缓衰口服液对动脉粥样硬化性肾动脉狭窄小鼠肾脏低氧-微血管荒废-肾间质纤维化的影响

目的探讨缓衰口服液对动脉粥样硬化性肾动脉狭窄(ARAS)小鼠肾脏低氧-微血管荒废-肾间质纤维化病理过程的影响机制。方法通过对Apo E-/-小鼠喂以高脂饲料,并行左侧肾脏切除术,建立ARAS动物模型。手术2周后,将模型小鼠随机分为缓衰口服液组(中药组)、模型组,另设空白组(C57BL/6J小鼠)。中药组用缓衰口服液0.01 m L/(g·d)灌胃,空白组和模型组予0.01 m L/(g·d)生理盐水灌胃。给药12周后,取材,检测肾功能,Masson染色观察肾间质纤维化程度,免疫组化法检测各组小鼠肾脏Ⅳ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、血管性血友病因子(v WF)的表达,RT-PCR检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和转化生长因子-β(TGF-β)的表达情况。结果与空白组比较,模型组小鼠肾功能不全明显,肾动脉狭窄严重,肾间质纤维化明显,HIF-1α、TGF-β、Ⅳ型胶原和α-SMA表达明显增加(P<0.05),v WF表达明显减少(P<0.05);与模型组比较,中药组HIF-1α、TGF-β、Ⅳ型胶原和α-SMA表达明显减少(P<0.05),v WF表达明显增加(P<0.05)。结论缓衰口服液对ARAS小鼠的肾功能和肾间质纤维化有明显改善作用,该作用可能与其对缺血性肾脏HIF-1α和TGF-β表达的抑制有关。

益肾缓衰口服液对肾大部切除大鼠残肾内VEGF表达的影响

目的:探讨益气养血活血的中药复方益肾缓衰口服液(HSR)对血管内皮生长因子(VEGF)在肾大部切除(SNX)大鼠残肾内表达的影响及其意义。方法:雄性Wistar大鼠76只,随机分为假手术组(n=16),模型组(n=20):5/6肾切除+自来水10ml.kg-1.d-1灌胃,益肾缓衰口服液组(n=20):5/6肾切除+HSR10ml.kg.d灌胃,氯沙坦钾(LST)组(n=20):5/6肾切除+Losartan40mg·kg-1.d-1灌胃。分别于术后2、4、8、12周采样,测血清Scr、尿蛋白定量,分别行光镜和电镜观察残肾组织病理变化;免疫组化SP法进行VEGF染色,ELISA法检测皮质部肾组织相对VEGF含量,分析VEGF表达的动态变化对肾功能和蛋白尿排泄量的影响以及与肾小球硬化指数的关系。结果:在SNX大鼠模型中,VEGF的表达随观察时间的延长而逐渐降低,与Scr、Upro的动态变化均呈负相关,r分别为:-0.59和-0.48;与肾小球硬化指数呈负相关(r=-0.73,P<0.01)。与模型组比较,缓衰方组和氯沙坦组的VEGF表达水平在整个观察周期内相对稳定,肾功能损害和病理改变相对较轻。结论:在SNX大鼠中,HSR与血管紧张素Ⅱ受体1拮抗剂(氯沙坦)具有相似的作用,均可减少蛋白尿、保护肾功能、减轻肾小球硬化,这种肾保护作用可能与其稳定残余肾内VEGF表达水平有关。

缓衰方对肾大部切除大鼠肾内微血管重塑的影响

目的:探讨益气养血活血的中药复方——益肾缓衰口服液对肾大部切除(SNX)大鼠残肾内微血管重塑的影响。方法:雄性Wistar大鼠76只,随机分为4组。假手术组(n=16):假手术+自来水10ml·kg-1·d-1灌胃;模型组(n=20):5/6肾切除+自来水10ml·kg-1·d-1灌胃;缓衰口服液组(n=20):5/6肾切除+益肾缓衰口服液10ml·kg-1·d-1灌胃;氯沙坦钾组(n=20):5/6肾切除+氯沙坦钾40mg·kg-1·d-1灌胃。分别于术后2、4、8、12周取肾组织PAS染色观察病理改变;免疫组化SP法进行APP、FN和Col-Ⅳ染色,结合图像分析,评价肾小球微血管面积和肾间质微血管数动态变化及其与细胞外基质(ECM)成分(FN和Col-Ⅳ)表达的关系。结果:在大鼠SNX模型中,残余肾间质毛细血管数和肾小球毛细血管襻相对面积随时间呈逐渐下降趋势,肾小球的毛细血管襻相对面积与Col-Ⅳ、FN的表达水平呈负相关(r分别为-0.598和-0.601,P<0.001);缓衰口服液组和氯沙坦钾组其微血管丢失和ECM积聚程度较轻。结论:在SNX大鼠中,缓衰口服液与血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(氯沙坦钾)具有相似的减少肾内微血管丢失从而减轻肾小球硬化的作用。