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绵羊卵巢不同获卵方法及体外成熟效果比较 被引量:2
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作者 宁方勇 白秀娟 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期65-71,78,共8页
采用抽吸、切割和抽吸结合切割3种方法,从绵羊卵巢获取卵母细胞,分别比较3种方法获得A、B、C级卵母细胞的数量及耗时。结果表明,抽吸结合切割和切割法耗时分别为136.07和131.60 s,均显著高于抽吸法61.33 s(P〈0.05);而获得可用... 采用抽吸、切割和抽吸结合切割3种方法,从绵羊卵巢获取卵母细胞,分别比较3种方法获得A、B、C级卵母细胞的数量及耗时。结果表明,抽吸结合切割和切割法耗时分别为136.07和131.60 s,均显著高于抽吸法61.33 s(P〈0.05);而获得可用卵(包括A、B级)以切割法最好为8个。对比不同激素剂量组合的3种培养液,均能获得81%以上成熟率,但成熟率差异不显著。成熟液:TCM199-HCO3+10%FBS+lμg·mL-1雌二醇+2.2 g·mL-1 NaHCO3+50μg·mL-1庆大霉素+5μg·mL-1 FSH+0.38 mmol·L-1丙酮酸钠+1 IU·mL-1 LH+10 mmol·L-1 Hepes可获得最高83.4%卵母细胞成熟率;绵羊卵巢保存在10-15℃、15-20℃和20-30℃条件下,所获卵母细胞成熟率都在82%以上,差异不显著;IA23187联合6-DMAP孤雌激活体外成熟绵羊卵母细胞,可获最高91.5%孤雌胚率。 展开更多
关键词 绵羊卵巢 获卵方法 体外成熟 比较
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绵羊卵巢上Ghrelin部分序列鉴定 被引量:1
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作者 郭志凯 李国俊 杜晨光 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第4期9-11,共3页
为了研究GhrelinmRNA是否在绵羊卵巢表达,试验根据GenBank中报道的绵羊Ghrelin序列设计1对特异性引物,以绵羊卵巢所提取的RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增出绵羊Ghrelin的cDNA,经DNA测序后进行分析。结果表明:扩增到的绵羊Ghrelin cDNA为G... 为了研究GhrelinmRNA是否在绵羊卵巢表达,试验根据GenBank中报道的绵羊Ghrelin序列设计1对特异性引物,以绵羊卵巢所提取的RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增出绵羊Ghrelin的cDNA,经DNA测序后进行分析。结果表明:扩增到的绵羊Ghrelin cDNA为Ghrelin的部分序列,将测序结果同已发表的绵羊Ghrelin序列进行比对,233个碱基中有1个碱基的差异,该差异不影响翻译后多肽的序列;该片段cDNA包含由231bp组成的开放读码框(ORF),编码77个氨基酸的前原绵羊Ghrelin多肽。 展开更多
关键词 绵羊卵巢 GHRELIN CDNA 克隆
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不同电导率水对绵羊卵巢蛋白提取及双向电泳影响的研究 被引量:1
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作者 贾建磊 张利平 丁强 《中国草食动物科学》 CAS 2014年第S1期184-186,共3页
为了探索不同电导率水对绵羊卵巢蛋白提取及双向电泳(2-DE)的影响,运用了不同级别水(超纯水、去离子水、蒸馏水和自来水)作为反应溶剂对绵羊卵巢蛋白进行提取,运用PDquest8.0图像分析软件对2-DE图谱进行分析,结合SAS 9.0软件进行数据分... 为了探索不同电导率水对绵羊卵巢蛋白提取及双向电泳(2-DE)的影响,运用了不同级别水(超纯水、去离子水、蒸馏水和自来水)作为反应溶剂对绵羊卵巢蛋白进行提取,运用PDquest8.0图像分析软件对2-DE图谱进行分析,结合SAS 9.0软件进行数据分析,根据蛋白质提取量、2-DE斑点数以及2-DE图谱分辨率,得出在进行绵羊卵巢蛋白质组研究时,超纯水做溶剂效果最好,去离子水次之,蒸馏水和自来水不适合做溶剂进行绵羊卵巢蛋白质组研究。 展开更多
关键词 电导率 绵羊卵巢蛋白 蛋白提取 双向电泳
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绵羊卵巢运输、保存温度及时间对其卵母细胞孤雌发育能力的影响
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作者 乔利敏 郭彤 +5 位作者 乔富强 姚华 张京和 雷莉辉 关伟军 侯引绪 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第4期563-566,共4页
