HPLC法同时测定清心明目上清片中栀子苷、连翘苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的含量

目的：建立HPLC同时测定清心明目上清片中四种成分（栀子苷、连翘苷、黄芩苷和盐酸小檗碱）含量的方法.方法：色谱柱.AglientTC-C18（4.6mm×250mm,5μm）,流动相为乙腈（A）-0.2%磷酸溶液（B）,梯度洗脱程序依次为.0-10 min 18%B,10-12 min 20%-30%B,12-14 min30%-16%B,14-20 min 16%-28%B,20-30 min 28%-65%B,30-40 min 65%-80%B,流速0.9 mL·min-1,柱温为25℃,检测波长分别为238 nm（栀子苷和连翘苷）、275nm（黄芩苷和盐酸小檗碱）.结果：栀子苷、连翘苷、黄芩苷和盐酸小檗碱分别在0.031 1-0.622 2μg（r=0.999 6）,0.533 3-8.000μg（r=0.999 6）,0.080 0-1.600 0μg（r=0.999 5）,0.115 6-1.155 6μg（r=0.999 4）范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.4%、98.3%、97.1%、98.2%.结论：本法操作简便、精密度高、重现性好,适用于同时测定清心明目上清片中栀子苷、连翘苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的含量.

高效液相色谱法测定安宫牛黄丸中栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的含量

目的：建立同时测定安宫牛黄丸中栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱含量的反相液相色谱法。方法：采用Agilent ZORBAX SB—C18柱（4．6mm×250mm，5μm），乙腈-6mmol·L^-1 KH2PO4水溶液（pH4．6）梯度洗脱，检测波长240nm。结果：栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的线性范围分别为4．50—110．00，5．00—153．00，6．40—191．00mg·L^-1；质量检测下限分别为0．77，1．53，1.43ng；栀子苷的回收率为104．44％，RSD为1．79％；黄芩苷的回收率为96．98％，RSD为1．76％；盐酸小檗碱的回收率为101．08％，RSD为3．1％。结论：采用该方法同时测定安宫牛黄丸中栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱含量具有简便、快速、准确等优点。

RP-HPLC同时测定功劳去火片中栀子苷、黄芩苷及盐酸小檗碱的含量

目的：建立了反相高效液相色谱法同时测定功劳去火片（功劳木，黄柏，黄芩等）中栀子苷、黄芩苷、盐酸小檗碱的含量。方法：采用KromasilC18色谱柱（250mm×4．6mm，5．0μm）；流动相组成为A：乙腈，B：乙腈-0．5％三乙胺水溶液（磷酸调pH3．1）（10：90）梯度洗脱；流速1．0mlMmin，检测波长254nm。结果：栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的线性范围分别为：3．22～206μg/mL（r=0．9999），2．95～186μg／mL（r=0．9999）和1．64～104μg／mL（r=0．9999）。平均回收率均大于98．4％。结论：该方法专属性强，结果准确可靠，重现性好，可用于功劳去火片中栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的含量测定，以便更好地控制功劳去火片的质量。

HPLC法同时测定导赤丸中栀子苷、芍药苷、黄芩苷和盐酸小檗碱

目的建立HPLC同时测定导赤丸中栀子苷、芍药苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的方法。方法 Zorbax E-clipse XDB-C18键合硅胶色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);柱温为室温;流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长分别为240 nm(栀子苷、芍药苷),275 nm(黄芩苷、盐酸小檗碱)。结果栀子苷、芍药苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的进样量分别在0.056～0.56μg(r=0.999 8)、0.1～1.5μg(r=0.999 6)、0.104～1.56μg(r=0.999 6)、0.116～2.32μg(r=0.999 6)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为96.41%、97.16%、97.90%、101.24%;RSD分别为2.48%、2.40%、1.54%、2.58%。结论方法简便、快速,可用于同时测定导赤丸中栀子苷、芍药苷、黄芩苷和盐酸小檗碱。

