云南木霉Trichoderma yunnanense不同处理发酵液对茶炭疽菌抑制活性的稳定性

为云南木霉在生物农药中的开发应用提供参考,在发酵条件为甘露醇18.85 g/L、酵母浸膏4.73 g/L、装液量93.15 mL/250 mL,发酵温度25℃、12 h光照/12 h黑暗、pH 6.6、转速150 r/min,发酵天数5 d的情况下,研究传代次数、金属元素、pH、温度、储藏时间、氧化还原剂等对云南木霉T.yunnanense发酵液的茶炭疽菌抑菌活性的影响。结果表明:云南木霉可稳定传代10次,其抑菌率可维持在85%以上,在Ca^(2+)、Zn^(2+)、Fe^(3+)等金属离子、pH为2.32~12.03、温度为-4℃及25℃储藏5~40 d、不同浓度氧化还原剂等条件下对云南木霉发酵液的抑菌活性影响不显著,其抑菌率均可维持在85%以上。云南木霉T.yunnanense的环境适应性较好,可在极端环境下维持较高的茶炭疽菌抑菌效果,具有较好的应用价值。

绿色木霉菌发酵液对杧果炭疽菌胞内抗性酶活性的影响

【目的】为了探索绿色木霉菌(Trichoderma viride)发酵液对杧果炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)胞内抗性酶活性的影响,【方法】以C.gloeosporioides为供试菌,加入T.viride发酵液,终浓度为MIC50值(1.0%v/v),测定0.0～30.0 h内C.gloeosporioides胞内CAT、POD、PPO、SOD、PAL和脱氢酶活力。【结果】T.viride发酵液抑制胞内抗性酶活性,致使细胞膜保护系统损坏,胞内物质大量外泄,最终抑制或杀死病菌。经T.viride发酵液处理的C.gloeosporioides,30 h后,胞内CAT、POD、PPO、PAL和脱氢酶活力分别比对照组低52.54%、23.62%、58%、6.38%、6.52%、44.74%。【结论】T.viride发酵液可显著降低C.gloeosporioides胞内抗性酶活力,抑制C.gloeosporioides生长。

绿色木霉菌固体发酵培养基优化组合正交筛选

以测定绿色木霉菌产孢量和分生孢子萌发率为指标,分析比较了5种单一固体培养基和7种一般组合固体培养基的发酵结果,初筛出单一培养基玉米碎粒、稻壳和麸皮以及一般组合培养基玉米碎粒+麸皮+稻壳+脲为基本培养基。在此基础上选取玉米碎粒、麸皮、稻壳、脲为4个组分因子进行不同配比的正交试验,筛选出6号为最佳组合配方,其分生孢子量最高为9.90×1010个/g,比初筛出的最佳基本培养基麸皮+脲(3.37×1010个/g)提高约3倍,孢子萌发率为95.01%。

绿色木霉菌发酵液对杧果炭疽菌的生长抑制及细胞损伤作用

【目的】为探求绿色木霉菌发酵液对杧果炭疽菌的抑制机制,【方法】以杧果炭疽菌为供试菌,研究绿色木霉菌及其发酵液对杧果炭疽菌菌丝生长、孢子萌发、无机磷的吸收、细胞通透性的影响。【结果】绿色木霉菌发酵液处理后杧果炭疽菌菌丝严重枯萎变形;处理24 h,孢子萌发率比对照组低86.40%;无机磷吸收基本停止;核酸、蛋白质等大分子渗漏严重;杧果炭疽菌胞内可溶性蛋白及还原糖含量明显少于对照组。【结论】绿色木霉菌发酵液能够破坏杧果炭疽菌细胞的完整性,抑制杧果炭疽菌生长。

绿色木霉菌发酵液对芒果采后炭疽病的抑制作用及保鲜效果

【目的】研究绿色木霉菌发酵液处理对芒果采后炭疽病的抑制作用及保鲜效果。【方法】以紫花芒果为材料,通过对照、发酵液处理、损伤接种与损伤接种+发酵液处理4组的比较,测定绿色木霉菌发酵液处理对芒果果实采后炭疽病发生率、色泽指数、可溶性固形物(TSS)含量、可滴定酸(TA)含量、丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(POD)活性、多酚氧化酶(PPO)活性、总酚含量的影响。【结果】在33℃、相对湿度75%～80%条件下,绿色木霉菌发酵液处理可降低芒果炭疽病的发生率。贮藏7d时,对照、发酵液处理、损伤接种、损伤接种+发酵液处理组的发病率分别为64%,58%,87%和79%;发酵液处理、损伤接种+发酵液处理组色泽指数、MDA含量分别比对照、损伤接种组低7.99%和3.16%,23.97%和12.53%;TSS、TA、POD、PPO和总酚分别比对照、损伤接种组高20.34%和13.69%,43.71%和7.49%,17.04%和25.20%,39.47%和14.71%,18.70%和23.75%。以上指标差异均达显著水平(P<0.05)。【结论】绿色木霉菌发酵液可有效抑制芒果采后炭疽病的发生,并具有明显的保鲜效果。