为研究绵羊卵巢不同运输温度、保存温度及时间对其卵母细胞孤雌发育能力的影响,将采集卵巢随机分别置于(10~15),(20~25),(30~35)℃3种不同温度生理盐水中运输到实验室培养,然后优选较好运输温度将采回卵巢随机分为3个试验组,分别保存... 为研究绵羊卵巢不同运输温度、保存温度及时间对其卵母细胞孤雌发育能力的影响,将采集卵巢随机分别置于(10~15),(20~25),(30~35)℃3种不同温度生理盐水中运输到实验室培养,然后优选较好运输温度将采回卵巢随机分为3个试验组,分别保存在4,(14~18),(25~30)℃生理盐水中,保存15~17h后进行成熟培养并孤雌激活。结果表明:(1)在不同运输温度的卵母细胞中,温度为20~25℃时卵母细胞能够进行最好的发育,其成熟率和囊胚率分别为67.44%,35.93%;(2)将绵羊卵巢在14~18℃保存15~17h,对卵母细胞的成熟率(61.81%)、孤雌激活后囊胚的发育率(29.03%)均无显著影响,而将卵巢保存在4℃或25~30℃却显著降低了卵母细胞的成熟率(41.90%,18.40%)与卵裂率(9.09%,13.04%),没有发育到囊胚。从而得出,绵羊卵巢卵母细胞体外培养的长距离运输适宜温度为20~25℃。卵巢在14~18℃保存过夜,不影响卵母细胞的发育能力。 展开更多
关键词 绵羊卵巢 运输温度 保存温度 卵母细胞 发育能力
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促卵泡刺激素干预改善绵羊卵巢组织玻璃化冻存后异种移植的效果研究 被引量:2
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作者 王艳盛 谢莎莎 +2 位作者 王燕蓉 黑长春 郑小敏 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第18期3301-3304,共4页
背景:卵巢皮质片移植是无血管吻合移植,因此,提高卵巢组织对冻存-解冻和移植后缺血的耐受力是提高冻存后移植物卵泡存活和延长功能寿命的关键环节。目的:观察促卵泡刺激素在玻璃化冻存过程中对绵羊卵巢组织形态和功能的保存效果,为成人... 背景:卵巢皮质片移植是无血管吻合移植,因此,提高卵巢组织对冻存-解冻和移植后缺血的耐受力是提高冻存后移植物卵泡存活和延长功能寿命的关键环节。目的:观察促卵泡刺激素在玻璃化冻存过程中对绵羊卵巢组织形态和功能的保存效果,为成人卵巢组织的冻存提供技术方法。方法:BALB/c品系雌性裸鼠随机分为3组。均行羊卵巢皮质片裸鼠异位移植:①新鲜移植对照组,取材后即移植。②玻璃化冻存移植组,采用玻璃化冻存解冻后移植,所用液体均未添加促卵泡刺激素。③添加促卵泡刺激素的玻璃化冻存移植组,采用冷冻液、解冻液和培养液均添加促卵泡刺激素的玻璃化冻存后移植。移植后检测受体鼠动情周期恢复率、恢复时间、卵泡数和发育状况,于移植后4周取移植卵巢进行组织学观察、并行血清雌二醇水平分析。结果与结论:含促卵泡刺激素的玻璃化冻存移植组与新鲜移植组相比动情周期恢复率、每高倍视野卵泡计数差异均无显著性意义(P>0.05),卵泡计数高于未添加促卵泡刺激素的玻璃化冻存移植组(P<0.05);动情周期恢复需要的天数接近于新鲜移植组,明显短于未添加促卵泡刺激素的玻璃化冻存移植组(P<0.05)。移植后4周,含促卵泡刺激素的玻璃化冻存移植组组织学观察见卵泡发育,未添加促卵泡刺激素的玻璃化冻存移植组仅偶见原始卵泡。含促卵泡刺激素的玻璃化冻存移植组与新鲜移植组相比血清雌二醇水平差异无显著性意义(P>0.05),显著高于未添加促卵泡刺激素的玻璃化冻存移植组(P<0.05)。结果提示,在玻璃化液中加入促卵泡刺激素可提高冻存绵羊卵巢组织移植后卵泡存活率。 展开更多
关键词 绵羊卵巢 异种移植 玻璃化冻存 促卵泡刺激素 组织移植
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绵羊卵巢周期性黄体Ghrelin/MC4R表达变化 被引量:2
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作者 邰春格 张占文 +3 位作者 王彩云 李海军 曹贵方 杜晨光 《内蒙古农业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2013年第6期1-4,共4页
本研究利用qRT-PCR技术检测了绵羊卵巢周期性黄体变化过程中Ghrelin/MC4R mRNA水平相对表达变化规律。结果表明随着黄体的形成、发育、退化,成熟黄体Ghrelin mRNA表达量显著高于新鲜黄体(P<0.05),极显著高于退化黄体(P<0.01)。而M... 本研究利用qRT-PCR技术检测了绵羊卵巢周期性黄体变化过程中Ghrelin/MC4R mRNA水平相对表达变化规律。结果表明随着黄体的形成、发育、退化,成熟黄体Ghrelin mRNA表达量显著高于新鲜黄体(P<0.05),极显著高于退化黄体(P<0.01)。而MC4R基因呈现了相反的趋势,退化黄体MC4R mRNA表达量极极显著高于新鲜黄体和成熟黄体(P<0.001)。Ghrelin/MC4R在绵羊卵巢周期性黄体相左的表达模式,揭示了这两种基因参与黄体周期性变化,且与生殖密切关系。 展开更多
关键词 绵羊卵巢 GHRELIN 黑皮质素4型受体 黄体
