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生物素标记HBV RNA探针的制备及应用 被引量:1
1
作者 陈晓旭 侯淑霞 郭哲 《临床军医杂志》 CAS 1993年第2期5-8,共4页
本文首次采用SP_(65)特殊质粒与人类的乙型肝炎病毒DNA(HBVDNA)重组。制备了Bio—HBV RNA探针,能特异地与HBV DNA杂交。并将该探针与缺口转移(Nick—translation)方法标记的Bio—HBV DNA探针进行了比较。结果显示出Bio—HBV RNA探针的... 本文首次采用SP_(65)特殊质粒与人类的乙型肝炎病毒DNA(HBVDNA)重组。制备了Bio—HBV RNA探针,能特异地与HBV DNA杂交。并将该探针与缺口转移(Nick—translation)方法标记的Bio—HBV DNA探针进行了比较。结果显示出Bio—HBV RNA探针的敏感性比Bio—HBV DNA探针的敏感性提高10倍。本实验还分别应用了两种探针同时检测了70例乙肝病人血清中HBV DNA。阳性率各为31.42%,28.57%(P>0.25)。并对Bio—HBV RNA探针应用于临床检测乙肝病毒DNA的效能进行了初步的探讨。 展开更多
关键词 乙肝病毒DNA SP56质粒 缺口转移 生物素探针
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大鼠梗阻性胆管炎细胞免疫功能降低及中药锦红片的影响 被引量:14
2
作者 章学林 张静喆 +2 位作者 顾宏刚 马恩伟 朱培庭 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第18期2050-2053,共4页
目的:探讨梗阻性胆管炎大鼠细胞免疫功能降低的发生机制及清热通下中药锦红片的影响.方法:♂SD大鼠24只建立急性梗阻性胆管炎模型,随机分为模型组(n=8)、锦红片治疗组(n=8)和单纯胆管梗阻组(n=8),检测血浆IL-2,CD_3^+,CD_4^+,CD_8^+,内... 目的:探讨梗阻性胆管炎大鼠细胞免疫功能降低的发生机制及清热通下中药锦红片的影响.方法:♂SD大鼠24只建立急性梗阻性胆管炎模型,随机分为模型组(n=8)、锦红片治疗组(n=8)和单纯胆管梗阻组(n=8),检测血浆IL-2,CD_3^+,CD_4^+,CD_8^+,内毒素,胸腺指数,胸腺细胞凋亡指数及电镜下观察胸腺的超微结构及凋亡.结果:模型组IL-2,CD_3^+,CD_4^+和胸腺指数显著低于治疗组和单纯胆管梗阻组(IL-2:28.5±3.0 ng/L vs 33.9±3.6 ng/L,39.6±2.2 ng/L,P<0.05,P<0.01;CD_3^+:54.5%±5.5% vs 70.7%±4.8%,66.3%±7.1%,均P<0.01;CD_4^+:34.5%±8.3% vs 44.2%±3.3%,44.5%±4.2%,均P<0.01:胸腺指数:0.89±0.18 vs 1.10±0.13.1.12±0.24,均P<0.05),CD_8^+3组间没有统计学差异,血浆内毒素和凋亡指数明显高于治疗组和梗阻组(内毒素:0.85±0.14 Eu/mL vs 0.53±0.10 EU/mL,0.49±0.11 EU/mL,均P<0.01;凋亡指数:25.7±5.1 vs 15.8±5.5.9.0±3.1.P<0.05,P<0.01),模型组胸腺可见较多典型的凋亡细胞,结果显示经中药干预治疗后,免疫功能、内毒素血症和胸腺细胞凋亡有所改善,接近单纯胆管梗阻组水平.结论:梗阻性胆管炎大鼠存在免疫功能降低,胸腺细胞异常凋亡.锦红片对维持免疫机能的稳定有积极的意义. 展开更多
关键词 中药锦红片 梗阻性胆管炎 胸腺 细胞免疫 凋亡 酶联免疫法 末端脱氧核苷酸转移缺口标记
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TUNEL法原位检测心肌细胞凋亡的改进 被引量:18
3
作者 董小莉 谭宁 +2 位作者 符永恒 邓宇珺 孙凯亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1038-1040,共3页
目的:脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)是检测细胞凋亡的常用方法,但以往仍有TUNEL假阳性率高的报道。本实验目的在于探讨应用TUNEL检测心肌细胞凋亡时增强其特异性的方法。方法:缺血再灌注心肌组织的石蜡切片(2μm... 目的:脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)是检测细胞凋亡的常用方法,但以往仍有TUNEL假阳性率高的报道。本实验目的在于探讨应用TUNEL检测心肌细胞凋亡时增强其特异性的方法。方法:缺血再灌注心肌组织的石蜡切片(2μm)和冰冻切片(3μm)进行TUNEL染色。分为石蜡切片HE染色组,石蜡切片常规TUNEL组,冰冻切片改良TUNEL组。石蜡切片常规TUNEL组完全按照试剂盒说明书进行,光学显微镜下观察;冰冻切片改良TUNEL组使用荧光素(FITC)标记的dUTP及4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DA-PI)双重荧光染色,在共聚焦显微镜下观察。结果:TUNEL改良法凋亡背景清晰,阳性细胞主要分布在缺血再灌注损伤区域,其凋亡检出率与石蜡切片HE染色相比无显著差异(P>0.05);常规TUNEL组凋亡背景清晰度较差,非缺血再灌注损伤区域亦有大量阳性细胞出现,其凋亡率明显高于石蜡切片HE染色(P<0.01)。结论:冰冻切片改良TUNEL法可能是更适宜研究SD大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的方法。 展开更多