绿色木霉菌发酵液对杧果采后炭疽病抑制及活性氧代谢的影响

【目的】研究绿色木霉菌发酵液对杧果果实采后炭疽病抑制及活性氧代谢的影响。【方法】以广州产‘紫花芒’果实为材料,经绿色木霉菌发酵液处理,33℃室温储藏,测定杧果果实腐烂指数、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶活性,以及过氧化氢、超氧阴离子、还原型谷胱甘肽和抗坏血酸的含量。【结果】绿色木霉菌发酵液处理后,杧果果实第9天腐烂指数比对照组低40.26%,过氧化氢,超氧阴离子、还原型谷胱甘肽、抗坏血酸含量及过氧化氢酶、超氧化物歧化酶活性分别比对照组健康组织、腐烂组织高13.16%、24.34%;6.67%、11.61%;11.15%、21.74%;5.29%、7.94%;15.68%、30.76%;13.64%、22.73%。【结论】绿色木霉菌发酵液处理可增强杧果果实采后活性氧代谢,显著抑制炭疽病的发生。

绿色木霉菌T-YY黄色素的稳定性研究

为开发一种新型的、功能性天然食品添加剂,该文以绿色木霉菌T-YY发酵液冻干粉(色素粗品)为试验材料,初步研究其紫外-可见光谱性质与稳定性。结果表明,色素粗品中至少含有4种以上不同性质的黄色素,该黄色素易溶于水和醇,色价高,在紫外区及可见光区各有一个吸收峰,最大吸收波长分别为286.5 nm和380 nm;在酸碱环境中色调保持亮黄色,其水溶液在pH<5.0时出现浑浊,在pH≥5.0时呈亮黄色;pH值3.0～9.0色素溶液在室内自然光(25℃)下放置7 d后色调稳定;热稳定性好,100℃加热30 min色素保留率达到90.2%;抗H2O2、HNO3氧化能力强,但不耐Na2SO3还原作用。Fe3+、Cu2+和Mn2+的对色素具有消褪作用,Fe2+、Mg2+、Zn2+、Ca2+、K+、Na+则对其有不同程度的保护和增色作用。试验表明,绿色木霉T-YY黄色素在稳定性上呈现出一定优势,因此具有较大的开发潜力。

绿色木霉菌发酵液对芒果采后病害及品质的影响

研究木霉菌发酵液对控制芒果采后病害及腐烂的作用。以紫花芒果果实为材料,使用绿色木霉菌(Trichoderma viride Pers.ex Fr.)发酵液涂抹果实,于(30±5)℃、相对湿度90%～95%贮藏,测定果实病斑数及面积、硬度和色泽指数。结果表明:紫花芒果贮藏至第9天,T.viride发酵液处理组腐烂指数仅为31.1%,对照组腐烂指数则达51.9%;损伤接种至7d时,T.viride发酵液处理组的病斑面积比对照组的小69.7%;贮藏至30d,T.viride发酵液处理的芒果自然发病率较清水处理组的低36.7%。T.viride发酵液处理组的芒果在贮藏6d后变软,比对照组延缓了3d。T.viride发酵液混合CMC处理的果实转黄速度较对照组延缓了3d。T.viride发酵液可显著减低损伤接种芒果的腐烂指数、病斑面积和接种发病率。

绿色木霉菌产黄色素液态发酵条件的优化

以绿色木霉菌(Trichoderm aviride)为试验菌株,在培养基碳源、氮源组成,装液量,摇床转速,接种量,培养时间及培养温度等单因素试验的基础上,采用Box-Behnken设计及响应面分析法优化T.viride产天然黄色素的培养基组成和发酵工艺条件。结果表明,在试验范围内,T.viride产黄色素的优化培养条件为:马铃薯液态培养基(250g.L-1马铃薯浸汁,2g.L-1Na2HPO4),外加碳源选择21.7g.L-1木糖,摇瓶装液量为50ml.(250ml)-1,培养温度35℃,接种量6%(体积),摇床转速120r.min-1,培养时间152h。在优化培养条件下发酵液黄色素的色价为(52.8±0.8)U.ml-1。马铃薯培养基中添加尿素、硫酸铵、蛋白胨、牛肉浸粉等氮源会抑制黄色素的生成。