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Justicia insularis Improves the in vitro Survival and Development of Ovine Preantral Follicles Enclosed in Ovarian Tissue
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作者 Gildas Tetaping Mbemya Denise Damasceno Guerreiro +11 位作者 Nathalie Jiatsa Donfacl~ Luciana Mascena Silv~ Luis Alberto Vieira Geovania Francisca Canafistula de Sousa Benner Geraldo Alves Aryele Pinto Izaguirry Francielli Weber Santos Phelix Bruno Telefo Otilia Deusdenia Loiola Pessoa Johan Smitz Jose Ricardo de Figueiredo Ana Paula Ribeiro Rodrigues 《Journal of Pharmacy and Pharmacology》 2017年第9期668-680,共13页
Objectives: Evaluating the addition effect of./. insularis extract and FSH on the survival, activation and ROS production after in vitro culture of ovine preantral follicles enclosed in ovarian tissue. Methods: In t... Objectives: Evaluating the addition effect of./. insularis extract and FSH on the survival, activation and ROS production after in vitro culture of ovine preantral follicles enclosed in ovarian tissue. Methods: In the first experiment, ovarian fragments were fixed (non-cultured control) or in vitro cultured in α-MEM+ (cultured control), α-MEM+ supplemented with FSH 50 ng/mL, or in α-MEM+supplemented with J. insularis (JUS0.3; 1.25 or 5 mg/mL) for 1 or 7 days, at 39℃, 5% CO2. In the second experiment, fragments were fixed or cultured in α-MEM+ supplemented with anethole 300 μg/mL + FSH 50 ng/mL or in α-MEM+ supplemented with anethole 300μg/mL + 0.3 mg/mL JUS. Key findings: JUS0.3 was the only treatment that maintained the percentage of morphologically normal follicles similar to non-cultured control even after 7 days of culture. After 7 days of culture, a higher (p 〈 0.05) percentage of developing follicles was observed in JUS5 treatment compared with the other treatments except JUS 1.25. In the second experiment, FSH maintained the percentage of normal follicles and promoted activation of primordial follicles. A reduction (p 〈 0.05) of stromal cell density was observed in MEM++ANE supplemented with JUS or FSH. Conclusions: J. insularis in a concentration-dependent manner maintained the levels of ROS and improved in vitro follicular survival and activation of ovine primordial follicles. 展开更多
关键词 Medicinal plant antioxidant in vitro folliculogenesis preantral follicles.
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