紫薯中绿原酸类化合物标准品的制备

从紫薯中提取制备高纯度、市场价值较高的绿原酸类化合物标准品。紫薯切片,采用沸水提取、大孔树脂吸附和凝胶柱色谱分段,然后以反相制备液相色谱获得高纯标准品,最后以核磁共振技术确定化学结构。从紫薯中制备得到异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C和3,4,5-O-三咖啡酰基奎宁酸,高效液相色谱检测表明这些化合物的纯度均在98%以上。本研究建立的制备工艺可高效地将紫薯中绿原酸类化合物富集,并快速获得高纯样品,有效地避免了紫薯花色苷类化合物对产品色泽和纯度的影响。

甜叶菊毛状根绿原酸类化合物对α-淀粉酶的抑制作用

本文建立了微量α-淀粉酶抑制剂体外活性检测模型,并以此模型研究了甜叶菊毛状根绿原酸类化合物对α-淀粉酶的抑制作用效果及其动力学特征。优化后的α-淀粉酶抑制剂活性检测模型的主要参数如下:酶浓度为1.25 U/m L,底物浓度范围为0.05~6 mg/mL,反应时间为30 min。以此模型检测了由ACCC10060、R1601、A4三种发根农杆菌所诱导的甜叶菊毛状根总绿原酸提取物对α-淀粉酶的抑制效果,发现三者均对α-淀粉酶具有较强的抑制作用,其IC50分别为12.43、18.31和21.08 mg/mL。高效液相色谱检测结果表明,ACCC10060所诱导的甜叶菊毛状根的总绿原酸提物主要含绿原酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸三种成分,含量分别为6.88、19.90和1.50 mg/g。酶抑制动力学检测结果显示,该三种绿原酸类化合物均对α-淀粉酶有较强抑制作用,以该三种绿原酸标品复配模拟毛状根总绿原酸提取物,发现其对α-淀粉酶的抑制作用与总绿原酸提取物无显著性差异。以上研究结果表明,甜叶菊毛状根绿原酸类化合物对α-淀粉酶有很好的抑制作用,其有效成分为绿原酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸,可利用该毛状根生产以绿原酸类物质为主要活性成分的餐后血糖抑制剂。

紫薯愈伤组织诱导和培养条件优化及绿原酸类化合物的积累

以紫薯叶片为外植体,通过筛选培养基和培养条件建立了紫薯愈伤组织培养体系。研究6-苄基氨基嘌呤(6-BA)及萘乙酸(NAA)不同浓度组合对紫薯愈伤组织诱导的影响,之后分别考察基础培养基MS、1/2MS、B5、WPM、White及NAA、6-BA、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)三种激素对紫薯愈伤组织继代生长的影响。确定最适基础培养基后,对激素进行单因素实验后再做正交实验。结果表明1/2MS基本培养基中添加1.5 mg/L 6-BA和0.4 mg/L NAA适合紫薯愈伤组织诱导,诱导率为81.82%。MS为优选基础培养基,通过正交实验优化的激素配比组合为1.0 mg/L NAA,0.4 mg/L 6-BA,1.0 mg/L 2,4-D。最佳继代培养基为MS+1.0 mg/L NAA+0.4 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D+6 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,此优化激素条件下愈伤组织的生物量增长倍数为23.46倍,3-咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰宁酸、4,5-二咖啡酰宁酸三种绿原酸类化合物含量分别为0.30%、1.91%、1.10%,三者总含量3.31%,因此,通过紫薯愈伤组织培养生产绿原酸类化合物是可行的。

绿原酸类化合物的生物活性及其在畜牧生产中的应用

绿原酸类化合物是指咖啡酰奎宁酸类化合物,是由奎宁酸与不同数量的咖啡酸通过酯化反应缩合而成的酚酸类化合物,具有抗氧化、清热解毒、抗菌消炎、调节糖脂代谢等多种生物学功能。文章综述绿原酸类化合物的化学结构、主要来源、生物活性及其在畜牧生产中的应用,为绿原酸类化合物在畜牧养殖中的应用提供参考。

山银花中绿原酸类化合物的提取工艺优化

目的优化山银花中绿原酸类化合物的提取工艺。方法取一定量粉碎过筛后的山银花,通过单因素实验比较提取溶剂、提取料液比及提取次数对提取物的影响,以绿原酸类化合物的含量及干膏得率为评定指标,探讨适宜的提取工艺。结果以水为提取溶剂,按料液比1:20(m:V)煎煮2次,每次1h,煎液过滤,合并滤液,减压浓缩至相对密度为1.13～1.18(60℃),干燥后的山银花提取物,绿原酸类化合物的含量(95.04%)及干膏得率(42.17%)均较高。结论该提取方法简便可行,可作为山银花的粗取工艺。