盐酸小檗碱、绿原酸和黄芩苷在兔体液内浓度与其体外抑菌浓度的差异研究

【目的】测定盐酸小檗碱、绿原酸和黄芩苷在兔体液内浓度,及各成分体外最小抑菌浓度,阐明3种中药成分清热解毒功能与其抑菌作用的关系。【方法】采用反相高效液相色谱法,测定盐酸小檗碱、绿原酸和黄芩苷在兔血液和组织液内的浓度;采用试管稀释法,测定3种中药成分对大肠杆菌的体外最小抑菌浓度。【结果】盐酸小檗碱、绿原酸和黄芩苷在兔血浆内的浓度峰值分别为3.2、5.03和7.63μg.ml-1,在兔组织液内的浓度峰值分别为0.12、0.11和0.12μg.ml-1;3种中药成分的体外最小抑菌浓度分别为1.0×103、3.75×103和6.75×103μg.ml-1,其体外最小抑菌浓度明显高于它们在兔体液内的浓度峰值。【结论】盐酸小檗碱、绿原酸和黄芩苷的抑菌作用较弱,在兔体液内不能达到有效抑菌浓度,其抑菌作用并非其清热解毒功能的主要机制。

多波长RP-HPLC法同时测定导赤丸中栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱

目的建立同时测定导赤丸(黄连、栀子、黄芩、大黄、连翘、木通、玄参、天花粉、赤芍、滑石粉)中栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的方法。方法采用多波长RP-HPLC,色谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B),梯度洗脱依次为A:15%～20%(0.00～10.00)min,A:20%～25%(10.00～15.00)min,A:25%～35%(15.00～25.00)min;柱温为室温;体积流量为1.0 mL/min;检测波长分别为240 nm(栀子苷)、278 nm(黄芩苷)和340 nm(盐酸小檗碱)。结果栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的进样量分别在0.037 5～0.337 5μg(r=0.999 7),0.0368～0.736μg(r=0.999 9)和0.039～0.351μg(r=0.999 9)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为102.95%、102.83%和98.61%;RSD分别为2.63%、1.90%和2.98%。结论方法简便,结果准确,重复性好,适用于同时测定导赤丸中栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱。

RP-HPLC法同时测定蓝芩口服液中栀子苷、黄芩苷及盐酸小檗碱的含量

目的:建立反相高效液相色谱法同时测定蓝芩口服液中栀子苷、黄芩苷及盐酸小檗碱的含量。方法:采用Nova-PakC_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相组成为:A:乙腈,B:乙腈-0.5%三乙胺水溶液(磷酸调pH3.1)(15:85)梯度洗脱;流速1.0ml·min^(-1);检测波长254nm。结果:栀子苷、黄芩苷及盐酸小檗碱的线性范围分别为:0.5～2.5μg(r=0.9999),0.21～1.26μg(r=0.9994),0.05μg～1.59μg( r=0.9998)。平均回收率:栀子苷为100.8%,RSD=1.6%(n=9);黄芩苷为101.3%,RSD=2.0%(n=9)。盐酸小檗碱为100.0%,RSD=2.3%。(n=9)结论:方法简便,准确可作为蓝芩口服液的质量控制标准。

HPLC程序波长法测定牛黄上清丸中黄芩苷、连翘苷和盐酸小檗碱

目的建立HPLC程序波长法同时测定牛黄上清丸中黄芩苷、连翘苷和盐酸小檗碱的量。方法色谱柱ZorbaxXDB-C18柱;流动相为乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液进行梯度洗脱;程序可变检测波长,0～10 min为278 nm(黄芩苷),10～20 min为230 nm(连翘苷),20～55 min为265 nm(盐酸小檗碱)。结果黄芩苷在8.956～71.65μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率为98.07%(RSD为1.1%);连翘苷在14.242～113.93μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率为100.90%(RSD为0.8%);盐酸小檗碱在3.270～26.17μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率为101.54%(RSD为1.3%)。结论该方法简便、快速、灵敏、准确,可用于黄芩苷、连翘苷和盐酸小檗碱的同时定量分析,为牛黄上清丸的质量评价和控制提供新的方法。

