维胺酸对交链孢醇单甲醚致突变性的抑制作用

交链孢醇单甲醚(AME)是直接致突变物,可能是林县食管癌病因之一。维胺酸是国内合成的毒性较小的新维甲衍生物,本文采用V_(79)细胞6-疏基鸟嘌呤抗性突变试验的方法,研究了维胺酸对AME致突变性的影响。结果表明,所用剂量范围内的维胺酸对V_(79)细胞无明显毒性和致突变性(P>0.05)。一定剂量维胺酸(15μg/ml)对不同剂量(25～100μg/ml)AME诱发的V_(79)细胞突变频率低于AME单独作用(P<0.01)。此外,与仅含AME对照相比,不同剂量维胺酸(5～20μg/ml)能分别降低AME的突变频率(P<0.05或P<0.01),并随维胺酸剂量增大,相对抑制率增高,呈现剂量相关性,显示维胺酸对AME致突变性有抑制作用,为林县食管癌的化学预防提供了实验依据。

癌化学预防药维胺酸的药理学研究

维胺酸(N-4-(hydroxycarbophenyl)-retinamide;RⅡ)在30～50mg/kg的剂量下对大鼠移植性软骨肉瘤有明显治疗作用。 低浓度的RⅡ对HL-60细胞有较弱的分化诱导活性,同时加入S86019可使其活性增强。流式细胞光度术分析表明,RⅡ可使HL-60细胞产生G_1期阻断,与S86019联合应用有良好协同阻断效应,使90％细胞积聚在G_1期,Northern blot分析表明,用RⅡ和S86019联合处理HL-60细胞12h后,c-myc表达明显受到抑制,与DNA合成密切相关的胸腺嘧啶核苷酸合成酶mRNA表达也受到抑制。

维胺酸对人鼻咽癌细胞形态及部分生物学特性的影响

从肿瘤化学治疗角度出发，检测维甲酸第二代低毒性衍生物维胺酸（ＲⅡ）作用于人鼻咽癌细胞母系ＣＮＥ－２Ｚ及其不同侵袭转移潜能的亚系Ｌ２、Ｈ２、Ｌ４细胞后，与肿瘤细胞恶性行为密切相关的一些生物学特性的变化。结果表明，ＲⅡ对人鼻咽癌细胞的体外生长和侵袭行为具有一定的抑制作用，并具有一定的诱导分化作用，提示ＲⅡ在抑癌抗癌方面很可能具有一定的应用前景。

不同转移潜能肿瘤细胞内Ca^（2＋）浓度的测定及维胺酸的影响

本文观察了小鼠肺腺癌ＬＡ７９５母系及不同转移潜能克隆株ＬＡ１、ＬＡ５细胞其胞内［Ｃａ￣（２＋）］及诱导分化剂维胺酸和二甲基亚砜对其影响。发现母系与克隆株细胞间，其胞内静息［Ｃａ￣（２＋）］确有差异（Ｐ＜０．０１）。中转移ＬＡ５克隆株胞内［Ｃａ￣（２＋）］最高，不转移ＬＡ１克隆株最低，母系ＬＡ７０５胞内［Ｃａ￣（２＋）］居中。在克隆株细胞中，胞内［Ｃａ￣（２＋）］与其转移潜能成正比。维胺酸作用不同时间，ＬＡ７９５、ＬＡ１、ＬＡ５胞内［Ｃａ￣（２＋）］先下降，然后逐渐恢复用药前水平，最终至胞内［Ｃａ￣（２＋）］升高。二甲基亚砜作用后，引起胞内［Ｃａ￣（２＋）］一过性升高，然后下降最后又升高。二者均终至所用细胞内［Ｃａ￣（２＋）］升高，提示其诱导分化作用过程中，［Ｃａ￣（２＋）］变化起作用，胞内［Ｃａ￣（２＋）］与肿瘤转移性有一定关系。

