绿萝花对糖尿病的保护作用机制研究进展

绿萝花是瑞香科结香属植物滇结香的干燥花蕾,多用于治疗糖尿病、高血脂、高血压、冠心病及各种血管炎。西药对糖尿病的降糖效果明显,但长期服用有明显的不良反应,中药治疗糖尿病副作用小,效果佳,但其部分药效成分、治疗机制不明。现已有实验研究证明绿萝花通过抑制α葡萄糖苷酶、过氧化物酶体增殖物激活受体激动作用、肠道菌群及抗氧化作用来降血糖。本文着重对绿萝花治疗糖尿病的作用机制进行综述,以期能够为进一步研究绿萝花功效作用机制、为绿萝花临床治疗糖尿病的药物开发提供参考。

藏药绿萝花中银椴苷的提取工艺研究

文章为探究5种大孔树脂对绿萝花中银椴苷的静态吸附与解吸能力,以银椴苷含量为指标,考察树脂的动态吸附与洗脱参数,从而精选出上样及洗脱条件。结果表明,AB-8型大孔树脂适合富集纯化绿萝花中的银椴苷,其最佳上样和洗脱条件为:上样质量浓度为2 mg/mL、上样液体积为60 mL、乙醇洗脱液体积分数为70%、洗脱剂体积为50 mL。由此可知大孔吸附树脂法可用于提取藏药绿萝花中的银椴苷。

西藏绿萝花提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制及抗氧化作用

目的:研究西藏绿萝花提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制及抗氧化作用。方法:将西藏绿萝花的70%乙醇提取物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,然后测定各部分对α-葡萄糖苷酶的抑制及抗氧化作用。结果:乙酸乙酯的萃取部分对α-葡萄糖苷酶的活性抑制较强,半数抑制浓度IC50为43.63μg/mL,比阿卡波糖抑制α-葡萄糖苷酶的IC50值250μg/mL低的多,抵制动力学表明为竞争性抑制,Ki值为21.49μg/mL;乙酸乙酯及正丁醇萃取部分具有较强抗氧化作用,0.42μg/mL的乙酸乙酯及正丁醇萃取部分对DPPH.自由基的清除率分别可达到88.5%、93.6%,与0.3 mg/mL的抗坏血酸对DPPH.自由基的清除率96.3%相当;乙酸乙酯萃取部分对氧自由基亦有一定的清除作用,IC50为0.27 mg/mL。结论:西藏绿萝花醇提取物的乙酸乙酯萃取部分有较强的α-葡萄糖苷酶抑制及抗氧化作用;正丁醇萃取部分有较强的抗氧化作用。

藏药绿萝花不同活性部位降血糖实验研究

目的:观察藏药绿萝花不同提取部位的降血糖活性。方法:分别采用四氧嘧啶小鼠糖尿病模型、肾上腺素及高浓度葡萄糖致小鼠高血糖模型,以及正常小鼠,观察绿萝花的降血糖活性。结果:绿萝花的乙酸乙酯和正丁醇部位均能不同程度降低上述不同糖尿病动物模型的空腹血糖,而对正常小鼠空腹血糖无明显影响。结论:藏药绿萝花具有明显的降血糖活性,尤以乙酸乙酯和正丁醇部位疗效较佳。

西藏绿萝花中矿质元素的分析测定

采用HNO3/H2O2湿法微波消解制样,利用全谱直读电感耦合等离子原子发射光谱法(ICP-OES),全面详细地分析测定西藏绿萝花中的矿质元素,共检出K、P、Ca、Mg、S、Al、Si、Fe、Na、Mn、Zn、Sr、B、Ba、Cu、Ti等16种矿质元素。分析结果相对标准偏差(RSD)值,除Ti元素外,其余15种都在4%以内;加标回收率在90.3%～110.9%之间,其中10种元素在(100±5)%范围内。绿萝花中所含人体常量元素K、P、Ca、Mg、S、Na等的质量分数分别为0.66%、0.40%、0.27%、0.23%、0.17%和0.004%;微量元素Fe、Zn、Cu、Si、Mn、B等的质量分数分别为48.4、30.8、6.5、151.0、36.3、16.5 mg/kg。

