TNF-α含量显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01)。(3)经产奶牛后代犊牛60日龄时体高极显著高于头胎奶牛后代犊牛(P<0.01)。【结论】头胎和经产围产期奶牛对25-羟基维生素D3的营养效应具有显著差异,围产期添加25-羟基维生素D3可使头胎奶牛血液免疫能力提高;经产奶牛骨、胶原代谢能力增强,同时其后代犊牛60日龄时体高增加。

25羟维生素D3、M型磷脂酶A2受体基因多态性交互影响原发性膜性肾病病情进展的研究

目的探究25羟维生素D3[1,25-dihydroxy vitmin D3,25-(OH)D3]、M型磷脂酶A2受体(M-type phospholipase A2 receptor 1,PLA2R1)基因多态性交互影响原发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)病情进展的作用。方法选取2019年1月至2023年1月自贡市第一人民医院收治的101例IMN患者进行前瞻性研究,根据6个月内是否复发分为复发组、未复发组。比较两组患者基线资料、25-(OH)D3水平、PLA2R1基因多态性,以Logistic回归分析影响IMN病情进展的因素,以交互作用系数γ和OR值分析25-(OH)D3、PLA2R1基因多态性交互影响IMN病情进展的作用。结果复发组尿酸[(419.36±25.44)μmol/L比(366.20±28.34)μmol/L]高于未复发组,25-(OH)D3水平[(33.60±10.74)nmol/L比(42.40±9.56)nmol/L]低于未复发组(P<0.05)。复发组rs4664308位点AA基因型(69.44%比44.62%)患者占比高于未复发组,GA基因型(27.78%比43.08%)、GG基因型(2.78%比12.31%)患者占比低于未复发组(P<0.05)。Logis-tic回归分析显示,尿酸、25-(OH)D3、rs4664308位点GA和AA基因型均与IMN病情进展相关(P<0.05),尿酸每升高一个单位,IMN患者病情进展的风险增加4.233倍;25-(OH)D3每降低一个单位,IMN患者病情进展的风险增加0.581倍;rs4664308位点GA和AA基因型患者,病情进展的风险分别是基因型GG患者的3.253、4.054倍。交互作用分析显示,25-(OH)D3和PLA2R1基因多态性交互的OR值<两者单独存在OR值的乘积,两者对IMN病情进展的影响符合次相乘模型,且交互作用系数γ>1,25-(OH)D3非正常对PLA2R1基因多态性的效应具有正向交互作用(P<0.05)。结论25-(OH)D3、PLA2R1基因多态性均与IMN患者病情进展有关,25-(OH)D3水平对PLA2R1基因多态性的效应具有正向交互作用,联合检测两者状态可能有助于预测患者病情进展的风险,为临床个性化预防干预提供决策支持。

1α,25-二羟维生素D_3对体外培养人输卵管上皮细胞VDR、CaBP-D28k表达的影响

目的:探讨1α,25-二羟维生素D3[1α,25-(OH)2D3]对体外培养人输卵管上皮细胞活性及细胞维生素D受体(VDR)、钙结合蛋白calbindin-D28k(CaBP-D28k)表达的影响。方法:以不同浓度(0,10-10,10-9,10-8,10-7mol/L)1α,25-(OH)2D3处理体外培养人输卵管壶腹部上皮细胞,分别于不同时间收集细胞。应用溴化四唑蓝比色法检测细胞活性,逆转录聚合酶链反应法、免疫印迹法检测细胞VDR、CaBP-D28k mRNA及其蛋白表达。结果:1α,25-(OH)2D3对体外培养人输卵管上皮细胞增殖无影响。以不同浓度1α,25-(OH)2D3处理细胞12 h,与对照组比较,10-7mol/L 1α,25-(OH)2D3组细胞VDR、CaBP-D28k mRNA表达显著增加(P均<0.05)。以10-7mol/L1α,25-(OH)2D3处理细胞不同时间,与对照组比较,处理6h,12h后细胞VDR、CaBP-D28k mRNA表达显著增加(P均<0.05);处理24h,48h后细胞VDR、CaBP-D28k蛋白表达显著增加(P均<0.05)。结论:在体外培养条件下,1α,25-(OH)2D3不影响人输卵管上皮细胞增殖,1α,25-(OH)2D3可能通过VDR上调人输卵管上皮细胞CaBP-D28k的表达。