关键词 心肌细胞凋亡 冰冻切片 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法
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肾透明细胞癌发病机制中细胞凋亡的初步研究 被引量:1
4
作者 张建勇 董晓菊 +2 位作者 张雷 孙万彬 赵春芳 《中国医药导刊》 2009年第8期1333-1333,1335,共2页
目的:研究肾透明细胞癌发病机制与组织细胞凋亡的关系。方法:将标本离体后分成三组,(1)肾透明细胞癌组(根据肿瘤分期再分四组);(2)癌旁组织组;(3)正常肾组织组。用TUNEL法对标本检测。结果:在肾癌组织、癌旁组织及正常肾组织组均有凋亡... 目的:研究肾透明细胞癌发病机制与组织细胞凋亡的关系。方法:将标本离体后分成三组,(1)肾透明细胞癌组(根据肿瘤分期再分四组);(2)癌旁组织组;(3)正常肾组织组。用TUNEL法对标本检测。结果:在肾癌组织、癌旁组织及正常肾组织组均有凋亡发生。正常肾组织组细胞核有弱的阳性表达,癌旁组织表达明显增多,肾癌组织阳性表达最少。结论:细胞凋亡减少是肾透明细胞癌发生的重要机制之一。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌 细胞凋亡 脱氧核苷酸末端转移介导的缺口末端标记法(TUNEL)
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Fluoro-Jade B染色与TUNEL比较检测乙醇诱导神经细胞凋亡 被引量:1
5
作者 刘红亮 王靖凯 +3 位作者 邓锦波 胡磊 张路 刘彬 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期356-359,共4页
目的:建立利用Fluoro-Jade B(FJ-B)染色检测乙醇诱导PC12细胞及小鼠海马脑片上神经细胞凋亡的方法并与TUNEL比较.方法:利用不同浓度的乙醇分别诱导PC12细胞和小鼠海马脑片上神经细胞凋亡,用FJ-B染色检测神经细胞凋亡,同时用TUNEL检测进... 目的:建立利用Fluoro-Jade B(FJ-B)染色检测乙醇诱导PC12细胞及小鼠海马脑片上神经细胞凋亡的方法并与TUNEL比较.方法:利用不同浓度的乙醇分别诱导PC12细胞和小鼠海马脑片上神经细胞凋亡,用FJ-B染色检测神经细胞凋亡,同时用TUNEL检测进行比较,从凋亡率、单位面积阳性细胞数的统计结果分析、实验过程等方面评价2种方法的优缺点.结果:2种方法检测结果显示乙醇处理组与对照组相比差异有统计学意义,2种方法相同组间对比分析差异无统计学意义.结论:FJ-B染色与TUNEL在检测乙醇对神经细胞凋亡影响的结果无差异;且FJ-B染色更适合在脑片上检测神经细胞的凋亡. 展开更多
关键词 Fluoro-Jade染色 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 海马脑片 凋亡检测
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TUNEL染色结合细胞形态学特点鉴别急性胰腺炎时腺泡细胞的死亡方式 被引量:1
6
作者 胡洋洋 周春华 +2 位作者 窦文欢 凤辉 王少峰 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第20期3259-3264,共6页
目的:通过脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TdT-mediated dUTP nick labeling,TUNEL)染色检测大鼠急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)中腺泡细胞的死亡情况,探讨TUNEL染色阳性细胞的形态与细胞死亡方式之间的关系.方法:大... 目的:通过脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TdT-mediated dUTP nick labeling,TUNEL)染色检测大鼠急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)中腺泡细胞的死亡情况,探讨TUNEL染色阳性细胞的形态与细胞死亡方式之间的关系.