用免疫金银法检测抗ds-DNA抗体

抗ds-DNA抗体是对系统性红斑狼疮(SLE)有较高特异性的一种自身抗体。我国 1985年诊断SLE的标准中已列入抗ds-DNA抗体的测定。

IBT和CLIFT法检测抗dsDNA抗体的效用评估及流程的优化

目的分析免疫印迹法（IBT)和绿蝇短膜虫间接免疫荧光法（CLIFT)在抗dsDNA抗体检测中应用，评估检验效能，优化系统性红斑狼疮（SLE)的临床诊断流程。方法选取2016年4月至2016年12月住院患者361例，分为SLE组（A组）、非SLE自身免疫病组（B组）、非自身免疫病组（C组），并选取50例健康体检者作为健康体检组（D组），采用IBT和CLIFT法分别检测抗dsDNA抗体的着色值和滴度，同时采用间接免疫荧光检测抗核抗体均质型（ANA)滴度。按IBT?法（着色值6-11判为阳性）和IBT②法（着色值6-11判为阳性）进行判读。结果灵敏度IBT?>CLIFT>IBT?,特异度CLIFT>IBT?>IBT?,阴性预测值CLIFT>IBT?>IBT?,阳性预测值CLIFT>IBT?>IBT?;在SLE中CLIFT法具有更好的诊断效能；A组、C组和D组中IBT法着色值和CLIFT法滴度具有相关性，而在B组中无相关；IBT法与ANA—致性较差，而CLIFT法与ANA具有较好的一致性。结论IBT①法更适合抗dsDNA抗体的筛查；CLIFT法对SLE的诊断效能明显优于IBT法；SLE中可以根据IBT法着色值大小去推测CLIFT法滴度的可能高低，但IBT法不能直接用于疾病诊断效用的评估和疾病活动的观察。

三种检测方法检测抗dsDNA抗体的临床意义

目的探究将绿蝇短膜虫间接免疫荧光法、欧蒙酶免疫斑点法以及胶体金快速斑点法应用于检测抗双链DNA(dsDNA)抗体中的效果。方法120例系统性红斑狼疮患者,根据病情不同分为疾病活动组及疾病稳定组,每组60例;同时选取60例健康体检者作为对照组。分别采用绿蝇短膜虫间接免疫荧光法、欧蒙酶免疫斑点法以及胶体金快速斑点法对三组研究对象的抗双链DNA抗体进行检测,分析三种检测方式的检测阳性率。结果绿蝇短膜虫间接免疫荧光法对疾病活动组患者抗双链DNA抗体的检测阳性率为95.00%(57/60),对疾病稳定组患者的检测阳性率为71.67%(43/60),对对照组的检测阳性率为5.00%(3/60);欧蒙酶免疫斑点法对疾病活动组患者抗双链DNA抗体的检测阳性率为76.67%(46/60),对疾病稳定组患者的检测阳性率为61.67%(37/60),对对照组的检测阳性率为10.00%(6/60);胶体金快速斑点法对疾病活动组患者抗双链DNA抗体的检测阳性率为80.00%(48/60),对疾病稳定组患者的检测阳性率为65.00%(39/60),对对照组的检测阳性率为8.33%(5/60)。三种检测方法对疾病活动组患者抗双链DNA抗体的检测阳性率高于疾病稳定组、对照组,疾病稳定组高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);绿蝇短膜虫间接免疫荧光法对系统性红斑狼疮患者抗双链DNA抗体的检测阳性率为83.33%(100/120),均高于欧蒙酶免疫斑点法的69.17%(83/120)、胶体金快速斑点法的72.50%(87/120),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论三种诊断方式对于抗双链DNA抗体均具有较高的诊断阳性率,并且在对患者的各个时期进行诊断时,产生的诊断效果较为良好,而三种诊断方式应用于患者的诊断中,可以选择联合诊断,这样有助于避免误诊或者漏诊。

