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红莲型细胞质雄性不育水稻线粒体atp6基因转录本的编辑位点研究 被引量:27
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作者 易平 汪莉 +1 位作者 孙清萍 朱英国 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第5期729-733,共5页
以红莲 (HL)型水稻细胞质雄性不育系A、保持系B及杂种一代F1为材料 ,首次比较研究了红莲型水稻线粒体atp6基因转录本的编辑位点及各位点的编辑频率 .结果表明atp6基因的转录本有 18个编辑位点 ,其中有 15个发生在密码子的第一和第二位点... 以红莲 (HL)型水稻细胞质雄性不育系A、保持系B及杂种一代F1为材料 ,首次比较研究了红莲型水稻线粒体atp6基因转录本的编辑位点及各位点的编辑频率 .结果表明atp6基因的转录本有 18个编辑位点 ,其中有 15个发生在密码子的第一和第二位点上 ,这些位点的编辑最终会导致氨基酸种类的变化 .18个编辑位点在A、B和F1中没有差异 ,但各位点的编辑频率在引入了核恢复基因的条件下发生了较大的变化 ,完全编辑的比例增加 .这些结果首次证明HL型细胞质雄性不育与线粒体atp6转录本的编辑有一定相关性 。 展开更多
关键词 红莲型细胞质雄性不育 水稻 线粒体 atp6基因转录本 编辑位点
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二穗短柄草叶绿体RNA编辑位点的预测及其鉴定 被引量:8
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作者 石文清 邓平川 +5 位作者 李变丽 牛善策 聂小军 王乐 Abdul.Wahid.Baloch 宋卫宁 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期28-35,共8页
RNA编辑是陆生植物叶绿体转录后基因表达调控的一种重要方式。为进一步探讨单子叶植物RNA编辑功能及其发生机制,本研究通过生物信息学方法,对二穗短柄草叶绿体的81个蛋白编码基因的RNA编辑位点进行了预测和鉴定分析,结果发现78个基因存... RNA编辑是陆生植物叶绿体转录后基因表达调控的一种重要方式。为进一步探讨单子叶植物RNA编辑功能及其发生机制,本研究通过生物信息学方法,对二穗短柄草叶绿体的81个蛋白编码基因的RNA编辑位点进行了预测和鉴定分析,结果发现78个基因存在编辑位点,共检测到176个编辑位点,都是C到U的转换。其中ndhB最多,为14个编辑位点。为验证预测结果,利用blast工具比对了NCBI的二穗短柄草EST数据库,最终确定存在于17个基因中的34个编辑位点是真实存在的,其中19个为沉默编辑,15个为有效编辑。与5个不同单子叶禾本科物种18个蛋白编码基因的RNA编辑位点的比较发现,在rpoB-206位点,只有二穗短柄草发生了编辑,且只有ndhD-295(293)为部分编辑位点。 展开更多
关键词 二穗短柄草 叶绿体 RNA编辑位点 预测鉴定
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水稻线粒体coxⅡ基因转录本的编辑位点研究 被引量:1
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作者 易平 孙清萍 +1 位作者 万翠香 朱英国 《实验生物学报》 CSCD 北大核心 2002年第2期123-126,共4页
RNA编辑是指由RNA水平的核苷酸改变所引起的密码子发生变化的一种预定修饰,它的发现是近年来对分子生物学中心法则的重要补充。本文以红莲型(HL)水稻细胞质雄性不育系粤泰A,保持系粤泰B和杂种F_1(不育系A与恢复系71068的杂交一代)为材料... RNA编辑是指由RNA水平的核苷酸改变所引起的密码子发生变化的一种预定修饰,它的发现是近年来对分子生物学中心法则的重要补充。本文以红莲型(HL)水稻细胞质雄性不育系粤泰A,保持系粤泰B和杂种F_1(不育系A与恢复系71068的杂交一代)为材料,首次研究了线粒体基因coxⅡ转录本的编辑位点。coxⅡ基因的转录本有15个编辑位点,其中有14个发生在密码子的第一和第二位点。这14个位点的编辑可改变氨基酸的种类,并导致所编码蛋白的疏水性以及所编码蛋白在氨基酸序列上的保守性增加。 展开更多
关键词 水稻 线粒体coxⅡ 基因转录本 编辑位点
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类乌齐牦牛全基因组RNA编辑位点预测及剖析 被引量:1
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作者 王嘉博 舒涛 +6 位作者 柴志欣 王吉坤 王会 武志娟 唐友 钟金城 姬秋梅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期88-97,共10页
