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绿豆种子8S球蛋白基因启动子的克隆及分析 被引量:3
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作者 徐超 杨悦宁 +5 位作者 王吟 张梦晗 谢伟红 杨维东 刘洁生 李宏业 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期242-247,共6页
根据绿豆种子8S球蛋白α′亚基基因的末端序列设计3个特异反向引物.以绿豆基因组DNA为模板,采用基因组步移法,获得了8S球蛋白α′亚基基因起始密码子上游784 bp的DNA片段,通过序列测定和生物信息学分析,发现该序列含有启动子核心区以及... 根据绿豆种子8S球蛋白α′亚基基因的末端序列设计3个特异反向引物.以绿豆基因组DNA为模板,采用基因组步移法,获得了8S球蛋白α′亚基基因起始密码子上游784 bp的DNA片段,通过序列测定和生物信息学分析,发现该序列含有启动子核心区以及大量的种子特异表达相关的顺式作用元件,表明此序列为种子特异启动子序列.通过PCR方法在启动子3′端加上翻译增强序列TMV-omega序列,构建了植物双元表达载体pBI-8SGα-′o-mega-gus,并成功将其转化进入农杆菌. 展开更多
关键词 绿豆8s球蛋白 种子特异启动子 基因组步移
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种子特异启动子的克隆及植物表达载体构建 被引量:5
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作者 张梦晗 谢伟红 +4 位作者 曾洪斌 徐超 李宏业 杨维东 刘洁生 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第1期63-67,共5页
[目的]启动子是植物基因工程中一个重要工具,对构建植物生物反应器有着重要意义。8S球蛋白是绿豆中含量最丰富的种子贮藏蛋白,因此,其调控序列可能提供了一个很好来源的种子特异性启动子。[方法]通过基因组步移技术克隆了绿豆8S球蛋白a... [目的]启动子是植物基因工程中一个重要工具,对构建植物生物反应器有着重要意义。8S球蛋白是绿豆中含量最丰富的种子贮藏蛋白,因此,其调控序列可能提供了一个很好来源的种子特异性启动子。[方法]通过基因组步移技术克隆了绿豆8S球蛋白a亚基基因8SGα的启动子区域,基因组步移使用的引物根据绿豆8SGα的cDNA序列设计。[结果]通过3轮PCR的扩增,得到了472 bp的上游序列片段,构建了植物双元表达载体pBI-8SGα-GUS。[结论]研究结果可用于转化植物,并于转基因植物中分析启动表达的时空特异性及表达强度,并为植物种子生物反应器提供重要元件。 展开更多
关键词 启动子 PCR 基因组步移 绿豆8s球蛋白 种子特异表达载体
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