当归六黄汤分煎样品与合煎样品中阿魏酸、盐酸小檗碱、黄芩苷含量的比较

目的对当归六黄汤分煎样品与合煎样品中阿魏酸、盐酸小檗碱、黄芩苷的含量进行比较,从而为其临床应用提供依据。方法均采用反相液相色谱法,DIKMA ODS-C18柱(5μm 4.6 mm×250 mm),以0.085%磷酸-乙腈为流动相梯度洗脱,流速为1.0 ml.min-1,柱温:35℃,检测波长为326nm测定阿魏酸。以乙腈-0.5%的三乙胺(磷酸调pH=3.00)(27∶73)为流动相,流速为1.0 ml.min-1,柱温:30℃,检测波长为343 nm测定盐酸小檗碱。以甲醇-水-磷酸(55∶45∶0.2)为流动相,检测波长为280 nm,流速为1.0ml.min-1,柱温30℃测定黄芩苷。结果3个指标性成分在分煎样品中平均含量均大于合煎样品中平均含量。结论从中药复方汤剂中指标性成分的含量考虑,当归六黄汤配方颗粒应用于临床具有一定的可行性。

小檗碱、绿原酸和黄芩苷对LPS损伤大鼠肠黏膜微血管内皮细胞表达ICAM-1的影响

为研究中药有效成分小檗碱、绿原酸和黄芩苷的抗炎机制,通过体外培养大鼠肠黏膜微血管内皮细胞(Rat intestinal mucosa microvascular endothelial cells,RIMMVECs)建立LPS损伤模型,采用免疫细胞化学方法观察了3种中药成分对LPS损伤RIMMVECs表达ICAM-1的影响,并对染色结果进行了图像灰度分析与统计学检验。研究发现,RIMVECs正常状态下低水平表达ICAM-1,用LPS刺激后ICAM-1的表达明显升高,而中药有效成分小檗碱、绿原酸和黄芩苷能够抑制LPS诱导的RIMVECs强阳性表达ICAM-1。结果表明,小檗碱、绿原酸和黄芩苷的抗炎作用与其下调ICAM-1的表达密切相关,为阐明其抗炎机制提供了数据。

盐酸小檗碱、人参皂苷Rb1、黄芩苷及绿原酸对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用研究

目的探讨盐酸小檗碱、人参皂苷Rb1、黄芩苷及绿原酸对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用。方法运用96孔板点样法,采用酶标仪测定1 000、500、250、125、62.50、31.25 mg/L浓度下的盐酸小檗碱、人参皂苷Rb1、黄芩苷以及绿原酸对大肠埃希菌以及金黄色葡萄球菌的吸光值,计算抑菌率,比较4种成分对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用。结果1 000、500、250、125、62.50、31.25 mg/L的盐酸小檗碱、人参皂苷Rb1、黄芩苷以及绿原酸对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果比较,差异均有统计学意义(P<0.05),且均为1 000 mg/L的抑菌率>500 mg/L的抑菌率>250 mg/L的抑菌率>125 mg/L的抑菌率>62.50 mg/L的抑菌率>31.25 mg/L的抑菌率;同一浓度的不同药物抑菌率比较差异也有统计学意义(P<0.05),对于大肠埃希菌,头孢吡肟的抑菌率最高,其次是人参皂苷Rb1和盐酸小檗碱,最后是绿原酸和黄芩苷。对于金黄色葡萄球菌,头孢吡肟的抑菌率最高,其次是盐酸小檗碱,再次是人参皂苷Rb1,然后是绿原酸,黄芩苷的抑菌效果最差。结论盐酸小檗碱、人参皂苷Rb1、黄芩苷和绿原酸4种中药成分对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌均有一定的抑菌作用,浓度越高抑菌作用越强,同一药物浓度下人参皂苷Rb1和盐酸小檗碱的抑菌效果较好,绿原酸和黄芩苷的抑菌效果较差。