维生素D_3联合5-氟尿嘧啶对人食管癌Eca-109细胞移植瘤VDR表达的影响

探讨维生素D3、5-氟尿嘧啶单独与联合使用对人食管癌Eca-109细胞移植瘤维生素D受体(vitamin Dreceptor,VDR)的作用.随机分为对照组(C)、预处理组(PT)、维生素D3组(V)、5-氟尿嘧啶组(F)、预处理+5-氟尿嘧啶组(PT+F)、维生素D3+5-氟尿嘧啶组(V+F).体外培养人食管癌Eca-109细胞,BALB/c裸鼠皮下荷瘤,2.5μg/kg1,25-(OH)2维生素D3、25 mg/kg 5-氟尿嘧啶单独与联合腹腔注射,观察瘤体生长情况,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹技术(Western blot)检测裸鼠瘤体组织VDR mRNA与蛋白的表达.研究发现1,25-(OH)2维生素D3、5-氟尿嘧啶均能抑制裸鼠移植瘤的生长,PT、V、F、PT+F、V+F组瘤体体积与C组比较差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR与Western blot结果显示经1,25-(OH)2维生素D3单独与联合5-氟尿嘧啶使用后瘤体组织中VDR mRNA和蛋白表达升高,且联合用药更为显著(P<0.05).结果表明1,25-(OH)2维生素D3、5-氟尿嘧啶均能抑制人食管癌Eca-109细胞移植瘤的生长,两药联合应用具有协同作用,其机制可能与上调VDR基因与蛋白表达有关.

活性维生素D3通过VDR/mTOR途径调节高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖、纤维化和自噬

目的研究活性维生素D3(VD3)对高糖介导的系膜细胞增殖、纤维化及自噬水平的影响及其相关作用机制。方法体外培养HBZY-1大鼠肾小球系膜细胞,转染小干扰RNA(siRNA)沉默细胞中维生素D受体(VDR),反转录PCR和Western blot实验检测干扰效率;将培养系膜细胞分为正常葡萄糖培养组、高糖组、高糖联合VD3组、敲低VDR后高糖联合VD3组、高糖联合VD3和mTOR激活剂MHY1485组;噻唑蓝(MTT)法和乙炔基脱氧尿苷(EdU)法检测系膜细胞增殖,ELISA检测纤连蛋白(FN)、Ⅰ型胶原蛋白(Col1)和Ⅳ型胶原蛋白(Col4)的分泌水平,透射电镜检测各组系膜细胞自噬体数量变化,免疫荧光细胞化学染色检测系膜细胞中自噬标志分子微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达,Western blot法检测系膜细胞纤维化相关蛋白转化生长因子β1(TGF-β1)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和P62蛋白的表达以及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)磷酸化水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值。结果转染si-VDR后HBZY-1细胞中VDR mRNA和蛋白表达水平明显下调;与正常糖组相比,高糖组、高糖联合VD3组、敲低VDR后高糖联合VD3组和高糖联合VD3和mTOR激活剂MHY1485组系膜细胞的增殖能力、细胞因子FN、Col1和Col4的表达水平均显著增加,且细胞中p-mTOR、TGF-β1、α-SMA、P62的蛋白表达水平均显著增加,而LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显降低,自噬体数量显著降低;其中高糖联合VD3组较高糖组、敲低VDR后高糖联合VD3组、高糖联合VD3和mTOR激活剂MHY1485组的上述检测指标的变化趋势明显降低,后三组无明显差异。结论抑制VDR的表达或提高mTOR活化水平能有效抵消活性VD3抑制高糖介导的系膜细胞增殖及纤维化水平增加和自噬水平降低的效应。

25羟维生素D3及T淋巴细胞亚群变化与成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者胰岛功能的关系

目的:观察不同滴度谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)成人隐匿性自身免疫性糖尿病(LADA)患者25羟维生素D3[25(OH)D3]水平及T淋巴细胞亚群的变化,探讨其与胰岛β细胞功能的关系。方法:在成人糖尿病(DM)患者中筛查获得GADA阳性患者,根据GADA滴度水平分为低滴度组和高滴度组,对照组为普通2型糖尿病(T2DM)患者。检测空腹血糖(FBG)、血脂、肝肾功能,糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血清C肽(FCP)、25(OH)D3和T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)和CD8^(+))。计算胰岛素抵抗指数[Homa-IR(CP)]和胰岛功能指数[Homa-islet(CP)]。结果:与T2DM组比较,高滴度组体重指数(BMI)、25(OH)D3水平、FCP、餐后2 h C肽(2 hCP)、Homa-IR(CP)和Homa-islet(CP)均降低,差异有统计学意义(P<0.05),同时合并有较低的总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、尿酸(UA)水平,差异有统计学意义(P<0.05);低滴度组也表现出BMI、25(OH)D3水平、FCP、2 hCP、Homa-IR(CP)和Homa-islet(CP)降低,伴低TC水平,差异有统计学意义(P<0.05)。高滴度组CD4^(+)/CD8^(+)T比值高于低滴度组,差异有统计学意义(P<0.05),LADA患者CD4^(+)/CD8^(+)比值与GADA滴度呈正相关(r=0.37,P<0.01),25(OH)D3水平与Homa-islet(CP)呈正相关(r=0.32,P=0.02)。结论:低25(OH)D3水平及T淋巴细胞亚群比例失衡与胰岛β细胞功能损伤有关并参与LADA病程的进展。