方法:大鼠随机分为ANP组和假手术组(sham operation,SO),每组6只,利用4%的牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射建立大鼠急性坏死性胰腺炎(acute necrotizing pancreatitis,ANP)模型,对两组大鼠胰腺组织进行病理学观察并采用TUNEL技术对胰腺组织切片进行染色,光镜下观察TUNEL染色阳性细胞的形态学表现.结果:对比假手术组,ANP组大鼠胰腺组织出现典型的AP样病理改变,同时可见大量的TUNEL染色阳性腺泡细胞.阳性细胞之间的形态学特点各异,其中既有细胞呈凋亡表现,如核固缩和核破裂伴凋亡小体形成;也有细胞呈坏死表现,如核膨胀、核溶解以及胞质空泡化.两种细胞死亡方式的形态学表现之间存在显著差异.结论:AP时,TUNEL染色并不能很好地区分腺泡细胞的坏死与凋亡,但其联合阳性染色细胞的形态学特征可初步鉴别两种细胞死亡方式. 展开更多
关键词 急性胰腺炎 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记 凋亡 坏死
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C-myc基因表达及细胞凋亡在脂溢性角化病皮损中的意义 被引量:3
7
作者 杜镇 海艺贝 +3 位作者 冯世军 王艳心 王成 李保强 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第11期41-44,共4页
目的观察脂溢性角化病(SK)中C-myc基因表达及细胞凋亡情况,探讨脂溢性角化病的发病机制。方法对66例脂溢性角化病皮损及10例正常皮肤组织采用免疫组织化学法检测C-myc基因表达及原位细胞凋亡检测(TUNEL)法检测细胞凋亡情况。结果两组性... 目的观察脂溢性角化病(SK)中C-myc基因表达及细胞凋亡情况,探讨脂溢性角化病的发病机制。方法对66例脂溢性角化病皮损及10例正常皮肤组织采用免疫组织化学法检测C-myc基因表达及原位细胞凋亡检测(TUNEL)法检测细胞凋亡情况。结果两组性别、年龄差异均无统计学意义(P>0.05);SK组皮损区C-myc基因阳性细胞数百分比(21.94±19.45)%与对照组(0%)相比增加(P<0.05);66例SK皮损中有52例C-myc基因表达阳性,对照组中均无阳性表达,两组阳性率差异有统计学意义(P<0.05);TUNEL凋亡检测中SK组的凋亡指数(53.01±31.97)与对照组(33.50±23.86)比较,差异无统计学意义(P>0.05);Spearman相关性分析显示,C-myc基因在SK皮损中阳性细胞百分比与SK皮损中细胞凋亡指数差异无统计学意义(P>0.05)。结论 C-myc基因参与脂溢性角化病的发生发展,脂溢性角化病皮损中细胞凋亡有所增加。该结果对研究其发病机制有一定的指导意义。 展开更多
关键词 脂溢性角化病 免疫组织化学 C-MYC基因 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记
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肝胆管癌中bcl-2、bax基因表达和细胞凋亡的研究 被引量:6
8
作者 单长民 刘同慎 马云 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期405-409,共5页
目的 探索细胞凋亡及相关基因在体内肝胆管癌发生中所起的作用。 方法 用mRNA原位杂交技术和免疫组织化学方法 ,检测了肝胆管癌中bcl 2和bax基因表达 ;利用TUNEL法检测其细胞凋亡 ; 结果 肿瘤中bcl 2表达增强 ,癌旁组织中bax表达增... 目的 探索细胞凋亡及相关基因在体内肝胆管癌发生中所起的作用。 方法 用mRNA原位杂交技术和免疫组织化学方法 ,检测了肝胆管癌中bcl 2和bax基因表达 ;利用TUNEL法检测其细胞凋亡 ; 结果 肿瘤中bcl 2表达增强 ,癌旁组织中bax表达增强 ,癌旁组织中凋亡细胞增加 ; 结论 bcl 2基因激活后 ,抑制bax的作用及基因表达 ,可能使细胞的增殖加快 ,肿瘤发生 ; 展开更多
关键词 BAX基因 细胞凋亡 原位杂交 免疫组织化学 BCL-2基因 脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 肝胆管癌
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乳腺癌组织中p51基因的表达及其意义 被引量:1
9
作者 杨开颜 俞康 +2 位作者 李剑敏 黄卡特 周韧 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2006年第3期249-251,共3页