维胺酸对体外转化人支气管上皮细胞及体内构建人支气管上皮组织的抑制作用

癌前改变是肿瘤演变过程中的关键阶段。许多研究显示维甲类化合物对动物肿瘤及体外恶性细胞系具有抑制作用,但尚未见其对肺癌前病变作用的实验室研究报道。人类肺癌的绝大部分起源于支气管上皮,为研究维胺酸对体外转化人支气管上皮M细胞系以及在大鼠气管构建后移植到裸鼠体内生长的具有癌前病变特点的人支气管上皮组织的抑制作用,采用上皮细胞无血清培养技术,人支气管上皮组织大鼠气管内构建/裸鼠皮下移植生长技术,流式细胞学分析,免疫组化、凋亡细胞原位末端标记以及病理学检查等研究方法发现,维胺酸可抑制体外培养的转化人支气管上皮细胞的增殖,使S期细胞比例下降,以及细胞增殖标志Ki-67、mpm-2阳性反应细胞比例下降;明显诱导细胞凋亡。裸鼠腹腔注射给予维胺酸也可使大鼠气管内构建后移植到裸鼠体内生长的癌前期人支气管上皮组织的生长率明显降低,病变程度明显减轻;同样可以诱导细胞凋亡。研究结果提示,维胺酸对体外培养的转化人支气管上皮细胞系及大鼠气管构建/裸鼠体内移植生长的人支气管上皮组织均有明显的抑制作用,是有希望的肺癌化学预防药物。

维胺酸对小鼠前胃癌细胞恶性表型的逆转作用及其机制的研究

采用较其母体维甲酸低毒的维胺酸（ＲⅡ）诱导小鼠前胃癌（ＭＦＣ）细胞系分化和细胞恶性表型逆转并分析其可能的机制。实验用１０^（－５）ｍｏｌ／ＬＲⅡ 且连续用药５代结果表明，经ＲⅡ处理后瘤细胞生长受到明显抑制，~３Ｈ－ＴｄＲ的掺入率显著降低，几乎丧失在软琼脂中形成集落的能力。流式细胞仪检测显示，瘤细胞由Ｇ１期向Ｓ期移行受阻断。此外，药物处理后的前胃癌细胞染色体主流范围下降，并开始出现二倍体细胞，且其形态发生了显著变化。培养中的细胞由上皮细胞型转变为成纤维细胞型。组织学观察发现，瘤细胞密度降低，可见到胞浆丰富区，局部瘤细胞出现极性；扫描电镜观察到ＲⅡ处理后的ＭＦＣ细胞微绒毛丰富，丝状伪足的末端常见圆形膨大结构，而对照细胞表面多为折皱状结构，尚可见多量叶状伪足，但未见末端膨大结构。斑点杂交验证ＲⅡ能降低小鼠ＭＦＣ细胞ｃ－ｍｙｃ癌基因的表达，诱导ｖ－ｆｏｓ癌基因的高表达。

维胺酸在大鼠体内的药代动力学

用高效液相色谱法测定了维胶酸（ＲⅡ）在大鼠体内的吸收，分布，排泄，生物利用度及蛋白结合率等药代动力学特性，ＲⅡ３０ｍｇ·ｋｇ－１ｉｖ，血清中药物浓度经两次加权的二室模型拟合，Ｔ１／２β为２０．７１ｈ，ＣＬｓ为０．３４Ｌ·ｋｇ－１·ｈ－１，Ｖｃ为０．９９Ｌ·ｋｇ－１．ＲⅡ１００及２００ｍｇ·ｋｇ－１ｐｏ，经一室开放模型拟合，Ｔ１／２Ｋｅ分别为１１．９２及１３．０１ｈ，ＣＬｓ为０．８７及０．７７Ｌ·ｋｇ－１·ｈ－１，体内绝对生物利用度为３９．７％及４６．４％。ＲⅡ２００ｍｇ·ｋｇ－１ｐｏ７ｈ后，肠，胃组织中ＲⅡ含量囊高，血，肝，卵巢，肾次之，心，脾，肺，睾丸，肌肉，脂肪含量较少，脑，副睾，骨组织含量极微；２４ｈ后，各组织含量明显下降，说明ＲⅡ不易在体内蓄积。１２０ｈ内主要经粪便排出，累积排出率为３４．４±ｓ２．０％，经尿液，胆汁排泄较少，累积排泄率仅分别为１．１±ｓ０．６％及０．０２４±ｓ０．０１％。经超滤法测定，ＲⅡ血药浓度在４５．９４－１０３．２２ｍｇ·Ｌ－１内，ＲⅡ血浆蛋白结合率为４６．６％一５２．４％。

小鼠肺腺癌LA795不同转移克隆细胞株转移潜能表达的稳定性及维胺酸的作用效应

本文观察了来源于同一母系的不同转移克隆细胞株在多次传代（12～14代）后，其体内转移潜能的变化，并探讨了这些克隆株在不同宿主（近交系T739和SCID鼠）体内转移性的表达及维胺酸作用后对其转移性及表皮钙粘连分子（E－cadherin）表达的影响。结果表明：不同克隆株其体内转移潜能具有相对稳定性。SCID鼠也是克隆株转移潜能表达的良好宿主。体外维胺酸作用后，LA795瘤细胞各在T739小鼠体内肺转移性下降，而对不同克隆体内表皮钙粘连分子的表达无明显影响。