固相萃取RP-HPLC同时测定复合维生素注射液中的VA棕榈酸酯、VD_3和VE醋酸酯

目的:用非水反相高效液相色谱法建立复合维生素注射液中维生素A棕榈酸酯、维生素D3和维生素E醋酸酯的含量测定方法。方法:3种脂溶性维生素经固相萃取法进行萃取分离;含量测定色谱条件为:C18色谱柱(5μm,4.6×150mm),流动相乙腈-甲醇-二氯甲烷(70:20:10),检测波长265nm。结果:维生素A棕榈酸酯、维生素D3和维生素E醋酸酯的线性关系良好,相关系数均为0.9999,回收率分别为99.1%、100.6%和99.2%,RSD分别为0.19%、0.79%和0.52%。结论:本方法快速、灵敏、准确,可作为复合维生素注射液中维生素A棕榈酸酯、维生素D3和维生素E醋酸酯的含量测定方法。

1,25二羟维生素D_3靶控VDRE-ERα表达载体对MDA-MB-231细胞周期的影响

目的探讨1,25二羟维生素D3靶控的雌激素受体α表达载体(VDRE-Tk-ERα)对雌激素受体阴性的MDA-MB-231乳腺癌细胞周期进程的影响及其机制。方法利用MTT法检测1,25二羟维生素D3联合他莫西芬对转染VDRE-Tk-ERα表达载体的MDA-MB-231细胞增殖能力的影响,通过流式细胞仪法检测1,25二羟维生素D3联合他莫西芬对转染该表达质粒的MDA-MB-231细胞周期相的分布。用RT-PCR、Western blot和免疫沉淀法检测细胞Rb及其磷酸化水平、Cy-clin D1、CDK4的表达以及Cyclin D1/CDK4激酶复合物的结合力变化。结果1,25二羟维生素D3联合他莫西芬能够有效抑制转染该质粒的MDA-MB-231细胞的增殖活性并将其细胞周期进程阻遏于G0/G1期。与此同时,Cyclin D1的表达则显著降低,其与CDK4的结合力亦显著降低。Rb的表达虽无显著变化,但其磷酸化水平显著下降。结论1,25二羟维生素D3可通过靶控MDA-MB-231细胞内外源性雌激素受体α的表达进而对G1/S期相关分子的表达和活性进行调控从而阻止雌激素受体α阴性的乳腺癌细胞的周期进程并恢复对他莫西芬的化疗敏感性。

1,25二羟维生素D_3联合他莫西芬对转染VDRE-Tk-ERα表达载体的MDA-MB-231细胞周期和凋亡的影响

目的构建受1,25二羟维生素D3调控的雌激素受体α真核表达载体(VDRE-Tk-ERα),并观察其对雌激素受体阴性乳腺癌细胞的细胞周期相分布和凋亡的影响。方法利用PCR法体外构建得到含有4个拷贝VDRE和Tk启动子的VDRE-Tk-ERα表达载体,并将其和空载体质粒分别转染入MDA-MB-231细胞中,通过流式细胞仪检测乳腺癌细胞周期相的分布,用TUNEL法检测细胞凋亡的发生。结果1,25二羟维生素D3和他莫西芬联合作用较对照组和单独作用组能够显著抑制乳腺癌细胞的周期进程,并能有效诱导肿瘤细胞发生凋亡。结论利用1,25二羟维生素D3靶控雌激素受体α表达载体联合他莫西芬可以阻止雌激素受体α阴性的MDA-MB-231乳腺癌细胞的周期进程并诱导其发生凋亡,从而使原本对他莫西芬耐受的乳腺癌细胞恢复对其的化疗敏感性。

1,25-二羟基维生素D3在临床医学领域中的研究进展

维生D具有调节钙、磷代谢,影响细胞分化等生理功能。越来越多的研究表明维生素D缺乏与多种疾病的发生与发展相关,例如骨质疏松症、免疫性疾病、帕金森病、动脉粥样硬化、肿瘤等。本文主要就维生素D在临床医学治疗领域的研究进展作一综述。