PB设计-响应面优化橘绿木霉菌降解山西褐煤的工艺条件

以实验室从银耳种子中筛选出的橘绿木霉菌(Trichoderma citrinoviride)为实验菌株,以山西褐煤为实验材料,以山西褐煤的降解率为指标,优化橘绿木霉菌降解山西褐煤的工艺条件。在单因素试验的基础上,运用Plackett-Burman设计方法,筛选出对山西褐煤降解率具有显著影响的因素,最后运用Box-Behnken响应面试验建立各具有显著影响的因素之间的二次回归方程模型,从而得到理论上的橘绿木霉菌降解山西褐煤的最佳工艺条件。最佳降解工艺条件为:环境温度28.4℃,环境pH值6.48,接菌量6%(V/V),煤样粒度120~150目,煤浆浓度2.025 g·100 mL^(-1),降解时间24天。在该工艺条件之下,山西褐煤的降解率为(44.34±0.47)%。

绿木霉菌株TY009防治纹枯病等水稻主要真菌病害的潜力

【目的】研究绿木霉(Trichoderma virens)菌株TY009对水稻纹枯病、稻瘟病和稻曲病菌作用效果,以及其代谢产物胶霉毒素在不同温度和pH条件下的活性稳定性,评价菌株TY009防治水稻纹枯病和其它水稻主要真菌病害的生防潜力。【方法】用色谱法从绿木霉菌株TY009培养液中分离、纯化出胶霉毒素;采用对峙培养方法测定菌株TY009对水稻纹枯病菌的拮抗作用;采用常规抑制方法测定其代谢产物胶霉毒素对水稻纹枯病菌菌丝生长、菌核萌发的抑制作用,以及对稻瘟病菌孢子萌发、附着胞形成和稻曲病菌孢子萌发和次生孢子形成的影响;在不同温度、pH条件下测定胶霉毒素生物活性的变化。【结果】菌株TY009对水稻纹枯病菌有显著的拮抗作用。150μg·mL-1胶霉毒素完全抑制水稻纹枯病菌的菌丝生长;160μg·mL-1胶霉毒素处理菌核4h后,完全抑制了水稻纹枯病菌菌核的萌发;50和10μg·mL-1胶霉毒素分别完全抑制稻瘟病菌分生孢子萌发和附着胞的形成;1.0μg·mL-1胶霉毒素完全抑制稻曲病菌分生孢子萌发和次生孢子的形成。胶霉毒素在100℃处理60min后,其对水稻纹枯病菌菌丝的生物活性没有改变;在pH值大于6.0时,0.5μg·mL-1胶霉毒素对稻曲病分生孢子没有明显的生物活性,但低的pH孢子悬浮液中,胶霉毒素显著抑制分生孢子萌发和次生孢子的形成。【结论】绿木霉(T.virens)菌株TY009拥有多种生防机制,是一个潜在的、有效的生防菌株,具有应用防治水稻纹枯病并兼防稻瘟病和稻曲病的潜力。

培养条件对绿木霉菌几丁质酶分泌水平的调节

木霉菌（Trichoderma spp．）是一类重要的植病生防因子，该菌产生的包括几丁质酶在内的细胞壁降解酶，在木霉重寄生中起重要作用。该文采用正交试验方法研究了葡萄糖浓度、铵盐浓度、胶状几丁质三个因素及其交互作用对绿木霉菌（Trichoderma，Virens）几丁质酶分泌水平的影响，结果表明，低浓度葡萄糖（0．1％）和低浓度铵盐（10mmol／L）有利于几丁质酶的分泌，几丁质酶活性最高可达到6．83U；高浓度葡萄糖对几丁质酶的分泌有明显抑制作用，在3％葡萄精浓度条件下几丁质酶的分泌水平均小于0．45U，在高铵盐浓度（100mmo/L）时，几丁质酶分泌水平在0．59～1．29U；胶状几丁质的添加可在术霉菌丝体生长早期（培养前72h）诱导几丁质酶的分泌；葡萄糖与铵盐的交互作用能够显著提高几丁质酶的分泌水平。

