应用缓释BrdU检测前腭缝成骨细胞的增殖活性

目的:配制缓释BrdU,用于检测前腭缝牵张成骨过程中成骨细胞的增殖和分化,探讨前腭缝牵张成骨的机制。方法:用泊洛沙姆温敏凝胶配制缓释BrdU,大鼠皮下注射后不同时间点采取血样,高效液相色谱法测定BrdU血药浓度,并与腹腔注射BrdU溶液进行比较。选取35天龄雄性SD大鼠40只,随机分为实验组和对照组,实验组安放扩大簧牵张前腭缝。2组动物于24h后随机皮下注射BrdU温敏凝胶1次或腹腔注射BrdU溶液1次。所有动物分别于48h和96h处死(n=5),免疫组化染色检测细胞的增殖和迁移。结果:皮下注射BrdU温敏凝胶6h后,血清中仍可检测出1.21μg/mL BrdU,免疫组化染色可见大鼠前腭缝有BrdU阳性的增殖细胞。腹腔注射BrdU溶液3h后,血清中仅检测到0.17μg/mL BrdU,免疫组化染色未见BrdU阳性细胞。前腭缝牵张48h后,骨缝边缘可见大量BrdU阳性成骨细胞;96h后可见部分BrdU阳性细胞包埋于骨缝边缘的新生骨基质中。结论:BrdU温敏凝胶能起到良好的缓释效果,为体内标记成骨细胞提供了一种简便易行的方法。牵张力作用于前腭缝后,促进骨缝边缘的间充质细胞增殖,这些细胞分化为成骨细胞并分泌骨基质,从而促进新骨形成。