为揭示牦牛不同组织间受RNA编辑导致转录产物发生的差异变化,进而为牦牛的组织分化、系统遗传调控等研究提供候选基因。本研究以3头4.5岁类乌齐母牦牛的大脑、小脑、臀部脂肪以及肌肉组织作为试验材料,通过Illumina 4000测序平台对各组... 为揭示牦牛不同组织间受RNA编辑导致转录产物发生的差异变化,进而为牦牛的组织分化、系统遗传调控等研究提供候选基因。本研究以3头4.5岁类乌齐母牦牛的大脑、小脑、臀部脂肪以及肌肉组织作为试验材料,通过Illumina 4000测序平台对各组织表达产物进行扫描,利用SPRINT和JACUSA筛选差异的RNA编辑位点,分析RNA编辑位点的分类、注释以及变异风险评估等。结果发现了总计24 784个RNA编辑位点,其中在4个组织中均发现存在编辑事件的有4 015个位点;4个组织中的RNA编辑位点主要以A-G和T-C编辑类型为主;发现其中一个高风险编辑位点位于SON基因中,使该基因的翻译提前终止,这将导致该组织一些特定位点的RNA与DNA结合出现问题。本研究预测并分析了类乌齐牦牛大、小脑和臀部肌肉、脂肪组织中RNA编辑差异位点的类型和分布,为进一步研究牦牛组织分化和生长发育中重要的调控基因提供了新的参考。 展开更多
关键词 类乌齐牦牛 RNA编辑位点 SPRINT JACUSA
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一种基因编辑位点特异性PCR方法的开发和应用
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作者 张洪文 赵圣博 +7 位作者 闫晓红 李俊 翟杉杉 肖芳 高鸿飞 李允静 吴刚 武玉花 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期77-89,共13页
为了对基因组编辑产品进行精准定性和定量检测,以水稻SP1基因的编辑植株为材料,在编辑位点上下游设计通用引物,在编辑位点处设计基因编辑位点特异性TaqMan探针,建立了编辑位点特异性PCR方法。利用该方法可准确鉴定特异基因组编辑产品,... 为了对基因组编辑产品进行精准定性和定量检测,以水稻SP1基因的编辑植株为材料,在编辑位点上下游设计通用引物,在编辑位点处设计基因编辑位点特异性TaqMan探针,建立了编辑位点特异性PCR方法。利用该方法可准确鉴定特异基因组编辑产品,检测灵敏度达到5~10拷贝,可在实时荧光PCR(qPCR)和微滴数字PCR(ddPCR)平台上对基因组编辑产品进行定量检测。由于数字PCR的微反应单元可消除野生型DNA对通用引物的竞争性消耗,与qPCR的定量结果相比,ddPCR定量结果具有更高的定量准确性。 展开更多
关键词 基因组编辑作物 基因编辑位点特异性PCR 身份鉴定 定量检测
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水稻线粒体功能基因转录本的编辑位点研究 被引量:9
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作者 易平 汪莉 +1 位作者 孙清萍 朱英国 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第5期370-373,共4页
RNA编辑普遍存在于高等植物线粒体中,是线粒体产生功能蛋白所必不可少的过程.以红莲(HL)型水稻细胞质雄性不育系A,保持系B及杂种一代F1为材料,研究了线粒体功能基因——atp6和coxⅡ转录本的编辑位点.结果表明,atp6和coxⅡ的转录本分别... RNA编辑普遍存在于高等植物线粒体中,是线粒体产生功能蛋白所必不可少的过程.以红莲(HL)型水稻细胞质雄性不育系A,保持系B及杂种一代F1为材料,研究了线粒体功能基因——atp6和coxⅡ转录本的编辑位点.结果表明,atp6和coxⅡ的转录本分别有18和15个编辑位点,其中导致氨基酸种类变化的编辑位点分别有15和14个.这些位点的编辑增加了编码蛋白的疏水性以及编码蛋白在不同物种中氨基酸序列上的保守性. 展开更多
关键词 水稻 线粒体功能基因 转录本 编辑位点 RNA编辑 高等植物
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基于网络公开测序数据的K326烟草线粒体基因组RNA编辑位点的鉴定与分析
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作者 王淮 杨健康 《烟草科技》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1-8,57,共9页
为探索RNA编辑位点在烟草线粒体中的分布和功能,通过分析烟草根、花、叶的基因组及转录组测序数据,鉴定了烟草线粒体中从胞嘧啶(C)转换为尿嘧啶(U)的RNA编辑位点。结果显示,在烟草线粒体上共发现了4212个RNA编辑位点,其中30.2%的RNA编... 为探索RNA编辑位点在烟草线粒体中的分布和功能,通过分析烟草根、花、叶的基因组及转录组测序数据,鉴定了烟草线粒体中从胞嘧啶(C)转换为尿嘧啶(U)的RNA编辑位点。结果显示,在烟草线粒体上共发现了4212个RNA编辑位点,其中30.2%的RNA编辑位点位于蛋白编码基因(rps3、mat-R和ccmFN为RNA编辑位点最多的3个蛋白编码基因),62个RNA编辑位点属于产生的无义突变或使终止密码子丢失的位点。对根、花、叶的RNA编辑位点进行比较,叶的位点最多,为2923个。对这3种器官的特异无义突变RNA编辑位点进行分析,发现其所在的基因参与了氧化呼吸链的电子传递、蛋白合成等过程。同时553个RNA编辑位点位于开放阅读框基因上,说明这些开放阅读框基因可能也参与了线粒体某些功能的完成。 展开更多
关键词 烟草 线粒体 RNA编辑位点 转录组
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稻瘟病抗性基因Pita^2候选基因多位点编辑载体的构建
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作者 王晓婉 邓森文 +2 位作者 李开 王春台 徐鑫 《中国农学通报》 2017年第19期40-45,共6页
