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制备两种p53重组腺病毒和流式细胞仪定量外源绿荧光蛋白表达
1
作者
汪惠
赖百塘
+4 位作者
李伟英
杨学惠
张春燕
韦攀健
李金照
《中国肺癌杂志》
CAS
2010年第5期470-476,共7页
背景与目的p53作为转录因子,在细胞应激时呈活化型,可调控细胞周期和程序性死亡抑制肿瘤生长,通常通过各种机制可使p53呈现非活化状态,其中包括p53C-末端负调控序列的作用。本研究旨在制备携带全长和缺失这些负调控序列p53的两种重组腺...
背景与目的p53作为转录因子,在细胞应激时呈活化型,可调控细胞周期和程序性死亡抑制肿瘤生长,通常通过各种机制可使p53呈现非活化状态,其中包括p53C-末端负调控序列的作用。本研究旨在制备携带全长和缺失这些负调控序列p53的两种重组腺病毒,并采用流式细胞仪散点图(flow cytometry scatter plot,FCM)检测人肺癌细胞外源绿荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)表达。方法利用pAdEasy-Track载体系统,构建两种p53重组质粒并在细菌中产生重组体,转染L293细胞产生三种重组腺病毒,测序证明。三种不同浓度病毒分别感染人肺癌801D细胞,FCM scatter plot检测其GFP表达。结果测序证明重组腺病毒:Ad-p53(del)缺失p53C-末端终止密码子前111个碱基和非编码区,Ad-p53(wtp)无p53碱基缺失。Ad-(empty carrier)无p53。FCM scatter plot显示三种病毒感染801D细胞表达GFP百分率接近并随病毒浓度递增。801D包含了不同荧光强度比率的细胞。结论构建和制备了去C-末端p53和全长p53的两种重组腺病毒:Ad-p53(del)、Ad-p53(wtp)及空载体Ad-(empty carrier)。流式细胞仪散点图证明该病毒试验系统可靠,可定量外源GFP表达为病毒感染细胞选择浓度提供准确方法。
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关键词
野生型
p
53
缺失c-末端p53
3’端非编码区
重组腺病毒
流式细胞仪散点图
绿荧光蛋白表达
下载PDF
职称材料
制备两种P53重组腺病毒和流式细胞仪定量外源绿荧光蛋白表达
2
作者
汪惠
赖百塘
+4 位作者
李伟英
杨学惠
张春燕
韦攀健
李金照
《结核病与胸部肿瘤》
2010年第2期77-83,共7页
目的P53作为转录因子在细胞应激时呈活化型,调控细胞周期和程序性死亡抑制肿瘤生长,通常,通过各种机制P53呈非活化状态,其中包括P53C-末端负调控序列的作用。该研究目的是制备携带垒长和缺失这些负调控序列P53两种重组腺病毒和用流...
目的P53作为转录因子在细胞应激时呈活化型,调控细胞周期和程序性死亡抑制肿瘤生长,通常,通过各种机制P53呈非活化状态,其中包括P53C-末端负调控序列的作用。该研究目的是制备携带垒长和缺失这些负调控序列P53两种重组腺病毒和用流式细胞仪散点图(Flow cytometry scatter plot,FCM)检测人肺癌细胞外源绿荧光蛋白(Green fluorescence protein,GFP)表达。材料和方法利用pAdEasy-Track载体系统,构建两种P53重组质粒并在细菌中产生重组体,转染L293细胞产生三种重组腺病毒。三种不同浓度病毒分别感染人肺癌801D细胞,FCM分析GFP表达。结果测序证明重组腺病毒:Ad—P53(del)缺失p53C-末端终止密码子前111个碱基和非编码区,Ad—P53(wtp)没有P53碱基缺失。Ad(empty carrier)无P53。FCM scatter plot显示三种病毒感染801D细胞表达GFP百分率接近并随病毒浓度递增。801D包含了不同荧光强度比率的细胞。结论构建和制备了去C-末端P53和全长p53两种重组腺病毒,Ad—p53(del),Ad-p53(wtp)及空载体Ad-(empty)。流式细胞仪散点图证明该病毒试验系统可靠,可定量外源GFP表达,为病毒感染细胞选择浓度提供准确方法。
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关键词
野生型
p
53
缺失c-末端p53
3’端非编码区
重组腺病毒
流氏细胞仪散点图
绿荧光蛋白表达
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职称材料
题名
制备两种p53重组腺病毒和流式细胞仪定量外源绿荧光蛋白表达
1
作者
汪惠
赖百塘
李伟英
杨学惠
张春燕
韦攀健
李金照
机构
北京市结核病胸部肿瘤研究所
中国科学院生物物理所
出处
《中国肺癌杂志》
CAS
2010年第5期470-476,共7页
基金
北京市科委(No.954830600)资助~~
文摘