背景与目的:研究p51基因与乳腺癌的关系。材料与方法:应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(Terminaldeoxynucleotidyltransferasebiotin-dUTPnickendlabeling,TUNEL)、RT-PCR等技术检测乳腺癌组织p51基因的表达及其与细胞... 背景与目的:研究p51基因与乳腺癌的关系。材料与方法:应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(Terminaldeoxynucleotidyltransferasebiotin-dUTPnickendlabeling,TUNEL)、RT-PCR等技术检测乳腺癌组织p51基因的表达及其与细胞凋亡、激素受体的关系。结果:乳腺癌(45例)组织p51基因表达(46.7%)高于良性乳腺病变(35例)组织(11.4%);淋巴结转移阳性者p51基因表达(90.5%)明显高于阴性者(8.3%);p51基因表达与雌激素、孕激素受体无相关性(P>0.05);p51基因表达阳性的肿瘤细胞凋亡率与阴性细胞差异无统计学意义(P>0.05)。结论:P51基因表达增多可能与乳腺癌发病及转移有关。 展开更多
关键词 P51基因 乳腺癌 凋亡 末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记 反转录酶-PCR
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大鼠脑损伤后氨基胍的神经保护作用 被引量:6
10
作者 倪衡建 何志贤 +2 位作者 张志军 杨学峰 胡燕 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期346-350,共5页
目的探讨大鼠脑损伤后诱导性一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂———氨基胍(AG)的神经保护作用。方法采用大鼠额叶锐器损伤模型,将SD大鼠随机分成氨基胍(AG)治疗组和生理盐水(NS)对照组。用生物化学方法检测NO含量;RT-PCR法及免疫组织化学染色... 目的探讨大鼠脑损伤后诱导性一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂———氨基胍(AG)的神经保护作用。方法采用大鼠额叶锐器损伤模型,将SD大鼠随机分成氨基胍(AG)治疗组和生理盐水(NS)对照组。用生物化学方法检测NO含量;RT-PCR法及免疫组织化学染色方法观察iNOSmRNA和iNOS阳性细胞表达变化;末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡。将两组结果进行比较。结果AG治疗组创伤区及周边NO含量、iNOSmRNA和iNOS阳性细胞表达量较NS组明显降低,凋亡细胞数量也相应明显减少。结论AG能选择性地抑制iNOS表达,减少NO过量产生,从而减少细胞凋亡,发挥神经保护作用。 展开更多
关键词 额叶损伤 氨基胍 神经保护 诱导性一氧化氮合酶 末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL) 逆转录聚合酶连反应 免疫组织化学 大鼠
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重组人钙调素对小鼠胚胎发育及凋亡的影响
11
作者 章汉旺 李慧 《生殖医学杂志》 CAS 2007年第4期264-268,共5页
目的探讨外源重组人钙调素(rhCAM)对小鼠早期胚胎体外发育及凋亡的影响。方法小鼠超促排卵,收集2-细胞胚胎置于含不同浓度rhCAM的IVF-30培养液中,观察并记录胚胎形态,TUNEL法检测囊胚细胞数及囊胚细胞凋亡情况。结果20μg/ml rhCAM组的... 目的探讨外源重组人钙调素(rhCAM)对小鼠早期胚胎体外发育及凋亡的影响。方法小鼠超促排卵,收集2-细胞胚胎置于含不同浓度rhCAM的IVF-30培养液中,观察并记录胚胎形态,TUNEL法检测囊胚细胞数及囊胚细胞凋亡情况。结果20μg/ml rhCAM组的胚胎体外培养48、72 h的囊胚形成率和孵化囊胚率均高于对照组,该组体外培养72 h囊胚细胞凋亡指数显著低于对照组。200μg/ml rhCAM组的胚胎囊胚形成率低于对照组,凋亡指数显著高于对照组。结论一定浓度的rhCAM可促进胚胎体外发育并可抑制胚胎细胞的凋亡。 展开更多
关键词 胚胎 钙调素 凋亡 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法
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构建游离脂肪酸诱导胰岛细胞凋亡模型验证球形脂联素的拮抗作用 被引量:6
12
作者 赵红莉 严励 +4 位作者 程桦 叶建红 周嘉 李志臻 傅祖植 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2005年第19期111-113,i003,共4页