Pita2是定位于水稻第12号染色体着丝粒区域的稻瘟病广谱抗性基因,前期研究中通过精细定位得到了5个候选基因,其功能及作用原理还不清楚。本研究利用CRISPR/Cas9系统构建Pita2候选基因的多位点编辑载体。首先在候选基因外显子区域找到2... Pita2是定位于水稻第12号染色体着丝粒区域的稻瘟病广谱抗性基因,前期研究中通过精细定位得到了5个候选基因,其功能及作用原理还不清楚。本研究利用CRISPR/Cas9系统构建Pita2候选基因的多位点编辑载体。首先在候选基因外显子区域找到2个含有PAM序列的特异性靶位点序列,并构建候选基因入门载体SK-gRNA,然后利用同尾酶将SK-gRNA重组载体上的目的片段gRNA酶切,采用一步法将2个gRNA连接到双元表达载体p C1300-Cas9。质粒PCR鉴定以及测序的结果表明,以上5个多位点编辑载体构建成功。后期通过遗传转化并鉴定候选基因表达量与抗病性之间的关系,为水稻稻瘟病抗性基因Pita2功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 稻瘟病抗性基因 Pita2 CRISPR/Cas9系统 位点编辑
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新技术揭示人转录组中存在大量RNA编辑
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《生物学教学》 2012年第8期76-76,共1页
据2012年2月13日《科技日报》报道,深圳华大基因研究院和台湾长庚大学科学家研发了一种对人类转录组中的RNA编辑位点进行测定和分析的新型计算方法,并发现人类转录组中存在大量的RNA编辑现象。研究成果于2012年2月12日在国际著名期刊... 据2012年2月13日《科技日报》报道,深圳华大基因研究院和台湾长庚大学科学家研发了一种对人类转录组中的RNA编辑位点进行测定和分析的新型计算方法,并发现人类转录组中存在大量的RNA编辑现象。研究成果于2012年2月12日在国际著名期刊《自然·生物技术》上在线发表,对进一步了解RNA编辑与人类发育及疾病等不同生理状态的关系具有重要作用。 展开更多
关键词 RNA编辑 转录组 新技术 《科技日报》 编辑位点 生物技术 研究成果 生理状态
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基因编辑酿酒酵母提高裸盖菇素合成产量
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作者 张鑫龙 万秀坤 +2 位作者 王馥丽 姚戈 蒋辉 《生命科学仪器》 2022年第2期36-43,共8页
裸盖菇素是一种精神活性生物碱,产自多种不同属的毒蕈,具有抗抑郁和抗焦虑的活性,可作为极有潜力的精神疾病治疗药物。基因组学技术的发展使裸盖菇素的生物合成基因与合成路线得以解析验证,本文以酿酒酵母为底盘细胞,运用CRISPR-Cas9多... 裸盖菇素是一种精神活性生物碱,产自多种不同属的毒蕈,具有抗抑郁和抗焦虑的活性,可作为极有潜力的精神疾病治疗药物。基因组学技术的发展使裸盖菇素的生物合成基因与合成路线得以解析验证,本文以酿酒酵母为底盘细胞,运用CRISPR-Cas9多位点基因编辑技术将裸盖菇素合成基因Tdc、PsiK、PsiH、PsiM整合入酿酒酵母基因组上,并且通过底盘细胞菌株筛选以及合成基因拷贝数优化的方式有效提高其生物合成产量。结果显示,通过优选CEN.PK113-5D酵母菌株作为底盘细胞,并增加Tdc以及PsiH基因拷贝数,裸盖菇素的摇瓶产量达到114mg/L,是出发菌株的7.67倍。 展开更多
关键词 裸盖菇素 生物合成 酿酒酵母 CRISPR-Cas9多位点基因编辑
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酿酒酵母适应性实验室进化工具的最新进展 被引量:5
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作者 李祎 林振泉 刘子鹤 《合成生物学》 CSCD 2021年第2期287-301,共15页
酿酒酵母作为重要的模式生物和微生物细胞工厂已广泛用于代谢工程、系统生物学和合成生物学研究。由于微生物系统代谢和调控网络的复杂性,通过人工理性设计及基因扰动难以获得鲁棒性较好的表型,因此进化工程在构建稳定的微生物细胞工厂... 酿酒酵母作为重要的模式生物和微生物细胞工厂已广泛用于代谢工程、系统生物学和合成生物学研究。由于微生物系统代谢和调控网络的复杂性,通过人工理性设计及基因扰动难以获得鲁棒性较好的表型,因此进化工程在构建稳定的微生物细胞工厂中发挥着重要作用。微生物适应性实验室进化工程通过模拟自然进化过程,构建大量遗传多样性的突变库,经过筛选可快速获得稳定性状的菌株。随着合成生物学和系统生物学的发展,研究人员开发了多种基因组规模的多位点快速进化工具,并结合计算机辅助进化系统实现了自动化连续进化技术。本综述着重介绍在酿酒酵母中基因组规模的多位点快速进化,包括合成型酿酒酵母基因组重排(SCRaMbLE)、寡核苷酸介导的多位点进化工具(YOGE和eMAGE)和基于CRISPR系统的多位点编辑(CHAnGE、MAGESTIC、Target-AID和yEvolvR)等基因组规模的进化策略的研究;以及自动化连续进化技术(eVOLVER、ICE和ACE等)。利用合成生物学方法通过在基因组水平进行多位点快速编辑或连续进化以产生具有遗传多样性的细胞群体,并在特定的筛选条件下对目标突变株进行富集,进而解析其基因型表型关系,可实现在短期内快速高效识别适应性进化的关键因素和协同作用。最后展望了实验室适应性进化工程与计算机辅助设计、自动化技术有机结合的机遇和在高通量筛选方向的挑战。 展开更多