抗双链DNA抗体和抗核小体抗体定性检测对系统性红斑狼疮的诊断价值

目的:评价免疫印迹法抗双链DNA(ds-DNA)抗体、抗核小体抗体(ANuA)及绿蝇短膜虫间接免疫荧光法抗dsDNA抗体检测在系统性红斑狼疮(SLE)中的诊断价值。方法:分别运用免疫印迹法、绿蝇短膜虫间接免疫荧光法及ELISA法检测166例SLE疾病活动期(包括初发和复发)患者血清中抗ds-DNA抗体、ANuA的水平。以酶联免疫吸附法(ELISA)检测结果为标准,评价抗ds-DNA抗体和ANuA定性检测对SLE的诊断价值。结果:免疫印迹法检测抗ds-DNA抗体及ANuA诊断SLE的阳性符合率分别为73.33%、66.28%,绿蝇短膜虫间接免疫荧光法检测抗ds-DNA抗体诊断SLE的阳性符合率为68.57%;随着抗ds-DNA抗体和ANuA滴度的减小,其免疫印迹法或间接免疫荧光法检测阳性符合率均降低(P<0.05)。结论:抗ds-DNA抗体、ANuA定性检测诊断SLE的阳性率均不理想,建议在ELISA检测抗ds-DNA抗体和ANuA诊断SLE的基础上采用。

四种方法检测抗双链DNA抗体诊断效能的对比分析

目的评价绿蝇短膜虫间接荧光免疫法(CLIFT)、酶联免疫吸附法(ELISA)、线性免疫分析法(LIA)和化学发光免疫分析法(CLIA)4种方法检测抗双链DNA(dsDNA)抗体对系统性红斑狼疮(SLE)的诊断效能。方法用4种方法学分别检测2012年7月-2013年6月178例研究对象血清,其中SLE患者86例,其他自身免疫性疾病患者62例,健康体检者30例。结果 4种方法检测抗dsDNA抗体对SLE的诊断效能从高到低依次为ELISA、CLIA、CLIFT和LIA,其中以ELISA的灵敏度最高(67.4%),而CLIA的特异度最高(95.6%);3种实验方法(ELISA、LIA、CLIA)与比较方法(CLIFT)的检测一致性非常高(Kappa值均>0.8);如果特异度设定为95.0%,ELISA和CLIA的的灵敏度差异无统计学意义(58.1%、60.5%,P>0.05)。结论 CLIFT、ELISA、LIA和CLIA均可用于抗dsDNA抗体的临床检测,检测结果一致性高,诊断效能与方法学本身和所使用的截断值密切相关。

ELISA法联合CLIFT法检测抗双链DNA-IgG抗体应用于系统性红斑狼疮的诊断价值

目的:采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA),观察抗双链DNA (doublestranded DNA, dsDNA)IgG抗体在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)患者和非SLE患者中的分布特点,并评估ELISA法联合绿蝇短膜虫间接免疫荧光试验(crithidia luciliae immunofluorescence test, CLIFT)检测抗dsDNA-IgG抗体用于SLE诊断的效能。方法:收集上海交通大学医学院附属瑞金医院检测抗dsDNA-IgG抗体的住院患者的临床资料,共4 726例采用ELISA法,其中830例同时采用CLIFT检测,用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve, ROC)分析2种检测方法辅助诊断SLE的效能。结果 :采用ELISA法检测的4 726例住院患者中,dsDNA抗体阳性者398例,其中SLE 183例,占dsDNA阳性者46.0%,非SLE疾病依次为肝脏疾病(28.4%)、其他结缔组织病(7.5%)、血液系统疾病(5.3%)及呼吸系统疾病(3.8%);830例采用CLIFT检测ds DNA,134例结果显示为dsDNA抗体阳性的患者中,其中SLE者占94.0%,另有非SLE诊断病例包括自身免疫性肝病3例,肝硬化、肾炎、银屑病和抗磷脂综合征各1例。830例完成ELISA法与CLIFT双检测的患者中,SLE患者共197例,非SLE患者633例,ELISA法检测灵敏度为74.6%,特异度仅为92.9%;而CLIFT法测dsDNA抗体具有较高的特异度,为98.7%,灵敏度为64.0%。联合2种方法平行检测dsDNA抗体可明显提高SLE的诊断效能,ROC曲线下面积最高(0.869 0)。结论:单独应用ELISA法时,应警惕假阳性较高,需排除其他非SLE疾病的诊断;联合使用ELISA法和CLIFT法检测抗dsDNA抗体可较单独应用CLIFT法明显提高SLE的诊断效能,二者联合平行检测结果为阴性,用于排除SLE更有意义。