目的:构建游离脂肪酸(棕榈酸)诱导胰岛细胞凋亡模型,并观察球形脂联素对胰岛细胞凋亡的拮抗作用。方法:实验于2004-15/2005-30在中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心完成。构建游离脂肪酸诱导胰岛细胞凋亡模型及分组:采用小鼠胰岛... 目的:构建游离脂肪酸(棕榈酸)诱导胰岛细胞凋亡模型,并观察球形脂联素对胰岛细胞凋亡的拮抗作用。方法:实验于2004-15/2005-30在中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心完成。构建游离脂肪酸诱导胰岛细胞凋亡模型及分组:采用小鼠胰岛素瘤细胞株βNIT-1,取对数生长期的细胞,按1×105个/孔的密度接种于6孔板,细胞生长至80%融合时将随机细胞分为3组,每组3孔,分别为对照组,棕榈酸组,棕榈酸+球形脂联素组。3组培养基均含5g/L的牛血清白蛋白、体积分数为0.03胎牛血清及体积分数为0.01的无水乙醇;棕榈酸组又加含有终浓度为500μmol/L棕榈酸;棕榈酸+球形脂联素组又加终浓度为500μmol/L棕榈酸和0.5mg/L脂联素。处理48h后终止实验。采用Hochest33342和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测棕榈酸诱导胰岛细胞凋亡率和凋亡指数及脂联素处理后脂性凋亡的改善情况。结果:①经Hochest33342染色检测3组小鼠胰岛素瘤细胞株βNIT-1细胞凋亡指数明显不同(F=300.270,P<0.05),棕榈酸组明显高于对照组犤(12.40±1.57)%,(2.05±0.59)%犦,说明500μmol/L棕榈酸可成功构建胰岛细胞凋亡模型,经脂联素处理后凋亡指数明显降低犤(12.40±1.57)%,(3.87±0.93)%犦,说明球形脂联素组对胰岛细胞凋亡有拮抗作用。②经脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测小鼠胰岛素瘤细胞株βNIT-1细胞凋亡指数3组明显不同(F=191.221,P<0.05),棕榈酸组明显高于对照组犤(26.33±5.6)%,(2.32±0.78)%犦,说明500μmol/L棕榈酸可成功构建胰岛细胞凋亡模型,经脂联素处理后凋亡指数明显降低犤(2.32±0.78)%,(4.90±0.82)%,P<0.05犦说明球形脂联素组对胰岛细胞凋亡有拮抗作用。结论:①Hoescht染色法及脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法结果均表明在体积分数为0.03胎牛血清、5g/L的牛血清白蛋白的Dulbecco改良的Eagle培养液条件下加入终浓度为500μmol/L棕榈酸处理细胞48h可成功构建胰岛细胞凋亡的细胞模型。②球形脂联素可拮抗胰岛细胞的脂性凋亡,从而发挥了其调节糖脂代谢的作用。 展开更多
关键词 胰岛细胞凋亡 脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 游离脂肪酸 拮抗作用 脂联素 球形 模型验证 中山大学附属第二医院 细胞凋亡模型 mol/L 牛血清白蛋白 细胞凋亡指数 NIT-1 瘤细胞株 体积分数 棕榈酸 胎牛血清
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信号转导分子smad4基因表达抑制体外培养人血管平滑肌细胞的增殖
13
作者 闫承慧 申景岭 +5 位作者 金焰 王柏秋 王哲 张贵寅 李璞 傅松滨 《中国临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2005年第23期58-59,i002,共3页
目的:探讨细胞内转化生长因子β信号通路中信号转导分子Smad4与平滑肌细胞的增殖关系。方法:实验于2003-08/10在哈尔滨医科大学医学遗传学研究室完成。①取体质量200g左右的健康雄性SD大鼠,常规胶原酶消化法原代培养大鼠血管平滑肌细胞... 目的:探讨细胞内转化生长因子β信号通路中信号转导分子Smad4与平滑肌细胞的增殖关系。方法:实验于2003-08/10在哈尔滨医科大学医学遗传学研究室完成。①取体质量200g左右的健康雄性SD大鼠,常规胶原酶消化法原代培养大鼠血管平滑肌细胞。用体积分数为0.2和0.05(去血清培养)胎牛血清和的Dulbecco改良的Eagle培养基,37℃,体积分数0.05CO2进行培养,2.5g/L胰酶消化传代。血管平滑肌细胞经锥虫蓝染色,存活细胞数在98%以上。形态学上出现典型的“峰和谷”样生长状态,抗平滑肌特异α-肌动蛋白免疫组织化学染色阳性。取3~8代细胞用于实验。②观察项目:转染前后细胞增殖能力和细胞凋亡能力的检测应用流式细胞分析仪和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法凋亡检测试剂盒完成。smad4的表达及部分与细胞周期调控相关基因(p16、细胞周期调控激酶4和细胞周期因子E)和细胞凋亡基因(半胱天冬酶2和半胱天冬酶3)表达变化应用免疫印迹法和荧光免疫组化方法检测。结果:①转染前后细胞增殖能力和细胞凋亡能力流式细胞分析仪和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法测定结果:smad4基因过表达调控人血管平滑肌细胞增殖能力下降DNA合成前期细胞明显增加[(72.33±4.35)%],正常培养细胞DNA合成前期细胞数相对较少[(45.88±1.58)%]。