绿色木霉菌剂及其在有机食品花生的应用

自食用菌子实体上分离得到绿色木霉(Trichodermaviride)菌株,并对菌体形态进行了研究。研制出绿色木霉制剂,用其在有机食品花生试验示范,拌种和叶面喷洒防治花生主要叶斑病和花生菌核病(Rhizoctoniasolani),增产效果和防病效果显著,不污染环境,利于保持生态平衡,是花生病害生物防治较理想制剂。

绿色木霉菌发酵液对杧果采后病害生理的影响

【目的】为了探讨绿色木霉菌发酵液处理对卡亡果采后病害生理的影响，【方法】以紫花卡亡果为试验材料，利用绿色木霉菌（rviride）发酵液对柁果进行处理，测定卡亡果采后生理指标的变化。【结果】结果表明，在（30±2）℃、RH90％～95％条件下．Zviride发酵液处理可降低采后卡亡果的呼吸强度，并使其呼吸高峰推迟1d。处理组果实可溶性固形物的最大值出现在第8天，比对照组推迟了2d；其健康组织维生素C第3天上升至最高含量，分别达164mg·kg^（-1）和173mg·kg^（-1），而对照组和处理组的病斑周围组织的维生素C含量在0～9d内均呈现下降趋势。Zviride发酵液处理延缓了病斑周围组织的可滴定酸下降，损伤接种至第6天，处理组果实病斑周围的可滴定酸为0．36mg·g^（-1），高出对照组16％。处理组病斑周围的蛋白质含量最高峰出现在第6天，比对照组延迟1d。zviride发酵液处理降低了杧果组织丙二醛含量，处理组和对照组的最大值分别为4．18μmol·L^（-1）、5．23μmol·L^（-1）；贮藏1-9d，处理组和对照组的总酚含量差异不显著。【结论】绿色木霉菌发酵液处理能有效减缓柁果采后病害生理活动。

绿色木霉菌发酵液萃取物对金黄色葡萄球菌细胞膜的损伤作用

研究绿色木霉菌发酵液的萃取物对金黄色葡萄球菌的抑制活性,及其对细胞膜的损伤作用。通过抑菌实验、细胞裂解率测定、细胞膜渗透性测定、SDS-PAGE蛋白谱变化等对绿色木霉菌发酵液萃取物的抑菌活性和其对细菌细胞膜损伤的作用进行研究。石油醚、乙酸乙酯以及正丁醇萃取物对金黄色葡萄球菌均有抑制活性,其中,正丁醇萃取物的抑菌活性最强,抑菌圈直径(25.27±0.65)mm,最低抑菌质量浓度(MIC)为0.625mg/mL。经过正丁醇萃取物处理后,菌体细胞裂解率增加,细菌培养液的电导率、蛋白质以及还原糖含量显著增加,SDS-PAGE分析证明正丁醇萃取物可以阻碍金黄色葡萄球菌细胞膜蛋白质的正常表达。正丁醇萃取物可破坏金黄色葡萄球菌细胞膜的结构,导致细胞膜通透性增加,改变细胞膜功能,从而抑制其生长。

绿色木霉菌和抗生素溶杆菌对苗期及大田烟草影响的研究

采用绿色木霉菌和抗生素溶杆菌菌剂对苗期和大田期烟草进行喷施处理,研究它们对烟草农艺性状及黑胫病、野火病发病情况的影响.结果表明:苗期喷施质量浓度为2.50 g/L的绿色木霉菌菌剂,对提升烟草素质效果好;大田期喷施质量浓度为2.50 g/L的抗生素溶杆菌菌剂,对提高大田烟草农艺性状的各指标效果好;抗生素溶杆菌菌剂对大田烟草野火病防治效果较好,而绿色木霉菌菌剂对大田烟草黑胫病的防治效果较好,它们的最佳喷施质量浓度都是2.50 g/L.

