缝裂层孔菌对小鼠的抑瘤及免疫调节作用

目的:研究缝裂层孔菌(PL)的抗肿瘤作用,初步探讨其抑瘤作用的机理。方法:建立小鼠实体瘤动物模型,连续10 d灌胃给予PL,处死后同时检测治疗组及对照组皮下瘤重、胸腺重、脾重;采用MTT法检测荷瘤小鼠脾T淋巴细胞及B淋巴细胞对ConA及LPS刺激的转化能力;采用绵羊红细胞作为抗原,检测荷瘤鼠抗体生成细胞功能;采用L929为靶细胞,检测NK细胞杀伤L929细胞功能;荷瘤鼠腹腔注射诱导剂诱生巨噬细胞,体外检测巨噬细胞吞噬中性红功能。结果:PL 2.0、1.0 g.kg-1可抑制小鼠肝癌、胃癌和S180细胞的生长,其对肝癌的抑制率分别为38.19%和37.15%,对胃癌的抑制率分别为32.46%和30.91%,对小鼠S180肉瘤的抑制率分别为36.09%和34.16%,与对照组比较差异有显著性(P<0.05);PL 2.0 g.kg-1可明显提高小鼠T、B淋巴细胞对ConA及LPS的反应性,提高淋巴细胞转化功能(P<0.05);抗体生成细胞实验结果显示,PL 2.0及1.0 g.kg-1剂量组A值高于对照组,说明其溶血红细胞释放血红蛋白量多于对照组,其抗体生成细胞溶解绵羊红细胞能力强于对照组(P<0.05,P<0.001);PL 2.0 g.kg-1也可提高小鼠NK细胞杀伤L929细胞功能,杀伤率为67.82%,明显强于对照组(P<0.01);PL 2.0及1.0 g.kg-1还可明显增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,与对照组比较差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。结论:PL能增强免疫细胞功能,提高机体免疫力,其抗瘤作用与激活体内免疫系统有关。

缝裂层孔菌调节荷瘤小鼠免疫功能的实验研究

目的研究缝裂层孔菌对荷瘤小鼠免疫功能的调节作用。方法通过建立小鼠实体瘤动物模型,观察缝裂层孔菌高、中、低三个剂量组(2.0 g/kg,1.0 g/kg,0.5 g/kg)对荷MFC胃癌小鼠胸腺指数及脾指数影响;采用荷瘤鼠腹腔注射诱导剂诱生巨噬细胞,体外检测巨噬细胞吞噬中性红功能,观察缝裂层孔菌对荷MFC胃癌小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响;采用ELISA法检测缝裂层孔菌对荷lewis肺癌小鼠血清细胞因子IFN-γI、L-2I、L-6I、L-10含量水平的影响。结果缝裂层孔菌高、中剂量组荷MFC胃癌小鼠的胸腺指数及脾指数有所提高,与对照组比较有统计学差异(P<0.05);缝裂层孔菌高、中剂量组具有提高荷MFC胃癌小鼠巨噬细胞的吞噬功能(P<0.05,P<0.01);缝裂层孔菌三个剂量组荷lewis肺癌小鼠血清IFN-γI、L-2含量较对照组及环磷酰胺组明显增高(P<0.05,P<0.01,P<0.001),而IL-6I、L-10含量则相对下降(P<0.05)。结论缝裂层孔菌具有提高荷瘤鼠的细胞及体液免疫作用。

缝裂层孔菌对荷瘤小鼠放、化疗的减毒增效作用

目的:通过缝裂层孔菌(PL)与放、化疗联合应用于荷瘤小鼠,探讨PL对放、化疗的减毒增效作用。方法:小鼠右前肢腋下荷瘤细胞胃癌(MFC细胞株),随机分13组,即空白对照组,及单纯CTX高、中和低3个剂量组(20、10和5 mg.kg-1),以及PL高、中和低3个剂量(2.0、1.0和0.5 g.kg-1)分别与CTX3个剂量联合给药组。空白对照组每日灌胃给予蒸馏水0.01 mL.g-1;CTX为隔日腹腔注射给药;PL为每日灌胃给药,连续给药10 d。停药次日处死小鼠,应用重量法观察各组荷瘤(胃癌)小鼠体重和瘤重的变化。小鼠右后肢胫骨外侧皮下荷瘤细胞肝癌(HepA细胞株),随机分5组,即空白对照组、单纯X线放疗组、PL 3个剂量分别与放疗联合治疗组。空白对照组每日灌胃给予蒸馏水0.01 mL.g-1;PL为每日灌胃给药,连续14 d;X线照射于PL给药第5天开始,每次照射0.5 Gy,每日1次,共5次。PL停药后次日处死小鼠,应用重量法观察各组荷瘤(肝癌)小鼠体重和瘤重的变化。结果:单纯CTX 3个剂量和分别与PL 3个剂量联合给药各组荷瘤(胃癌)小鼠瘤重较空白对照组均明显降低(P<0.01);CTX和PL联合给药各组荷瘤(胃癌)小鼠瘤重较单纯同剂量CTX组均明显降低(P<0.05或P<0.01)。与空白对照组比较,单纯应用CTX 3个剂量组荷瘤(胃癌)小鼠体重均明显降低(P<0.05或P<0.01),CTX和PL联合给药各组荷瘤(胃癌)小鼠体重均无明显变化。单纯X线放疗和分别与PL高、中和低3个剂量联合应用各组荷瘤(肝癌)小鼠瘤重较空白对照组均明显降低(P<0.01),不同剂量PL和X线联合应用各组荷瘤(肝癌)小鼠瘤重较单纯X线放疗组均显著降低(P<0.05或P<0.01)。与空白对照组比较,单纯X线放疗组荷瘤(肝癌)小鼠体重明显降低(P<0.05),不同剂量PL和X线联合应用各组荷瘤(肝癌)小鼠体重均无明显变化。结论:PL与放疗(CTX)、化疗(X线)联合应用,在治疗荷瘤(胃癌、肝癌)小鼠中有协同作用,并且PL对放、化疗有减毒增效作用。

缝裂层孔菌深层发酵时间、pH变化与菌丝生长的研究

目的考察发酵时间p H值变化与菌丝生长的关系,为放大生产积累数据。方法种子罐规格:500L、2000L、15T;材质:304不锈钢;菌株:虫草菌种(PL-12);制备工艺:生物发酵。结果菌丝体经缓慢生长期,快速生长期,稳定期p H值呈下降趋势,随着发酵时间延长,p H值回升,判定菌丝生长进入衰退期,终止发酵。结论制备工艺稳定、可控,可得理想菌丝体。