HPLC法同时测定烫伤合剂中绿原酸、虎杖苷和盐酸小檗碱的含量

目的:建立烫伤合剂中绿原酸、虎杖苷和盐酸小檗碱含量的测定方法。方法:采用HPLC法,用色谱柱为lnertsil C_(8-3)(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,乙腈-0.1%磷酸-四氢呋喃(19:80:1)为流动相,流速为1.0 ml·min^(-1),检测波长为290 nm。结果:绿原酸、虎杖苷和盐酸小檗碱的线性范围分别为25.45～254.5(r=0.999 4),3.07～30.75(r=0.999 6)和6.62～66.25μg·ml^(-1)(r=0.999 7);平均加样回收率分别为99.99%,97.40%和98.81%(n=6)。结论:此法简便、准确,具有良好的重复性好,适用于烫伤合剂中3种组分的同时测定。

不同厂家栀子金花丸中栀子苷、黄芩苷、盐酸小檗碱的溶出度测定和比较研究

目的:测定市售10个生产厂家12批样品栀子金花丸中栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的溶出度,并进行聚类分析比较。方法:采用HPLC法测定溶出度,Agilent Eclipse Plus C_(18)(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇-水(0.1%磷酸),梯度洗脱;以含0.4%SDS水溶液为溶出介质,桨法,900mL介质,100r/min,测定3种成分的溶出度并分别绘制溶出度曲线,采用Wɑrd离差平方和法对各成分的溶出数据进行聚类分析。结果:10个不同厂家样品的栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的溶出曲线有差异。溶出120min大部分厂家的栀子苷溶出度达到80%以上,其中A、C、I厂均达到了85%以上;大部分厂家的黄芩苷溶出度均达到了70%以上,其中B、I厂的分别达到了83.47%、88.50%;除A、I厂的盐酸小檗碱溶出度达到了70%以上,其余则在30%~60%之间。聚类分析结果表明,不同厂家3种成分含量存在差异。结论:不同厂家栀子金花丸中黄芩苷和盐酸小檗碱的溶出度差异较大。

HPLC同时测定栀黄止痛贴中栀子苷、大黄酸、芍药苷、盐酸小檗碱含量

目的建立同时测定栀黄止痛贴中栀子苷、大黄酸、芍药苷、盐酸小檗碱含量的HPLC方法。方法 Agilent TC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B),采用梯度洗脱(0~10 min,15%A;10~30min,15%A→70%A;30~35 min,70%A→10%A),流速为1.0 m L·min-1,柱温为25℃,检测波长分别为0~15 min时244nm(测定栀子苷、芍药苷),15~35 min时254 nm(测定小檗碱、大黄素)。结果栀子苷、大黄酸、芍药苷、盐酸小檗碱进样量分别在1.20~7.20μg(r=0.9996)、1.66~9.98μg(r=0.9996)、4.32~25.92μg(r=0.9997)和1.34~8.06μg(r=0.9996)范围内线性关系良好;平均加样回收率(n=6)分别为99.4%、98.2%、97.45%和97.38%,RSD分别为2.57%、2.25%、1.25%和1.51%。结论本含量测定方法简单、可靠,为栀黄止痛贴的质量控制提供了可靠的方法。