藏药绿萝花体外抑制肿瘤细胞生长的实验研究

目的探讨藏药绿萝花的体外抗肿瘤细胞作用,为其临床合理用药和进一步开发利用提供科学依据。方法以L9(34)正交设计试验所获得的绿萝花水萃取干膏制剂为研究材料,以来源于不同组织器官的人肺腺癌细胞株A549、肝癌细胞株Hep G2、胃癌细胞株SGC7901、恶性黑色素瘤细胞株MM-A375、神经母细胞瘤细胞株SHEP1为研究对象,采用瘤细胞生长曲线、细胞形态、软琼脂克隆实验及细胞凋亡检测方法,研究绿萝花体外抗肿瘤细胞生长的作用。结果绿萝花对5种肿瘤细胞生长均有抑制作用,其IC50分别为1 708.58、550.04、467.39、1 084.25、1 805.42μg/m L,其中对肝癌细胞株Hep G2、胃癌细胞株SGC7901抑制效果最好,且500μg/m L绿萝花干膏制剂能引起SGC7901瘤细胞皱缩、细胞形态变圆、细胞周围变亮、细胞克隆数量减少和克隆体积变小,并能引起38.41%的SGC7901瘤细胞凋亡。结论绿萝花干膏制剂在体外通过抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡而产生抗肿瘤作用,并具有剂量、时间依赖性。

绿萝花化学成分及其抗氧化活性

目的研究绿萝花Edgeworthia gardneri(Wall.) Meisn.的化学成分及其抗氧化活性。方法绿萝花乙醇提取物采用硅胶、MCI、反相ODS柱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱等进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。再采用DPPH法评价其抗氧化活性。结果从中分离得到12个化合物,分别鉴定为白瑞香素(1)、瑞香素(2)、西瑞香素(3)、伞形花内酯(4)、东莨菪内酯(5)、7-(2,3-环氧-3-甲氧基丁氧基)-香豆素(6)、异莨菪内酯(7)、5-十五烷基间苯二酚(8)、3,4-二羟基苯甲酸(9)、异绿原酸B(10)、异绿原酸C(11)、异槲皮苷(12)。所有化合物EC500.131~0.713μmol/L。结论化合物5~11为首次从该植物中分离得到。所有化合物均有良好的抗氧化活性,其中9~11与阳性对照品相当。

藏药绿萝花水提物对小鼠免疫功能的影响

探讨藏药绿萝花对机体免疫功能的影响,为临床合理用药和进一步开发利用提供科学依据.本研究以L9(34)正交设计试验所获得的绿萝花水萃取干膏制剂为研究材料,以N2Hmice小白鼠为研究对象,以Con A诱导小鼠淋巴细胞转化试验(CCK-8法)、血凝和血凝抑制试验及巨噬细胞吞噬试验为研究方法,以(SI)刺激指数、(HI)新城疫抗体效价、吞噬百分率和吞噬指数为检测指标,探讨不同剂量绿萝对机体免疫功能的影响.实验结果显示低剂量绿萝花能够增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指数,其增强作用极显著优于空白组;低、中剂量绿萝花组具有促进小鼠血清ND抗体产生的作用,作用显著优于空白组;低、中剂量绿萝花组具有促进小鼠外周血淋巴细胞增殖的作用,作用显著优于空白组.研究结果表明低(1.08g/次/d,7d)、中(2.16g/次/d,7d)剂量绿萝花对小鼠免疫功能具有增强作用.