②smad4的表达及部分与细胞周期调控相关基因免疫印迹法和荧光免疫组化方法检测结果:转染后细胞凋亡能力增加;细胞周期抑制基因p16表达增加,细胞周期调控激酶4和细胞周期因子E表达下降,凋亡相关基因半胱天冬酶2和半胱天冬酶3表达增加。结论:smad4基因对血管平滑肌细胞增殖能力的抑制作用主要通过抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的发生而实现。转化生长因子β信号传导通路对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用除了能够有效阻滞细胞周期的演进外,还能够诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 SMAD4基因 信号转导分子 脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 人血管平滑肌细胞 体外培养 表达抑制 细胞增殖能力 细胞周期调控 转化生长因子β 流式细胞分析仪 血管平滑肌细胞增殖 免疫组织化学染色 免疫组化方法
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TUNEL法检测重组vMIP-Ⅱ对SIV感染模型淋巴细胞凋亡的影响 被引量:1
14
作者 刘宏艳 孙晗笑 《四川医学》 CAS 2005年第3期246-248,共3页
目的 探讨TUNEL技术检测的vMIP -Ⅱ对SIV感染的猴淋巴组织中淋巴细胞凋亡的影响是否与其引起的感染淋巴组织中细胞的增殖有关。方法 取 3个剂量组的vMIP -Ⅱ注射治疗后的SIV感染模型的淋巴组织标本 ,用TUNEL法检测每个剂量组动物模型... 目的 探讨TUNEL技术检测的vMIP -Ⅱ对SIV感染的猴淋巴组织中淋巴细胞凋亡的影响是否与其引起的感染淋巴组织中细胞的增殖有关。方法 取 3个剂量组的vMIP -Ⅱ注射治疗后的SIV感染模型的淋巴组织标本 ,用TUNEL法检测每个剂量组动物模型淋巴细胞凋亡率。结果 vMIP -Ⅱ治疗的 3个剂量组与实验对照组相比、组间相比细胞凋亡率无显著性差异 (P >0 . 0 5 )。结论  3个剂量组的vMIP Ⅱ对SIV感染后的猴淋巴组织淋巴细胞凋亡无影响 ,但药物剂量与细胞凋亡率却呈负相关。 展开更多
关键词 末端脱氧核糖核酸转移酶介导的原位缺口末端标记 vMIP-Ⅱ SIV 凋亡
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普通光学显微镜下检测精子DNA损伤的方法
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作者 翟丽萍 张丽红 +2 位作者 张艳萍 王洪岩 江平 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第A02期128-132,共5页
目的探讨简单、稳定的普通光学显微镜下检测精子DNA损伤的方法。方法采用精子染色质扩散(SCD)试验和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)分析2种方法检测60例不育男性和30例正常生育男性的精子DNA损伤以评价精子DNA完整... 目的探讨简单、稳定的普通光学显微镜下检测精子DNA损伤的方法。方法采用精子染色质扩散(SCD)试验和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)分析2种方法检测60例不育男性和30例正常生育男性的精子DNA损伤以评价精子DNA完整性,用普通光学显微镜观察结果,并应用TUNEL-SCD结合试验检测同一玻片上的精子的DNA损伤,比较两种方法的相关性,分析SCD试验检测精子DNA损伤的临床意义。结果SCD试验检测精子DNA损伤百分率,不育组和生育组分别为(23.7±9.3)%和(14.6±3.6)%,差异有统计学意义;TUNEL试验检测精子DNA损伤率,不育组和生育组分别为(21.4±7.5)%和(14.0±3.7)%,差异有统计学意义。SCD试验与TUNEL分析检测精子DNA完整性结果在不育组(r=0.906,P<0.001)和生育组(r=0.811,P<0.001)均具有明显的线性相关关系。TUNEL-SCD结合实验显示,TUNEL阳性和弱阳性精子在SCD实验中为DNA损伤精子TUNEL阴性精子为SCD实验中DNA完整精子。SCD和TUNEL法检测精子DNA损伤、精子密度、前向运动精子、正常精子形态等各单项指标预测男性不育发生的ROC曲线下面积分别为0.833、0.828、0.777、0.810和0.758,SCD检测精子DNA损伤联合精液常规参数指标(Pre1)和TUNEL检测精子DNA损伤联合精液常规参数指标(Pre2)预测男性不育发生的ROC曲线下面积分别为0.943和0.932。结论SCD试验与TUNEL试验均可在光学显微镜下检测精子DNA损伤,精子DNA完整性的检测可以作为一项男性不育检测指标。而SCD试验较TUNEL试验简单、省时,是一种值得临床推广的运用普通光学显微镜检测精子DNA完整性的方法。 展开更多
