一起绵羊伪狂犬病的发生及病毒gE基因的序列变异分析

为了确诊一起绵羊伪狂犬病的发生,采集送检病羊的皮肤、脾脏、淋巴结、脑等组织器官进行实验室病毒分离和PCR检测。结果显示,病料中扩增出了伪狂犬病病毒的特异性g E基因片段。结合流行病学调查、病理剖检和实验室诊断,确定引起此次疫情的病原为伪狂犬病病毒。为了进一步了解此次疫情中PRV g E基因的分子特征,特对PCR扩增产物进行了连接、转化和测序分析。遗传进化分析表明,该分离株与亚洲各分离株处于同一分支,基因同源性高达98.4%-99.4%,与欧洲、美洲分离株同源性相对较远,分别为97.0%-97.2%、97.2%-97.3%;g E蛋白氨基酸序列分析显示,该分离株在g E蛋白的第48位和第492位各存在1个天冬氨酸的插入,与我国当前流行的伪狂犬变异株相同,同时在当前猪伪狂犬病病毒变异株基础上又出现了新氨基酸位点的变异,如L49P、P160T、V406G、G445R,其分子生物学特性有待进一步的研究。本文通过综合诊断确定该病由伪狂犬病病毒引起,为我国绵羊伪狂犬病的流行病学分析及防控提供了重要的理论依据。

绵羊伪狂犬病病毒的鉴定及序列分析

为确诊疑似绵羊伪狂犬病、分析其病原gC基因序列特征,以山东某羊场疑似伪狂犬病病料为对象,经负染后进行电镜观察,PCR扩增特异性gC基因并对其进行序列测定及遗传进化关系分析。电镜下观察可见病毒样粒子,病料中扩增出特异性目的基因片段,序列测定结果显示扩增的目的基因为伪狂犬病病毒(PRV)gC基因片段。遗传进化分析表明该病毒和1998年分离于南美洲阿根廷的猪伪狂犬病病毒遗传关系最近,同属于一个进化分支。流行病学及临床症状和实验室检测结果表明该病例为绵羊伪狂犬病病毒引起,为国内进行羊PRV分子流行病学研究积累了资料。

绵羊感染伪狂犬病的病理学观察与病毒分离鉴定

为了确诊1例疑似绵羊伪狂犬病病例,本试验以上海郊区某羊场发病绵羊的病料为研究对象进行了病理学观察、病毒分离和鉴定。病理组织学变化显示,发病羊大脑组织神经元发生广泛性变性、坏死并伴有嗜神经现象,神经元周围出现胶质细胞增生。病料接种BHK-21细胞,细胞出现病变,间接免疫荧光试验和荧光定量PCR检测结果证实所分离的病毒为伪狂犬病病毒。流行病学调查结果表明,绵羊伪狂犬病可能是由猪伪狂犬病病毒感染引起的。通过免疫接种猪伪狂犬病弱毒疫苗,绵羊伪狂犬病疫情得到及时控制。