关键词 酿酒酵母 进化工程 位点编辑 自动化连续进化 基因组工程
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CRISPR—Cas9在水稻中的基因组编辑效率提高3~7倍
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《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期137-137,共1页
CRISPR—Cas9系统已经广泛应用于基因组编辑。但是该系统在进行基因组编辑时,除需要特异识别靶序列之外,还需要特异识别一段NGG的邻近核苷酸序列,这大大限制了该系统编辑位点的选择范围。
关键词 编辑效率 基因组 水稻 核苷酸序列 编辑位点 系统 靶序列 识别
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The RNA editome of Macaca mulatta and functional characterization of RNA editing in mitochondria 被引量:1
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作者 Ling-Qun Ye Hui Zhao +10 位作者 He-JiangZhou Xiao-Die Ren Lin-Lin Liu Newton O.Otecko Zheng-boWang Min-Min Yang Lin Zeng Xin-Tian Hu Yong-Gang Yao Ya-Ping Zhang Dong-Dong Wu 《Science Bulletin》 SCIE EI CAS CSCD 2017年第12期820-830,共11页
RNA editing was first discovered in mitochondrial RNA molecular. However, whether adenosine-toinosine(A-to-I) RNA editing has functions in nuclear genes involved in mitochondria remains elusive.Here, we retrieved 707,... RNA editing was first discovered in mitochondrial RNA molecular. However, whether adenosine-toinosine(A-to-I) RNA editing has functions in nuclear genes involved in mitochondria remains elusive.Here, we retrieved 707,246 A-to-I RNA editing sites in Macaca mulatta leveraging massive transcriptomes of 30 different tissues and genomes of nine tissues, together with the reported data, and found that A-to-I RNA editing occurred frequently in nuclear genes that have functions in mitochondria. The mitochondrial structure, the level of ATP production, and the expression of some key genes involved in mitochondrial function were dysregulated after knocking down the expression of ADAR1 and ADAR2, the key genes encoding the enzyme responsible for RNA editing. When investigating dynamic changes of RNA editing during brain development, an amino-acid-changing RNA editing site(I234/V) in MFN1, a mediator of mitochondrial fusion, was identified to be significantly correlated with age, and could influence the function of MFN1. When studying transcriptomes of brain disorder, we found that dysregulated RNA editing sites in autism were also enriched within genes having mitochondrial functions. These data indicated that RNA editing had a significant function in mitochondria via their influence on nuclear genes. 展开更多
关键词 线粒体RNA RNA编辑 猕猴 特性 编辑位点 核基因 体功能 动态变化
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