HPLC测定水飞蓟宾缓释纳米球的体外释放度

目的建立水飞蓟宾缓释纳米球体外释放度的测定方法。方法采用高效液相色谱(HPLC),选用C18色谱柱(依利特,250mm×4.6mm,5μm),甲醇-0.05mol/L磷酸盐缓冲液(pH3.0)(49:51)为流动相,流速1.0ml/min,检测波长288nm,柱温25℃。结果上述色谱条件下,释放度测定时,水飞蓟宾在0.5~20μg/ml浓度范围内,峰面积(A)与药物浓度(C)有良好的线性关系,回归方程为A=30618C-2085.8(r=0.9999),平均回收率为101.85%,RSD为1.53%。结论该方法稳定、可靠、重现性好,可用于水飞蓟宾缓释纳米球体外释放过程中的含量测定。

自体富血小板血浆纳米球凝胶缓释系统对兔膝关节软骨损伤的修复效果研究

目的:建立负载自体富血小板血浆纳米球凝胶缓释系统,观察对兔膝关节软骨损伤的修复效果。方法:建立兔双膝关节股骨内侧髁软骨面缺损模型,随机分成空白组、凝胶组和纳米球凝胶组各9只。兔心脏采血采用二次离心法制备自体富血小板血浆(PRP),将PRP加入透明质酸水凝胶中制成PRP凝胶。将PRP先负载到乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米球中,然后再加入透明质酸水凝胶中,建立PRP纳米球凝胶缓释系统。分别将PRP凝胶、PRP纳米球凝胶缓释系统应用于兔膝关节软骨缺损面。术后4周、8周、12周处死实验动物,对兔膝关节标本进行大体观察,采用国际软骨修复协会(ICRS)宏观修复评价量表进行评价。对损伤区进行组织取材,切片后行HE染色和番红固绿染色,应用O’Driscoll评分标准进行组织学评分。结果:凝胶组在4周、8周、12周时ICRS宏观修复评分分别为5.67±0.52分、8.83±0.75分和9.00±0.63分,纳米球凝胶组分别为5.67±0.52分、9.50±0.55分和10.16±0.75分,均高于空白组的2.50±0.58分、4.00±0.82分和4.25±0.50分,差异均有统计学意义(P<0.05),凝胶组、纳米球凝胶组8周、12周ICRS宏观修复评分高于4周,差异均有统计学意义(P<0.05),但凝胶组与纳米球凝胶组的差异无统计学意义(P>0.05)。空白组在4周、8周、12周时O’Driscoll组织学评分分别为4.00±0.82分、4.25±0.96分和4.00±0.82分,凝胶组分别为9.33±1.03分、11.50±1.05分和10.00±1.79分,纳米球凝胶组分别为10.83±1.17分、15.00±1.41分和13.50±1.87分,三组间差异均有统计学意义(P<0.05),纳米球凝胶组评分最高。结论:自体富血小板血浆凝胶和自体富血小板血浆纳米球凝胶缓释系统均具有软骨修复作用,可以促进局部软骨基质形成和软骨细胞聚集,但超过8周时软骨修复作用减退。

负载芍药苷-聚氰基丙烯酸正丁酯微球的制备及体外缓释性能研究

目的:运用改良的乳液聚合法制备芍药苷-聚氰基丙烯酸正丁酯微球,并测定载药微球的各项理化性质,绘制释放度曲线。方法:运用改良的乳液聚合法制备芍药苷-聚氰基丙烯酸正丁酯微球,在扫描电镜下观察其形状形态,利用公式计算其包封率及载药量。将微球溶解于PBS缓冲液及生理盐水后,运用分光光度法测定不同时间微球释放的药物浓度,绘制释放度曲线。结果:运用改良的乳液聚合法制备芍药苷-聚氰基丙烯酸正丁酯微球过程顺利,扫描电镜下观察,微球表面光滑,形状规整,形态均一饱满,分布均匀。微球包封率(88.9±6.1)%,载药量(12.6±0.86)%,体外释放突释效应不明显,40 d累积释放药量在pH为7.0的PBS缓冲液中为(82.778±4.65)%,在生理盐水中为(71.812±4.78)%。结论:聚氰基丙烯酸正丁酯微球可以作为芍药苷理想的缓释载体,其包封率适宜,体外释放性能较好,突释效应小,缓释性良好。聚氰基丙烯酸正丁酯微球能够延长芍药苷药物的作用时间,减少用药次数,在临床上有较好的应用前景。

生长因子缓释剂联合处理影响脂肪移植的研究进展

生长因子应用于脂肪组织移植近几年来在国内外已有了很多报道，多限于实验研究，其包涵着重大的临床应用潜能．如何使它能在临床中得到广泛应用，需要世人进行更为深入的研究。血管生长因子结合纳米缓释技术联合处理，从而有望提高脂肪移植成活率，使得脂肪移植技术在整形外科乃至医学领域中发挥着更加淋漓尽致的作用。

PLGA缓释纳米微球肿瘤疫苗防治结肠癌的实验研究

制备并探讨PLGA缓释纳米微球肿瘤疫苗对小鼠结肠癌的防治作用及机制。用双乳化法制备了一种以小鼠结肠癌细胞CMT93为抗原,以纳米材料PLGA为载体,辅以粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的新型缓释纳米微球肿瘤疫苗。体内试验表明,对于接种了结肠癌细胞的C57BL/6小鼠而言,提前接种新型缓释纳米微球肿瘤疫苗可使小鼠的成瘤率从100%降低至20%。而在C57BL/6小鼠结肠癌模型中,与对照相比,该新型缓释纳米微球肿瘤疫苗处理组的IFN-γ分泌水平最高,NK细胞和CTL细胞的杀伤活性最强,并且能特异性杀伤CMT93细胞,该杀伤活性能被抗CD8抗体阻断但不能被抗CD4抗体阻断。据此,本研究成功制备了一种对小鼠结肠癌具有良好的防治作用新型缓释纳米微球肿瘤疫苗。

载5-氟尿嘧啶纳米微球治疗荷H22腹水瘤小鼠的实验研究

目的观察自制载5-氟尿嘧啶(5-FU)纳米微粒对荷H22小鼠恶性腹水的治疗作用以及对小鼠生存期、小鼠体重、H22细胞周期、小鼠肝脏毒性的影响。方法 168只荷H22腹水瘤昆明小鼠随机分为7组,即空白对照组、溶剂对照组、辅料对照组、5-FU阳性药组(5d共3mg),低(5d共0.12mg)、中(5d共0.6mg)、高(5d共3mg)剂量微粒缓释组。药物经腹腔注入,微粒缓释组只给药一次,其他组均为连续给药5d,每天一次。观察各组小鼠生存情况,比较各组小鼠平均生存时间、小鼠体重、细胞增殖指数(PI)以及肝脏毒性。结果与对照组比较,微粒缓释组能明显提高小鼠的生存时间(P<0.05)、减小小鼠体重(P<0.05)和增殖指数(PI)、减小肝毒性。与阳性药物组比较,中、高剂量微粒缓释组对小鼠H22腹水瘤的抑制作用增加,表现为明显延长生存时间(P<0.05)、减缓小鼠体重增长(P<0.05)和减小增殖指数(PI),药物对肝脏毒性影响也有减小,表现为中剂量组肝脏毒性明显降低,高剂量组肝脏毒性与阳性药物组相当。结论 5-FU载药缓释纳米微球在治疗荷H22腹水瘤小鼠时可以在小鼠体内持续释放,与阳性药物组相比减少了给药次数,增加了药物对H22肿瘤细胞的抑制作用,并减小对肝脏的毒性。