RP-HPLC法同时测定复方黄柏液中盐酸小檗碱、绿原酸和连翘苷的含量

目的采用高效液相色谱梯度洗脱法同时测定复方黄柏液（黄柏、连翘、金银花、蒲公英、蜈蚣）中盐酸小檗碱、绿原酸和连翘苷的含量,为制定该制剂质量标准中含量测定方法及限度提供依据。方法Scienhome（Kromasil C18,5μm,200×4.6mm）色谱柱;流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液梯度洗脱（5∶95~25∶75）;检测波长：0~40min：327nm;40~63min：277nm;63~70min：265nm;流速1.00mL.min-1;柱温30℃;进样量10μL。结果该方法回收率盐酸小檗碱：100.5%,绿原酸：98.8%,连翘苷：99.9%。结论该方法能够将盐酸小檗碱、绿原酸、连翘苷很好的分离,测定结果准确可靠,重现性好。

反相高效液相色谱法同时测定栀子金花丸中栀子苷、小檗碱、黄芩苷、大黄酸、大黄素、大黄酚的含量

目的建立反相高效液相色谱法同时测定栀子金花丸中栀子苷、小檗碱、黄芩苷、大黄酸、大黄素、大黄酚6种主要成分的含量。方法色谱条件为Gemini NX C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相,梯度洗脱,洗脱程序如下：0-10 min（7%A）,10-45 min（7%-25.5%A）,45-75 min（25.5%-64%A）,75-90 min（7%A）;检测波长：254 nm;流速：1.0m L·min^-1。结果栀子苷、小檗碱、黄芩苷、大黄酸、大黄素、大黄酚浓度分别在3.440-20.64、4.020-24.12、19.45-116.70、1.074-6.444、1.146-6.876、1.366-8.196μg·m L^-1与峰面积呈良好线性关系,平均回收率（n=6）分别为99.9%、98.8%、101.0%、99.6%、101.3%、98.1%,RSD分别为1.7%、1.8%、1.4%、1.7%、1.4%、0.9%。结论该方法简便、准确、重复性好,可用于栀子金花丸的质量控制。

RP-HPLC法测定牛黄上清丸中栀子苷、芍药苷、黄芩苷、小檗碱的含量

目的：建立牛黄上清丸中栀子苷、芍药苷、黄芩苷和小檗碱的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱（RP-HPLC）梯度洗脱,在不同波长下测定含量。色谱条件：Zorbax Eclipse XDB-C18键合硅胶（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相乙腈为0.2%磷酸水梯度洗脱,流速1.0 m L/min,柱温为20℃,检测波长分别为240 nm（栀子苷、芍药苷）,275 nm（黄芩苷）,350 nm（盐酸小檗碱）。结果：栀子苷、芍药苷、黄芩苷和盐酸小檗碱分别在0.112~0.84μg（r=0.9998）,0.20~1.50μg（r=0.9992）,0.208~3.64μg（r=0.9990）,0.232~2.32μg（r=0.999 7）范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.62%,100.30%,99.80%,98.92%,RSD分别为1.66%、1.93%、0.94%、0.95%。结论：该方法操作简便,结果准确,精密度高,重现性良好,可用于同时测定牛黄上清丸（大蜜丸）中栀子苷、芍药苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的含量,可为提升、完善牛黄上清丸的质量标准及含量测定的方法提供科学依据。

黄芩苷等中药单体对人皮脂腺细胞内雄性激素受体mRNA表达的影响

目的研究盐酸小檗碱、黄芩苷、苦参碱中药单体对SZ95人皮脂腺细胞内雄性激素受体(AR)mRNA表达的影响,探讨中药治疗痤疮的机制。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应技术检测不同浓度的盐酸小檗碱、黄芩苷、苦参碱及13-顺维A酸作用SZ95皮脂腺细胞24h后,细胞内ARmRNA的表达。结果1×10-5、1×10-6mol/L13-顺维A酸和1×10-4mol/L黄芩苷使SZ95人皮脂腺细胞中ARmRNA的表达下降(P<0.05)。结论13-顺维A酸和黄芩苷等药物可能通过抑制AR的表达而具有拮抗雄性激素对皮脂腺细胞活性的作用,这将有助于了解这些药物治疗痤疮的机制。