藏药绿萝花对高血糖小鼠模型的治疗试验

研究藏药绿萝花对高血糖动物模型的治疗作用,为临床合理用药和进一步开发利用提供科学依据。采用饲喂高糖高脂饲料和注射链脲佐菌素(STZ)建立ICR小鼠高血糖动物模型,将实验动物分成对照组、模型组、二甲双胍(250mg/kg)组及绿萝花提取物组(剂量分别为50、25、12.5g/kg),分别在造模试验的第14天、第21天、第28天,以及治疗试验的第14天、第21天、第28天,以空腹血清血糖含量、血清胰岛素含量为检测指标,研究造模因素和不同剂量绿萝花对血糖的影响。连续饲喂高糖高脂饲料,结合STZ注射,造模小鼠表现为体重下降、血糖升高、胰岛素含量下降;表明3个剂量绿萝花组均具有降血糖的作用,12.5g/kg剂量组连续服用绿萝花14d后降血糖作用明显,50g/kg剂量组连续口服绿萝花7d^14d,显著提高成模小鼠血清胰岛素含量。连续饲喂高糖高脂饲料(配方:蔗糖∶猪油∶奶粉∶鸡蛋∶猪胆酸盐∶普通饲料=30∶20∶4∶2∶0.05∶63)14d^28d,结合STZ注射的造模方法成功获得了Ⅱ型糖尿病动物模型;绿萝花通过降低成模小鼠血糖含量、升高成模小鼠血清胰岛素含量而对Ⅱ型糖尿病动物模型具有治疗作用。

绿萝花水溶性多糖体外抗肿瘤的实验研究

目的:探讨藏药绿萝花水溶性多糖体外抗肿瘤作用,为绿萝花进一步开发利用提供科学依据.方法:以绿萝花水溶性多糖为研究材料,以S180腹水瘤细胞株、HepA 1-6小鼠肝癌细胞株和L1210小鼠白血病细胞株为研究对象,以CCK-8法、AO/EB染色法和Annexin V/PI双染法流式细胞术为主要检测手段,以肿瘤细胞生长、肿瘤细胞形态、肿瘤细胞凋亡等为考核指标,研究藏药绿萝花水溶性多糖的体外抗肿瘤作用.结果:S180腹水瘤细胞为绿萝花水溶性多糖敏感细胞,1000.0μg/mL抑制率为71.38%;不同剂量绿萝花水溶性多糖均具有诱导S180细胞发生凋亡,均可以上调瘤细胞的早期和晚期凋亡率,1000.0μg/mL效果最好,凋亡率达到26.60%.结论:藏药绿萝花水溶性多糖具有体外诱导肿瘤细胞凋亡作用,作用相当于5-FU.

绿萝花及其多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤免疫相关因子的影响

目的探讨藏药绿萝花及绿萝花多糖对机体肿瘤免疫功能的影响,为绿萝花进一步开发利用提供科学依据。方法以S180荷瘤小鼠为研究对象,绿萝花水浸膏和水溶性粗多糖为研究材料,环磷酰胺为阳性对照,以肿瘤生长抑制率、胸腺指数、脾脏指数、白细胞介素-2(IL-2)、抗肿瘤坏死因子(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)为检测指标。结果小鼠在接种S180肉瘤细胞后,血浆中IL-2、TNF-α、IFN-γ含量明显下降;灌服环磷酰胺后,胸腺指数和脾脏指数均下降,以脾脏指数下降明显,血浆IL-2、TNF-α、IFN-γ含量升高;囗服不同剂量绿萝花水浸膏及多糖后,胸腺指数和脾脏指数均增加,血浆IL-2、TNF-α、IFN-γ含量明显升高,尤以中剂量绿萝花水浸膏和多糖更为明显。结论不同剂量绿萝花及绿萝花多糖均具有抑制S180肉瘤生长的能力,均上调荷瘤小鼠血浆IL-2、TNF-α、IFN-γ的水平以增强机体的抗肿瘤效果,1.0 g/(kg·d)绿萝花干膏和100 mg/(kg·d)绿萝花多糖连续灌服14 d效果最好。