关键词 男性不育 精子 DNA损伤 精子染色质扩散试验 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记
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恶性黑素瘤FHIT基因蛋白的表达与肿瘤细胞增殖、凋亡关系的研究
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作者 李慎秋 张春梅 熊芬 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期468-468,共1页
关键词 FHIT基因蛋白 细胞凋亡指数 肿瘤细胞增殖 恶性黑素瘤 脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 增殖细胞核抗原 脆性组氨酸三联体 FHIT蛋白 免疫组化SP法
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依托咪酯乳剂对老年大鼠海马神经元凋亡及突触素表达的影响 被引量:1
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作者 冯舒韵 杨承祥 +3 位作者 赵伟成 陈立成 郑雪琴 李云 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2016年第7期613-616,共4页
目的观察腹腔注射依托咪酯乳剂对老年大鼠海马神经元突触素表达的影响。方法选择18月龄的sD大鼠45只,用完全随机分组法分为3组(每组15只):生理盐水组(N组)、依托咪酯组(E组)、脂肪乳组(L组)。实验第1-3天,E组腹腔注射依托咪... 目的观察腹腔注射依托咪酯乳剂对老年大鼠海马神经元突触素表达的影响。方法选择18月龄的sD大鼠45只,用完全随机分组法分为3组(每组15只):生理盐水组(N组)、依托咪酯组(E组)、脂肪乳组(L组)。实验第1-3天,E组腹腔注射依托咪酯(乳剂)20mg/kg,L组腹腔注射20%脂肪乳20mg/kg,N组腹腔注射同等体积的生理盐水,每天1次,连续3d。实验第4天,处死大鼠,取右侧脑海马组织,固定,石蜡切片,进行细胞凋亡TUNEL检验、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(cysteinyl aspartate specific proteinase -3, caspase-3 )Western blot检测及突触素免疫组化检验。结果TUNEL结果:海马CA1区神经元凋亡,与N组、L组比较,E组海马神经元凋亡细胞及凋亡指数无明显增加,差异无统计学意义(P〉0.05)。caspase-3表达结果:海马CA1区神经元easpase-3表达,与N组、L组比较,E组海马神经元活化caspase-3片段表达无明显增加,差异无统计学意义(P〉0.05)。突触素结果:海马CA1区神经元突触素表达,与N组、L组比较,E组海马含突触素的神经元个数无明显减少,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论腹腔注射依托咪酯乳剂20mg/kg对老年大鼠海马神经元的凋亡及突触素的表达无明显影响。 展开更多
关键词 依托咪酯 海马 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 突触素 天冬氨酸特异性半胱 氨酸蛋白酶
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恶性黑素瘤FHIT基因蛋白的表达与肿瘤细胞增殖、凋亡关系的研究 被引量:1
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作者 李慎秋 张春梅 熊芬 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期362-364,共3页
目的研究恶性黑素瘤(maligmantmelanoma,MM)脆性组氨酸三联体(FHIT)基因的表达及与肿瘤细胞增殖、凋亡的关系。方法用免疫组化SP法检测57例原发性MM和20例正常人皮肤中FHIT蛋白和增殖细胞核抗原的表达水平,用脱氧核糖核酸末端转移酶介... 目的研究恶性黑素瘤(maligmantmelanoma,MM)脆性组氨酸三联体(FHIT)基因的表达及与肿瘤细胞增殖、凋亡的关系。方法用免疫组化SP法检测57例原发性MM和20例正常人皮肤中FHIT蛋白和增殖细胞核抗原的表达水平,用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测其细胞凋亡指数。结果①MM中,FHIT蛋白的表达水平明显低于正常人皮肤(P<0.001),增殖细胞核抗原的表达水平和细胞凋亡指数显著高于正常人皮肤(P<0.001);②FHIT蛋白、增殖细胞核抗原蛋白表达水平及细胞凋亡指数与MM患者的年龄、性别和肿瘤发生的部位无明显相关,而与其Clark分级和淋巴结转移状态明显相关(P<0.01);③MM与正常人皮肤相比,其细胞凋亡指数与增殖细胞核抗原的比值显著降低(P<0.001);④FHIT蛋白表达与MM细胞活跃增殖和凋亡受抑之间存在一定相关性(P<0.01)。结论FHIT基因可能参与了MM肿瘤细胞的增殖、凋亡的调节,其表达下降可能与MM的发生、发展过程有关。 展开更多