绿色木霉菌发酵液对金黄色葡萄球菌的抑制作用

应用绿色木霉菌(T.viride)发酵液抑制金黄色葡萄球菌。结果表明:T.viride发酵原液对金黄色葡萄球菌抑菌圈直径达到(29.77±0.03)mm,最低抑菌质量浓度(MIC)和最低杀菌质量浓度(MBC)为2.0μg/mL和4.0μg/mL,均小于苯甲酸钠溶液的MIC(8.0μg/mL)和MBC(10.0μg/mL);经过发酵液处理12h后,金黄色葡萄球菌总量比对照组下降42%;发酵液处理2h后菌体细胞对磷的消耗逐渐停止。发酵液经100℃、1h处理,抑菌率仍可达82.64%。在介质pH7～8时抑菌效果最好,抑菌率保持在90%以上。T.viride发酵液能有效抑制金黄色葡萄球菌的生长过程和菌体细胞对磷的消耗,且热处理对其抑菌活性影响较小。

响应面优化绿色木霉菌培养基

利用响应面分析法对绿色木霉菌的培养基进行优化。通过测量不同营养条件下绿色木霉菌落生长直径研究其生物学特性,在单因素实验的基础上,选定葡萄糖添加量、丙氨酸添加量和磷酸二氢钾添加量3个因素进行中心组合实验,建立二次回归方程,并应用响应面分析法进行优化。结果表明,绿色木霉菌最佳培养基为葡萄糖2.11 g/dL、丙氨酸0.15 g/dL、磷酸二氢钾0.30 g/dL。在此条件下培养的绿色木霉菌菌落生长直径达到78.00 mm,与预测值77.87 mm接近(CI>95%)。

绿色木霉菌对丝核菌多聚半乳糖醛酸酶活性的影响

就丝核菌(Rhizoctonia)胞外多聚半乳糖醛酸酶(Polygalacturonase,PG)及绿色木霉菌(Tricho dermaviride)对PG活性的影响进行了研究.结果表明,双核禾谷丝核菌(Rhizoctoniacerealis)AG D融合群WK 47、WK 141、WK 160菌株,多核立枯丝核菌(R.solani)AG1 IA融合群YW 2菌株的胞外PG有较高的活性,不同核型的丝核菌胞外PG的活性差异显著;绿色木霉菌TCS 1菌株不同时间的发酵液对PG的活性具有明显的抑制作用.

绿色木霉菌液态发酵产黄色素动力学模型的建立

为构建绿色木霉菌液态发酵产黄色素动力学模型,在绿色木霉菌分批发酵过程中测定了菌体干重、总糖浓度、黄色素色价和pH变化,使用Origin软件将经典发酵动力学方程拟合后得到绿色木霉菌菌体生长、黄色素合成和基质消耗的动力学模型及参数。结果表明,模型与实验数据两者能较好地拟合,可以较好地预测发酵过程。

绿色木霉菌T23对微量元素吸收利用的初步研究

利用原子吸收光谱和常规生长量测定法,研究了木霉菌T23对7种微量元素Mn2+、Ca2+、Mg2+、Cu2+、Zn2+、Fe2+、Mo6+的吸收利用及7种微量元素对木霉菌T23生长的影响。结果表明:木霉菌T23对7种微量元素的吸收率存在明显差异,能够大量吸收Mg2+、Zn2+、Cu2+、Ca2+、Mn2+和Fe2+,基本不吸收Mo6+元素。在微量元素对木霉菌T23生长的影响方面,则表现为Ca2+、Mn2+、Zn2+可不同程度地促进木霉菌T23产孢,Cu2+、Mn2+、Mg2+、Ca2+、Zn2+在组合培养基中促进木霉菌T23菌丝生长,Mo6+抑制木霉菌T23的菌丝生长和产孢。

木耳杂交菌株对绿色木霉菌的抗性测定

木耳(Auricularia auricula-judae)在菌丝体阶段极易感染绿色木霉(Trichoderma vider)等多种杂菌。本研究以木耳176个杂交子为供试菌株,采用木耳与绿色木霉菌丝体对峙培养,发酵液相互抑制菌丝体生长,以及调查木耳菌袋田间污染率,比较了杂交子抗绿色木霉的能力,初步建立了木耳抗霉菌污染能力的技术体系。

绿色木霉制霉菌素抗性菌株的紫外光诱导

生防菌进入土壤中所在的位置及定殖的能力大小是制约生防菌剂能否商业化应用的主要原因。为了获得耐药性绿色木霉,进一步确定该生防菌在土壤中的定殖能力,通过紫外光照射诱变野生型绿色木霉菌株,结合使用含制霉菌药培养基进行耐药性筛选,得到了绿色木霉抗性突变菌株,制霉菌素的最低抑菌浓度为1×10-2g/mL。抗性菌株在无药培养基上连续转移培养8次,抗性程度未见下降,但生长速度降低。抗性菌株保持了对魔芋软腐病的拮抗能力。同时表明,耐药性木霉菌株在土壤中的定殖密度随时间的变化呈现先上升后下降的趋势。