维胺酸治疗骨髓增生异常综合征二例报告

骨髓增生异常综合征(MDS)是造血干细胞的疾病,表现在外周血一、二系或全血细胞减少,骨髓各系表现有病态造血。部分病例可转化为急性白血病。目前,对MDS尚无满意的治疗方法。自发现维生素甲类化合物(Retinoids)能诱导白血病细胞分化、抑制某些癌前病变及肿瘤生长以来,维生素甲类化合物在肿瘤防治上的作用引起了学者们的广泛注意。1980年Honma等观察了维生素甲的衍生物维甲酸(Retinoic acid)对人早幼粒细胞白血病细胞株HL-60的诱导分化作用。1982年Itri等提出维甲酸对MDS及早幼粒细胞白血病有治疗作用。此后,也见有应用维甲酸治疗MDS的报告,有一定的效果。中国医学科学院药物研究所研制的维胺酸(4-Hydroxycarbophenyl,Retinamide,简称RⅡ)经实验证明,对人早幼粒细胞白血病细胞株HL-60也有诱导分化作用,毒副作用远远低于维甲酸。

维胺酸对实验性口腔癌阻断作用的研究

目的观察维胺酸对实验性口腔癌的阻断作用方法以DMBA诱导的金黄地鼠口腔癌为模型用维胺酸进行治疗结果维胺酸对癌前病变有明显的阻断作用各治疗组与对照组相比均有显著性差异同时发现维胺酸可降低口腔粘膜细胞微核细胞率结论维胺酸对DMBA引起的粘膜组织DNA损伤有保护作用对实验性口腔有阻断作用

诱导分化剂维胺酸对卵巢癌细胞超微结构的影响

目的:探讨诱导分化剂维胺酸对卵巢浆液性囊腺癌细胞超微结构的影响。方法:选取37例晚期卵巢浆液性囊腺癌患者为研究对象,随机分为两组,了解在手术和化疗的基础上联合维胺酸诱导分化治疗后肿瘤细胞超微结构的变化。结果:诱导分化组肿瘤细胞出现明显的成熟性分化趋势:核浆比例减小,细胞质较丰富;细胞间出现发育较好的桥粒连接、紧密连接;线粒体数量增加形态较规则,基质电子密度增加;细胞质内糖原颗粒丰富;部分细胞中出现数量较多的粗面内质网和形态较规则的高尔基复合体。结论:诱导分化剂维胺酸可诱导和促进肿瘤细胞分化,诱导分化疗法能够改善卵巢浆液性囊腺癌肿瘤细胞的恶性生物学行为。

维胺酸的癌化学预防作用研究

维胺酸 (RⅡ )是中国医学科学院药物研究所研制的Ⅰ类新药。多中心临床观察证明 ,其对口腔白斑 ,胃和宫颈上皮不典型增生 ,外阴白色病损等癌前疾病具较好治疗作用。临床前研究证实维胺酸能明显抑制多种致癌物诱发的突变和减轻染色体损伤 ,可以阻遏TPA类物质对鸟氨酸脱羧酶 (ODC)活性的诱导 ,降低蛋白激酶C (PKC)活性 ,具有明显抗致突变、抗促癌作用。在一组由亚硝胺、DMBA诱发的动物口腔、胃、皮肤及膀胱癌及癌前病变的实验中 ,显示出它有明显抗化学致癌作用。RⅡ可以影响多种肿瘤细胞增殖 ,显示分化诱导作用。电镜组化、细胞周期分析等方法证实 ,药物作用后癌细胞在生物化学、形态、生长特性等方面恶性程度明显降低 ,细胞超微结构变化显著 ,向正常细胞方向分化。RⅡ对癌细胞运动、侵袭也显示一定的抑制作用。作用机理研究表明 ,RⅡ主要通过增强c fos基因表达 ,抑制c myc等基因表达 。

