脱细胞绵羊带瓣静脉支架材料的制备及其免疫原性评价

目的：制备脱细胞绵羊带瓣静脉支架材料,通过探讨其对BALB/c小鼠体液免疫和细胞免疫的影响,以此评价该脱细胞基质的免疫原性,进而为脱细胞组织工程支架的安全性提供实验依据.方法：正常成年绵羊带瓣股静脉2cm长的片段,联合使用弱碱、非离子去垢剂及核酶进行脱细胞处理.H-E染色观察细胞组分残留及细胞外基质完整性.免疫组织化学检测其HLA-1的表达.将脱细胞基质植入BALB/c小鼠背部皮下,ELISA法检测植入前、植入后24h内、1周、3周、9周小鼠血清IgG.此外,采用刀豆素A诱导的脾体外淋巴细胞增殖实验检测脱细胞支架材料浸提液对BALB/c小鼠淋巴细胞增殖的影响.结果：经弱碱、非离子去垢剂及核酶处理后的绵羊带瓣静脉,未见细胞组织,纤维未见断裂;HLA-1未见阳性表达.植入脱细胞基质后,小鼠体内IgG水平与植入前相比,各时相点差异均无统计学意义.施加脱细胞基质浸提液后,BALB/c小鼠淋巴细胞还原率与阴性对照相比,差异无统计学意义.而与施加刀豆素A相比,差异有统计学意义.结论：联合弱碱、非离子去垢剂及核酶处理可制备良好的脱细胞绵羊带瓣静脉支架材料;该支架对BALB/c小鼠体液免疫和细胞免疫无明显影响.