视网膜细胞间缝隙连接研究进展

视网膜各层及各种细胞均有丰富缝隙连接蛋白(connexin,Cx)的表达,不同的动物种类和不同的视网膜细胞可以表达不同的缝隙连接蛋白。胚胎期眼球和视网膜的生长发育、成年视网膜正常生理功能的形成等均与缝隙连接蛋白的表达密切相连,并且这些缝隙连接蛋白的表达和功能可以被外界环境所影响,从而达到调节视网膜功能的目的。

甘珀酸对兔脑血管痉挛时缝隙连接蛋白43磷酸化表达的影响

目的探讨甘珀酸对兔实验性蛛网膜下腔出血（SAH）后脑血管痉挛（CVS）时缝隙连接蛋白43（Cx43）磷酸化表达的影响。方法建立兔二次SAH模型，脑池及静脉分别给予甘珀酸，脑血管造影及光镜观察分析基底动脉直径及形态学变化并应用Western blot检测基底动脉Cx43蛋白磷酸化表达的变化。结果SAH组与正常组相比，脑血管造影及光镜观察结果证实基底动脉痉挛明显；痉挛动脉壁磷酸化的Cx43（P—Cx43）蛋白表达显著升高，但去磷酸化的Cx43（NP—Cx43）蛋白表达显著减少。甘珀酸脑池处理组及静脉处理组与SAH组相比，脑血管造影及光镜观察结果证实基底动脉痉挛显著减轻；痉挛动脉壁P—Cx43蛋白表达显著减少，但NP—Cx43蛋白表达显著升高。结论SAH后，Cx43蛋白磷酸化表达发生变化，脑池或静脉给予甘珀酸能明显缓解SAH后CVS，其作用机制可能与基底动脉Cx43蛋白磷酸化表达变化有关。

血吸虫可溶性虫卵抗原诱发脑血管内皮细胞缝隙连接蛋白Cx37mRNA及蛋白的表达

目的通过观察血吸虫可溶性虫卵抗原（SEA）孵育培养的脑血管内皮细胞缝隙连接（GJ）蛋白的表达和分布，探讨脑动脉GJ在脑血吸虫病病理发生中的作用。方法使用血吸虫SEA孵育培养幼兔脑基底动脉血管内皮细胞，实验分对照组、SEA1～5组：加入SEA（质量浓度分别为10．0％、5．0％、3．3％、2．5％、2．0％），应用逆转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）技术测定兔脑血管内皮细胞GJ蛋白Cx37mRNA的表达：应用Western印迹技术测定兔脑血管内皮细胞GJ蛋白Cx37蛋白的表达。结果对照组和SEA1～5组的GJ蛋白Cx37mRNA水平分别为0．239±0．037、0．260±0．043、0．218±0．310、0．647±0．040、0．419±0．036、0．513±0．038：其中SEA3～5组的GJ蛋白Cx37mRNA水平高于对照组（P均〈0．05）。对照组和SEA1～5组GJ蛋白Cx37蛋白表达分别为0．401±0．045、0．485±0．048、0．749±0．052、1．119±0．063、1．015±0．057、0．605±0．047。其中SEA2～5组Cx37蛋白表达高于对照组（P均〈0．05）。结论血吸虫SEA孵育培养的兔脑血管内皮细胞GJ蛋白Cx37mRNA及其蛋白水平高于对照组，提示GJ蛋白在SEA及其分泌物浸润脑动脉沉积于脑组织。从而在诱发脑血吸虫病的病理发生机制中可能起重要的作用。