维胺酸对体外培养人喉癌细胞增殖的影响

采用细胞生长曲线、细胞毒试验、克隆形成试验以及有丝分裂指数和多核率测定，观察了维胺酸（ＲⅡ）对人喉癌ＨＥｐ－２细胞增殖的影响。结果表明：不同浓度ＲⅡ（２～６ｍｇ·Ｌ－１）接触细胞２４ｈ、４８ｈ和９６ｈ，ＨＦｐ－２细胞增殖抑制效应与剂量呈正相关；与溶剂对照相比，当ＲⅡ浓度为２、４和６ｍｇ－Ｌ－１时，ＭＴＴ法的细胞生长抑制率分别为１０．８３％、７１．３４％和８２．１７％（ｒ＝０．９５１，Ｐ＜０．０５），半数抑制浓度（ＩＱ５０）为３．０１ｍｇ·Ｌ－１；克隆形成试验中ＲⅡ组细胞存活率分别为７２．１５％、４９．３２％和４３．３８％（Ｐ＜０．０１），呈现剂量相关性抑制（ｒ＝－０．９６７，Ｐ＜０．０５）；ＲⅡ还抑制细胞有丝分裂指数和多核率（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），镜下可见癌细胞有形态学改变。表明ＲⅡ对人喉癌细胞的生长增殖具有抑制作用。

维胺酸对不同转移性癌细胞的分化诱导作用

用新研制的维甲酸的衍生物维胺酸作为分化诱导剂。以上皮细胞来源的癌细胞,如小鼠前胃癌细胞MFC(转移率为85％)、人鼻咽癌细胞系CNE-2Z(转移率为56％)、CNE-2Z的亚系克隆株L2(高转移细胞株,转移率100％)以及L4(低转移细胞株,转移率为13％)作为研究对象,用体外培养的癌细胞,以10^(-5)mol/LRⅡ作用5代后,进行了系列观察。实验结果显示,RⅡ作用于MFC细胞和CNE-2Z及其克隆株后,在生长曲线、集落形成、运动性及侵袭性均查见有明显抑制作用,但对FN和LN基质的粘附性均有升高;在形态下也出现明显的微细结构的改变,主要为细胞表面的改变。这些改变说明RⅡ有一定分化诱导作用,使癌细胞有向正常分化的趋向性。对癌基因表达的影响,动物癌细胞及人癌细胞受RⅡ作用后,与转移的相关性有明显矛盾现象。如高转移的MFC细胞对nm^(23)不表达,RⅡ作用后出现表达而CNE-2Z克隆株中高转移细胞中的nm^(23)表达,在RⅡ作用后受到抑制。在CNE-2Z及其克隆株中发现fos,ras^H,nm和Rb4个基因的表达,具有共同特点。RⅡ作用后在母系及高转移的L2细胞株中的表达受抑制,而在低转移L4细胞株中均呈高表达。提示癌基因、抑癌基因在不同侵袭转移性癌细胞中引起的作用可能不尽相同,同时对RⅡ作用后不同癌细胞中其基因表达也不尽相同。

维胺酸对二甲基苯蒽／巴豆油诱发小鼠皮肤乳头状瘤的抑制作用

本文研究了维胺酸对二甲基苯蒽／巴豆油诱发小鼠皮肤乳头状瘤发生的影响．结果显示，口服雏胺酸可显著延迟小鼠肿瘤发生潜伏期，减少每鼠平均荷瘤数，降低肿瘤发生率，说明维胺酸具有明显的癌化学预防作用．维胺酸的癌化学预防作用与抗致突变．抑制促癌剂诱导细胞鸟氨酸脱谈酶活性，活性氧自由基产生及抑制细胞脂质过氧化有关．

维胺酸对人胃癌细胞SGC─7901的分化诱导作用

应用图象分析、聚丙烯酰胺凝胶同工酶电泳、放免、伴刀豆球蛋白凝集反应等，观察了维胺酸对人胃癌细胞系ＳＧＣ－７９０１的分化诱导作用。结果发现，一定剂量的维胺酸对细胞的生长、增殖有抑制作用，使细胞内ＤＮＡ平均含量下降，核面积变小，ＬＤＨ同工酶谱发生变化，Ｈ型亚基升高，Ｍ型亚基降低，细胞ＣＥＡ分泌量和ＣｏｎＡ凝集反应均显著下降。光镜下，细胞铺展较好，排列较有序，叠堆生长少见，细胞质嗜碱性降低。以上结果说明，维胺酸对细胞形态以及生理、生化等方面均有影响。

国产维胺酸治疗口腔癌前病变的报告

国产维胺酸治疗口腔癌前病变的报告湖南省湘潭市中西口腔医院唐杰清维生素甲酸类化合物是一类新型的癌的预防和治疗药物。近几年来有报道用于治疗口腔粘膜白斑（ＯＬＫ）和口腔粘膜扁平苔癣（ＯＬＰ），但由于服药和局部用药后，患者出现毒副作用大，如脱发、皮肤痒、红斑...