中华鳖温和气单胞菌口服缓释微球疫苗的研究:疫苗用菌液培养条件的优化

以中华鳖温和气单胞菌 (Aeromonas sobria,As)口服缓释微球疫苗生产菌株 Z- 1株培养菌液含菌量和胞外产物溶血性为指标 ,考察了培养温度、培养时间、振荡与否、培养基 p H等因素对 As Z- 1株繁殖和产毒的影响 ,并采用正交试验方法 ,对培养基配方进行了优化试验。结果表明 :不同的培养温度、培养时间、振荡与否、培养基 p H等均会影响As Z- 1株的菌体产量和溶血性 ,其中 2 8℃振荡 (2 0 0 r/ min)培养 36 h菌液的含菌量和溶血价均较高 ;在营养肉汤中添加适量的硫酸铜、磷酸二氢钾、硫酸锰和硫酸铵 ,可显著提高菌液的含菌量和溶血价。

中华鳖温和气单胞菌口服缓释微球疫苗的研究:疫苗生产菌株灭活方法的优化

以灭活后中华鳖温和气单胞菌 (Aeromonas sobria,As)残存数、胞外产物溶血性及菌体抗原性为指标 ,考察不同的甲醛浓度、不同温度、不同灭活时间对中华鳖 As Z- 1株灭活的影响。结果表明 :As Z- 1株菌体和胞外产物的灭活时间与所采用的温度和甲醛浓度成反比 ;在相同的甲醛浓度和灭活温度下 ,菌体和胞外产物所需的灭活时间有很大差异 ;在使菌体灭活的各种灭活方法中 ,以 2 8℃、0 .2 %甲醛作用 2 d的菌体抗原性为最佳。

缓释伤寒荚膜多糖微球疫苗免疫动物的实验研究

用 PEL A为材料包裹伤寒沙门菌荚膜多糖 ,制成缓释微球疫苗 ,分别以口服及皮下注射的方式免疫BAL B/ C小鼠 ,分别在第 2 ,4 ,8周取血 ,收集唾液 ,用 RIA方法检测血清中 Ig G抗体及唾液中 s Ig A抗体效价。第 8周腹腔注射伤寒沙门菌活菌攻击各组免疫动物 ,计算免疫动物保护率。单剂微球疫苗皮下注射比常规液体疫苗更有效地诱导全身免疫应答 (P<0 .0 5 ) ,而口服微球疫苗组和微球疫苗皮下注射组均可诱导较强粘膜免疫 (P<0 .0 5 )。动物保护力实验表明 ,口服微球疫苗组免疫保护率 4 0 % ,微球疫苗皮下注射组免疫保护率为 10 0 % ,常规液体疫苗免疫保护率为 6 0 %。缓释伤寒荚膜多糖微球疫苗具有在体内释放速度慢 。

中华鳖嗜水气单胞菌微球缓释疫苗的研制及免疫效果

为通过免疫防治途径控制嗜水气单胞菌引起的多种中华鳖疾病,采用复乳化-溶剂挥发法制备缓释微球疫苗,通过灌胃方式免疫中华鳖（体质量150～200 g）,每只灌胃0.05 g或0.1g,微球含灭活菌约为6.75×1010/g.免疫应答反应结果显示,缓释微球疫苗体外释放可持续近40 d,血清抗体效价、白细胞吞噬率、白细胞吞噬指数及淋巴细胞转化率最高分别可达512,71.25％,1.51和77.25％.结果表明：中华鳖嗜水气单胞菌微球缓释疫苗可以达到注射灭活菌液疫苗的水平,且持续性略优于注射免疫.通过灌胃方式（0.1 g/只）、注射方式分别对中华鳖进行免疫,研究攻毒后的免疫保护率,结果显示注射免疫组和微球疫苗免疫组的免疫保护率均为85％.免疫应答实验和攻毒实验结果分别证明了中华鳖口服缓释微球疫苗免疫的持续性和有效性.

PLGA缓释纳米微球肿瘤疫苗防治结肠癌的实验研究

制备并探讨PLGA缓释纳米微球肿瘤疫苗对小鼠结肠癌的防治作用及机制。用双乳化法制备了一种以小鼠结肠癌细胞CMT93为抗原,以纳米材料PLGA为载体,辅以粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的新型缓释纳米微球肿瘤疫苗。体内试验表明,对于接种了结肠癌细胞的C57BL/6小鼠而言,提前接种新型缓释纳米微球肿瘤疫苗可使小鼠的成瘤率从100%降低至20%。而在C57BL/6小鼠结肠癌模型中,与对照相比,该新型缓释纳米微球肿瘤疫苗处理组的IFN-γ分泌水平最高,NK细胞和CTL细胞的杀伤活性最强,并且能特异性杀伤CMT93细胞,该杀伤活性能被抗CD8抗体阻断但不能被抗CD4抗体阻断。据此,本研究成功制备了一种对小鼠结肠癌具有良好的防治作用新型缓释纳米微球肿瘤疫苗。

幽门螺杆菌疫苗研究的现状和展望

幽门螺杆菌感染与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌及胃粘膜相关性淋巴瘤有关。疫苗是防治幽门螺杆菌感染切实可行的方法。近年来新的防治和根除幽门螺杆菌感染的疫苗正在开发并取得了很大的进展。本文对新近研制的蛋白组分疫苗、活菌疫苗、DNA疫苗、缓释微球疫苗及表位疫苗等幽门螺杆菌疫苗的进展作一综述。