关键词 肿瘤细胞增殖 恶性黑素瘤 FHIT基因蛋白 脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 增殖细胞核抗原 FHIT蛋白 细胞凋亡指数 脆性组氨酸三联体 免疫组化SP法 蛋白表达水平 人皮肤 肿瘤发生 转移状态 MM 表达及 原发性
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肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对卵巢癌裸鼠移植瘤SKOV3细胞的促凋亡研究
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作者 李春梅 彭芝兰 +2 位作者 杨开选 刘英 黄琴 《华西医学》 CAS 2011年第4期481-484,共4页
目的研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)蛋白对SKOV3移植瘤细胞半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响及其与肿瘤细胞凋亡的关系。方法建立雌性裸小鼠SKOV3移植瘤24只,随机分为4组,每组6只。TRAIL组单用重组人TRAIL蛋白(10μ... 目的研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)蛋白对SKOV3移植瘤细胞半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响及其与肿瘤细胞凋亡的关系。方法建立雌性裸小鼠SKOV3移植瘤24只,随机分为4组,每组6只。TRAIL组单用重组人TRAIL蛋白(10μg/kg),顺铂(DDP)组单用DDP(3 mg/kg),TRAIL+DDP组联合使用TRAIL蛋白(10μg/kg)和DDP(3 mg/kg),空白对照组给予0.5 mL生理盐水。经处理后,各组的组织切片用免疫组织化学染色检测Caspase-3的表达和末端脱氧核苷酸转移酶介导核苷酸缺口标记技术(TUNEL)检测肿瘤细胞凋亡指数。结果 Caspase-3的表达水平在TRAIL组(171.67±14.38)、DDP组(172.50±14.75)、联合组(230.00±40.99)中均明显高于对照组(135.83±16.25)(P<0.05)。SKOV3移植瘤细胞凋亡指数在空白对照组、TRAIL组、DDP组和联合组分别为16.67±5.43、33.17±8.42、24.33±4.59和40.50±6.16,TRAIL组和联合组细胞凋亡指数较空白对照组和DDP组明显增高(P<0.05)。结论 TRAIL蛋白使卵巢癌移植瘤细胞的Caspase-3表达增强,TRAIL蛋白促进肿瘤细胞凋亡发生。 展开更多
关键词 卵巢癌 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 末端脱氧核苷酸转移酶介导核苷酸缺口标记技术 半胱天冬氨酸蛋白酶-3 凋亡 小鼠
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细胞凋亡基因及相关蛋白在早期自然流产胎盘绒毛和蜕膜组织中的表达 被引量:6
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作者 何淑英 宋文芳 +3 位作者 张泳 夏国园 任灿晴 刘学红 《中国优生与遗传杂志》 2009年第6期20-22,F0002,共4页
目的探讨自然流产和正常人流患者胎盘绒毛和蜕膜组织细胞增殖与凋亡的变化规律,及相关细胞因子在胎盘组织生长发育中的表达意义。方法应用免疫组织化学、末端脱氧核糖核酸转移酶介导的缺口末端标记法(terminal de-oxynucleotidy transfe... 目的探讨自然流产和正常人流患者胎盘绒毛和蜕膜组织细胞增殖与凋亡的变化规律,及相关细胞因子在胎盘组织生长发育中的表达意义。方法应用免疫组织化学、末端脱氧核糖核酸转移酶介导的缺口末端标记法(terminal de-oxynucleotidy transferase mediated dUTP-biotin nick end labing,TUNEL)检测第40-90天自然流产和正常人流患者胎盘组织中细胞凋亡的表达状况。结果第40-90天的正常人流患者的绒毛和蜕膜组织细胞的增殖占主导地位,大部分细胞增殖活跃,细胞的增殖与凋亡始终处于一种动态平衡;而自然流产患者的绒毛和蜕膜组织中,凋亡细胞的比例明显增大,细胞增殖与凋亡的动态平衡被打破。结论妊娠妇女胎盘组织内细胞凋亡比例增高,细胞增殖与凋亡的动态平衡被打破是自然流产发生的基础。 展开更多
关键词 绒毛 蜕膜 自然流产 细胞凋亡 末端脱氧核糖核酸转移酶介导的缺口末端标记法
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