藏药绿萝花中总黄酮含量的提取工艺研究

以藏药绿萝花为试材,以乙醇为提取剂,采用回流提取法,按正交实验设计,研究了绿萝花中总黄酮提取的最佳工艺。结果表明:影响绿萝花中总黄酮提取的因素大小依次为:料液比>提取时间>乙醇浓度,最优的提取工艺是料液比为1∶12,提取时间90min,乙醇浓度75%,绿萝花中总黄酮含量达0.976%。

绿萝花总多糖对小鼠免疫功能的增强作用

目的考察绿萝花总多糖对小鼠免疫功能的增强作用。方法小鼠灌胃不同剂量(0.05、0.10、0.20 g/m L)总多糖后,进行淋巴细胞转化实验、迟发型变态反应实验、抗体生成细胞检测、血清溶血素测定、碳廓清实验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、自然杀伤细胞(NK细胞)活性测定。结果绿萝花总多糖能显著促进小鼠淋巴细胞转化,加强迟发型变态反应,提高抗体生成细胞数量,增加NK细胞活性。结论绿萝花总多糖能增强小鼠免疫功能。

藏药绿萝花总化学成分水提工艺试验

为了确立藏药绿萝花总化学成分的水提工艺,给绿萝花药理研究和开发利用提供研究材料。采用L9(34)正交表设计试验,结合单因素考察,对药材浸泡时间、加水量、煎煮时间和煎煮次数4个影响因素进行优化。结果以水提后的总化合物干膏重量为评价指标,最终确定水提工艺为:浸泡时间0.5 h,加水量20倍,加热时间1 h,煎煮次数3次。表明水提工艺组合稳定可靠,水提干膏平均收率为23.11%(23.12%、23.17%、23.05%),均接近正交方案中的最高值。

西藏绿萝花总多糖提取的动力学模型研究

目的以Fick第二扩散定律为基础,为西藏绿萝花总多糖的提取工艺建立动力学模型。方法以单因素实验为基础,将总多糖提取率作为考察指标,将测定结果代入数学模型进行拟合。结果从建立的提取动力学模型的基础上推算出提取绿萝花总多糖的速率常数﹑表观活化能﹑半衰期和扩散系数等函数值。以Fick第二扩散定律为基础,求出活化能为14.794 kJ·mol^(-1),半衰期线性方程为t_(1/2)=1356.8exp^(-0.014x),扩散系数回归方程为1×10^(-4)Ds=0.0002exp^(0.0133x)。结论为西藏绿萝花总多糖提取建立了提取动力学模型,得到了提取工艺过程中控制性参数。

超临界CO_2提取绿萝花中总黄酮的工艺研究

采用超临界CO_2提取绿萝花中总黄酮,考察了提取温度、提取压力、提取时间、夹带剂种类、浓度及流速对提取效果的影响。结果表明,最佳工艺条件为:提取温度50℃,提取压力30 MPa,提取时间2 h,夹带剂浓度80%的乙醇,流速0.4 m L/min。在此条件下,黄酮的提取率和纯度分别为0.868%,8.298%,该方法绿色环保、快速高效。