Certis Biologicals推出生物绿木霉菌杀菌剂SoilGard■

为满足市场需求,美国农业生物公司Certis Biologicals近日宣布将通过可靠的零售商和分销渠道向全美50个州的种植者推广SoilGard■(绿木霉菌)。Certis Biologicals的生物杀菌剂产品可广谱预防性控制或抑制许多真菌和细菌性植物病害。SoilGard是一种微生物杀菌剂,是拥有一种易于使用的、含天然活性土壤真菌的颗粒剂,对植物病原真菌(如腐霉菌、丝核菌和镰刀菌)具有拮抗作用。该产品具备广泛的登记用途,包括温室、苗圃以及农业粮食作物和观赏植物。

褐环乳牛肝菌N94与绿木霉T43复合接种下红皮云杉苗木的生理响应

采用菌物学、植物生理学等研究方法,测定了不同接种条件下红皮云杉苗木生物量、菌根合成率等生长指标和生理指标以及抗氧化物酶、保护酶活性等抗逆指标,探讨了红皮云杉对褐环乳牛肝菌(Suillus leutus)N94与绿木霉(Trichoderma virens)T43复合接种条件下的生理响应。结果表明:N94与T43在红皮云杉根际具有良好的兼容性,N94 30 d+T43处理方式的菌根合成率与对照相比差异不显著(P>0.05),同时对红皮云杉促生抗逆效果最好。在生长指标方面:接种处理3个月后,其苗木鲜质量、干质量、苗高、地径与对照相比增加了26.02%、29.46%、33.37%和35.36%,苗木叶绿素a和叶绿素b含量提高41.96%和53.03%,可溶性蛋白含量提高24.29%;抗逆指标方面,其抗氧化酶SOD、POD和CAT活性与对照相比分别提高24.65%、60.09%和46.65%。上述结果表明,菌根菌与木霉菌互作能够对宿主植物起到促生抗逆作用。

绿木霉(Trichoderma virens)T23甲基转移酶基因gliN-T对胶毒素合成的调控研究

为探明绿木霉(Trichoderma virens)胶毒素合成的分子调控机制,本研究以绿木霉菌T23为研究对象,对农杆菌介导的遗传转化技术(Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation,ATMT)进行改良,并利用改良的ATMT技术对绿木霉菌T23胶毒素合成候选基因簇中的甲基转移酶基因gliN-T进行基因敲除,通过薄层色谱法及高效液相色谱法分析基因敲除突变体培养液中的胶毒素含量变化情况,明确gliN-T对胶毒素合成的调控作用。结果表明:在绿木霉菌T23分生孢子液中添加终浓度为15mg/mL的细胞壁裂解酶(Glucanex),30℃处理2~3h后用于农杆菌介导的遗传转化,每106个孢子转化子数从0.25个提高10个;利用改良的ATMT技术,成功获得基因敲除突变体ΔgliN-T。胶毒素检测结果发现:在野生型T23的24h培养液中未产生胶毒素,而在48、72、96h的培养液中均检测到胶毒素;在相同的条件下,ΔgliN-T在4个生长时期均无法产生胶毒素,表明gliN-T的缺失抑制了绿木霉菌T23胶毒素的合成,说明该基因在胶毒素合成途径中扮演着重要角色。

Infestation of Micromycetes on the Flowers and Seeds of Rhododendron sp.

The study of micromycetes infestation on flower buds, flower petals and seeds from 10 taxa of Rhododendron sp. was conducted during 2010-2012. Mycological analysis was comprised of 1,500 specimens of buds and petals and 500 seeds of Rhododendron sp.. It was shown that the necrosis and dieback of buds were caused by complex micromycetes （43 species）, with dominants Pestalotiopsis sydowiana, Alternaria alternata, Truncatella truncata and Epicoccum nigrum. Watery brown spots on the flower petals, resulting in the dieback of flowers, were caused by 38 species, including the most common P. sydowiana, A. alternata and Trichoderma viride. The seeds were contaminated by 18 species, and in addition to the above, the following species were associated： Oidiodendron tennuissimum, Davidiella macrocarpa and Phoma leveillei. The results of the mycological analysis confirmed the diversity spectrum of micromycetes species that inhabit the infested Rhododendron buds, flowers and seeds. The research revealed which taxa attracted the largest number of colonies and species of fungi.