抑制缝隙连接蛋白43表达对大鼠催乳素腺瘤中胶质细胞生长因子表达的影响

目的探讨在催乳素腺瘤中，抑制缝隙连接蛋白43（Cx43）的表达对大鼠胶质细胞生长因子表达的影响。方法采用完全随机分组的方法，将48只雌性大鼠分为正常组、单纯雌二醇组、雌二醇＋甘珀酸组及单纯甘珀酸组，每组12只。采用雌二醇诱导大鼠催乳素腺瘤模型。正常组不接受药物处理；单纯雌二醇组肌肉注射雌二醇（3000mg／kg，1次／周，连续注射13周）；雌二醇＋甘珀酸组于注射雌二醇10周后，经蛛网膜下腔注射甘珀酸（1次／周，连续3周）；单纯甘珀酸组仅接受3周的甘珀酸注射。观察垂体的体质量和组织形态学变化，Western blot法检测Cx43和胶质细胞生长因子（GGF）的表达。结果正常组、单纯雌二醇组、单纯甘珀酸组、雌二醇＋甘珀酸组大鼠垂体的体质量分别为（51．0±0．4）mg、（93．3±1．0）mg、（52．7±2．1）mg、（68．5±1．3）mg，差异有统计学意义（F=786．73，P〈0．01）；Cx43相对表达量分别为（8．0±2．2）％、（34．7±4．0）％、（9．3±3．1）％、（15．3±3．8）％，GGF的相对表达量分别为（17．7±5．2）％、（46．9±1．4）％、（15．8±3．6）％、（20．0±2．3）％，差异均有统计学意义（F=1051．51，P〈0．01；F=806．58，P〈0．01）。雌二醇＋甘珀酸组垂体组织病理学形态接近于正常组和单纯甘珀酸组。结论通过抑制垂体Cx43的表达，能够抑制GGF的表达，从而抑制大鼠垂体催乳素腺瘤的生长。

飞行员CX-37基因多态性与冠状动脉硬化的关系

目的:研究飞行员冠状动脉粥样硬化(AS)患者血清间隙连接蛋白37(CX-37)水平及CX-37基因-1019C>T位点的基因多态性与AS的关系。方法:选取确诊有AS的飞行员及普通人,健康飞行员和普通健康体检者,测定血清CX-37水平,比较4组受检者CX-37基因-1019C>T位点的基因型分布和等位基因的频率。结果:飞行员AS组及普通人AS组血清CX-37水平明显高于飞行员正常组及普通人正常组(P<0.05),但是普通人AS组与飞行员AS组CX-37水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);4组CX-37基因-1019C>T位点CC、CT、TT基因型分布及等位基因频率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:飞行员的工作性质不影响血清CX-37的表达水平,CX-37基因-1019C>T位点基因多态性与AS发病无关。

博莱霉素对大鼠肺微血管内皮细胞紧密连接改变及Cx43表达变化的影响

目的观察博莱霉素(BLM)造模大鼠肺微血管内皮细胞(EC)紧密连接及Cx43表达的变化特征,探讨其在肺纤维化发生中的作用和意义。方法健康SD大鼠随机分为对照组和实验组每组20只,采用ELISA法测定对照组和实验组第3、7、14、28天血浆血管性假血友病因子(vWf)水平。对采血后的大鼠,分别在第3、7、14、28天行硝酸镧灌注,制作肺组织病理标本,用透射电镜观察血管EC紧密连接及镧颗粒分布;采用组织块培养法行肺微血管EC体外培养,用激光共聚焦显微镜观察Cx43表达。结果各实验组大鼠血清中vWf水平均高于对照组,以第3天最高,差异有统计学意义(P<0.01)。对照组EC结构完整,EC间连接紧密,未见镧盐颗粒通过EC间的紧密连接。实验组均可见EC连接间隙增宽,并有高密度的镧盐颗粒在细胞连接间隙中线状沉淀。实验组Cx43阳性反应的范围及强度均明显减弱,第3、7、14、28天Cx43蛋白的荧光反应强度及表达阳性率(25%、38%、45%、71%),均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论EC紧密连接呈持续开放状态,导致炎性细胞渗出及与之相应的细胞因子分泌持续增加,启动成纤维细胞增殖过度可能是BLM诱发肺间质结构发生异常改变的重要病理基础。