绿萝花黄酮对糖尿病周围神经病变小鼠运动神经传导速度及NF-κB信号通路的影响

目的:探究绿萝花黄酮对糖尿病周围神经病变(DPN)小鼠运动神经传导速度以及NF-κB信号通路的影响。方法:将90只C57BL/6小鼠随机分为空白组10只和高脂高糖组80只,采用高脂高糖饲料联合链脲佐菌素(STZ)建立DPN模型,造模成功的小鼠随机分为模型组、阿卡波糖组(150 mg/kg)和绿萝花总黄酮高、中、低剂量组(200、100、50 mg/kg)各13只,治疗不同时间(10、20、40 d)时比较各组小鼠体重、血糖、坐骨神经运动神经传导速度(MNCV)和感觉神经传导速度(SNCV)及热痛反应敏感程度,血清TNF-α、IL-1β水平,坐骨神经组织形态学和NF-κB信号通路体内表达水平;培养乳鼠坐骨神经原代施万细胞,分为正常组、LPS组、LPS+阿卡波糖组(40μg/ml)、LPS+绿萝花总黄酮高、中、低剂量组(80、40、20μg/ml),药物干预后检测不同时间(12、24、48 h)细胞上清液中TNF-α、IL-6水平和NF-κB信号通路蛋白、基因表达水平。结果:体内实验结果表明,治疗40 d,与模型组比较,阿卡波糖组、绿萝花黄酮高、中剂量组小鼠体重逐渐升高(P<0.05),血糖水平逐渐降低(P<0.05),热痛反应时间、坐骨神经MNCV、SNCV逐渐缩短(P<0.05),坐骨神经病理改变得到不同程度改善;体内外实验结果均显示,阿卡波糖以及高、中剂量绿萝花黄酮干预后TNF-α、IL-1β水平逐渐降低(P<0.05),NF-κB p65蛋白表达量和p-IKKβ/IKKβ、p-IKKα/IKKα比值以及NF-κB、IKKβ、IKKα、NF-κB p65的mRNA相对表达量均逐渐减少(P<0.05)。结论:绿萝花黄酮可降低DPN小鼠血糖水平,改善运动、感觉神经传导速度,减轻坐骨神经炎症反应,可能与抑制NF-κB信号通路相关。

藏药绿萝花挥发性成分GC-MS分析

目的:研究藏药绿萝花的挥发性成分。方法:采用水蒸气蒸馏法提取绿萝花挥发油,并用GC-MS进行测定,结合计算机检索技术对分离的化合物进行结构检索,应用色谱面积归一化法计算各成分的相对含量。结果:从绿萝花中检索出27种化学成分,其中相对百分含量大于5%的组分分别检定为十四烷酸、邻苯二甲酸二丁酯、9,12-十八烷二烯酸甲酯。结论:该植物中27个挥发性成分均为首次报道,占挥发油气化产物的95.14%。

藏药绿萝花抗氧化作用实验研究

研究藏药绿萝花抗氧化作用,为临床合理用药和开发利用提供科学依据。采用注射D-gal法模拟小鼠衰老进程,并将实验动物分成空白组、模型组、绿萝花高剂量组(2 g/m L)、绿萝花中剂量组(1 g/m L)、绿萝花低剂量组(0.5 g/m L),分别在实验的第0、7、14、21、28、35、42天,以小鼠血清SOD、MDA为动态指标及42 d大脑、心、肝组织SOD、MDA、T-AOC、GSH-Px、MAO、CAT为检测指标,研究绿萝花的抗氧化作用。结果表明,连续注射D-gal 14-42 d,模型小鼠血清SOD活性下降、MDA含量上升;连续同时服用绿萝花口服液14 d后小鼠血清SOD活力显著提高,以低剂量绿萝花作用最显著;连续服用绿萝花14 d后小鼠血清MDA含量显著降低,以高剂量绿萝作用最显著;连续服用绿萝花42 d后,小鼠血清T-AOC活力升高,大脑、心、肝SOD、T-AOC、CAT、GSH-Px活性上升,MAO活性下降,MDA含量下降。结果表明,连续口服绿萝花能改善由注射D-gal引起的小鼠抗氧化指标的异常,提示绿萝花可能具有抗机体衰老作用。

藏药绿萝花超临界萃取工艺优化及降血糖作用研究

目的:筛选超临界CO2流体萃取藏药绿萝花挥发性成分的最佳工艺,并研究萃取物的降血糖作用。方法:采用正交试验设计,以萃取物得率为指标,考察萃取压力、萃取温度、解析压力及解析温度四个因素的影响;采用单次给药和多次给药的方式研究绿萝花提取物对正常大鼠和四氧嘧啶糖尿病大鼠血糖的影响。结果:最佳萃取工艺条件为萃取压力20Mpa、萃取温度45℃、解析压力8Mpa、解析温度50℃;糖尿病大鼠血糖显著降低,并呈现良好的剂量关系。结论:提取工艺简单可行,适用于工业化生产。绿萝花萃取物具有显著的药理作用,具有一定的研究开发价值。