甜叶菊毛状根的诱导培养及茉莉酸甲酯对其绿原酸类物质积累的影响

以发根农杆菌ACCC10060诱导甜叶菊毛状根,建立毛状根培养生产绿原酸类物质体系,研究茉莉酸甲酯对绿原酸类化合物积累的影响。经发根农杆菌ACCC10060侵染的甜叶菊叶片外植体,共培养14 d后产生毛状根。聚合酶链式反应检测结果表明,发根农杆菌Ri质粒的rol B和rol C基因已成功整合到甜叶菊毛状根基因组中。MS液体培养基较B5、WPM更利于甜叶菊毛状根生长及绿原酸类物质的积累,培养35 d后,干质量增加约30倍,绿原酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸最高含量分别为3.47、11.47、3.04 mg/g。毛状根在MS液体培养基中培养至第3周时分别添加15、45、100μmol/L的茉莉酸甲酯进行诱导,处理后第1、2、4、8天收获,毛状根的生长量和绿原酸类物质含量均有提高,其中以45μmol/L茉莉酸甲酯的促进作用最为显著,3种绿原酸类物质的总产量是对照组的2.68倍(P<0.01)。以上结果表明,甜叶菊毛状根培养可用于绿原酸类物质的生产,经茉莉酸甲酯处理可显著提高绿原酸类物质的产量。

高效液相色谱法同时测定植物饮料中7种绿原酸单体含量

建立了同时测定植物饮料中7种绿原酸单体含量的高效液相色谱法。样品经甲醇溶液超声提取,离心后过滤。经十八烷基键合硅胶柱和梯度洗脱程序分离,二极管阵列检测器进行检测。7种绿原酸在给定的范围内呈良好线性,相关系数R^2均大于0.999 3。仪器检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别为0.20~0.35 mg/L和0.80~1.20 mg/L。对样品进行三个水平浓度的加标回收实验,回收率在85.8%~95.7%之间,相对标准偏差(RSD)为5.24%~8.82%。说明方法均有操作简便,回收率高,精密度好等优点,适用于植物饮料中7种绿原酸单体含量的日常分析测定。

不同桃品种幼果炮制瘪桃干的抗氧化活性与药用适宜性研究

研究不同桃品种幼果炮制瘪桃干的绿原酸类化合物含量和抗氧化活性,为综合开发利用桃幼果提供参考。以33份桃品种幼果为试材,采用60℃烘干(HAD60)、冷冻干燥(FD)和日光干燥(SD)炮制瘪桃干,通过测定瘪桃干样品DPPH自由基清除能力、总抗氧化能力和总酚、新绿原酸(5-CQA)、绿原酸(3-CQA)和隐绿原酸(4-CQA)含量评价不同品种桃幼果的抗氧化活性和药用适宜性。结果表明:同一品种3种炮制方式总酚含量、DPPH自由基清除能力和总抗氧化能力大小顺序均为FD>HAD60>SD;SD处理瘪桃干样品总酚含量(用没食子酸当量表示,GE)、DPPH自由基清除能力(用Trolox当量表示,TE)和总抗氧化能力变异范围分别为2.96~19.54 mg/g、2.11~9.13 mg/g和24.83~108.96 mmol/kg;3种炮制方式制备的样品中5-CQA、3-CQA和4-CQA含量顺序均为FD>HAD60>SD;SD处理瘪桃干样品的5-CQA、3-QCA和4-QCA变异范围分别为0.27~6.23、0.38~3.75和0.14~1.69 mg/g;5-CQA、3-CQA和4-CQA含量均与抗氧化指标呈极显著正相关(P<0.01),其中5-CQA与与抗氧化指标的相关性最强;33份供试品种幼果适合炮制瘪桃干的有25份,其中毛桃17份,油桃6份,观赏桃2份;桃幼果药用适宜性最好的品种分别为锦春、锦花和中桃11号,部分特异油桃(188、中油20号和春蜜)和观赏桃(红叶桃和北京S9)因幼果富含绿原酸类化合物而较适合炮制成瘪桃干。

毛冬青根中4个绿原酸类及4个皂苷类成分的含量测定

目的:建立HPLC法同时测定毛冬青根中绿原酸,异绿原酸A、B、C,毛冬青皂苷A1、B1、B2,冬青素A共8个成分含量。方法:采用Inertsil ODS-4 C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈为流动相A,0.1%磷酸水溶液为流动相B,梯度洗脱,流速为1 mL·min^(-1),检测波长327 nm(绿原酸类成分)、210 nm(皂苷类成分)。结果:在上述条件下,绿原酸,异绿原酸B、A、C,毛冬青皂苷B2、A1、B1,冬青素A的质量浓度分别在1.25~12.5、2.96~29.6、3~30、3.45~34.5、13.05~130.5、32.4~324、16.95~169.5、72.8~728μg·mL^(-1)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率(n=9)均高于95%,RSD均小于3.0%。3批样品中上述8个成分测定结果分别为0.13~0.15、0.23~0.27、0.31~0.37、0.27~0.28、1.24~1.65、2.42~2.86、2.18~2.81、8.29~10.44 mg·g^(-1)。结论:该方法适用于同时测定毛冬青根中8个成分的含量。