背景与目的p53作为转录因子,在细胞应激时呈活化型,可调控细胞周期和程序性死亡抑制肿瘤生长,通常通过各种机制可使p53呈现非活化状态,其中包括p53C-末端负调控序列的作用。本研究旨在制备携带全长和缺失这些负调控序列p53的两种重组腺病毒,并采用流式细胞仪散点图(flow cytometry scatter plot,FCM)检测人肺癌细胞外源绿荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)表达。方法利用pAdEasy-Track载体系统,构建两种p53重组质粒并在细菌中产生重组体,转染L293细胞产生三种重组腺病毒,测序证明。三种不同浓度病毒分别感染人肺癌801D细胞,FCM scatter plot检测其GFP表达。结果测序证明重组腺病毒:Ad-p53(del)缺失p53C-末端终止密码子前111个碱基和非编码区,Ad-p53(wtp)无p53碱基缺失。Ad-(empty carrier)无p53。FCM scatter plot显示三种病毒感染801D细胞表达GFP百分率接近并随病毒浓度递增。801D包含了不同荧光强度比率的细胞。结论构建和制备了去C-末端p53和全长p53的两种重组腺病毒:Ad-p53(del)、Ad-p53(wtp)及空载体Ad-(empty carrier)。流式细胞仪散点图证明该病毒试验系统可靠,可定量外源GFP表达为病毒感染细胞选择浓度提供准确方法。
关键词
野生型
p
53
缺失c-末端p53
3’端非编码区
重组腺病毒
流式细胞仪散点图
绿荧光蛋白表达
Keywords
Wild ty
p
e
p
53
Deletion
c-
terminal
p
53
3’Untranslation region
Recombinant deficient adenoviruses
Flow cytometry scatter
p
lot
Ex
p
ression of green fluorescence
p
rotein
分类号
R73-3 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
制备两种P53重组腺病毒和流式细胞仪定量外源绿荧光蛋白表达
2
作者
汪惠
赖百塘
李伟英
杨学惠
张春燕
韦攀健
李金照
机构
北京市结核病胸部肿瘤研究所
中国科学院生物物理所
出处
《结核病与胸部肿瘤》
2010年第2期77-83,共7页
基金
本研究为北京市科委经费资助北京市肿瘤重点实验室肺癌分实的科研项目(1999.4-2005.10),编号:954830600.
文摘
目的P53作为转录因子在细胞应激时呈活化型,调控细胞周期和程序性死亡抑制肿瘤生长,通常,通过各种机制P53呈非活化状态,其中包括P53C-末端负调控序列的作用。该研究目的是制备携带垒长和缺失这些负调控序列P53两种重组腺病毒和用流式细胞仪散点图(Flow cytometry scatter plot,FCM)检测人肺癌细胞外源绿荧光蛋白(Green fluorescence protein,GFP)表达。材料和方法利用pAdEasy-Track载体系统,构建两种P53重组质粒并在细菌中产生重组体,转染L293细胞产生三种重组腺病毒。三种不同浓度病毒分别感染人肺癌801D细胞,FCM分析GFP表达。结果测序证明重组腺病毒:Ad—P53(del)缺失p53C-末端终止密码子前111个碱基和非编码区,Ad—P53(wtp)没有P53碱基缺失。Ad(empty carrier)无P53。FCM scatter plot显示三种病毒感染801D细胞表达GFP百分率接近并随病毒浓度递增。801D包含了不同荧光强度比率的细胞。结论构建和制备了去C-末端P53和全长p53两种重组腺病毒,Ad—p53(del),Ad-p53(wtp)及空载体Ad-(empty)。流式细胞仪散点图证明该病毒试验系统可靠,可定量外源GFP表达,为病毒感染细胞选择浓度提供准确方法。
关键词
野生型
p
53
缺失c-末端p53
3’端非编码区
重组腺病毒
流氏细胞仪散点图
绿荧光蛋白表达
Keywords
Wild ty
p
e
p
53
Deletion
c-
terminal
p
53
3'Untranslation region Recombinant deficient adenoviruses Flow cytometry scatter
p
lot Ex
p
ression of green fluorescence
p
rotein
分类号
R737.14 [医药卫生—肿瘤]
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1
制备两种p53重组腺病毒和流式细胞仪定量外源绿荧光蛋白表达
汪惠
赖百塘
李伟英
杨学惠
张春燕
韦攀健
李金照
《中国肺癌杂志》
CAS
2010
0
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职称材料
2
制备两种P53重组腺病毒和流式细胞仪定量外源绿荧光蛋白表达
汪惠
赖百塘
李伟英
杨学惠
张春燕
韦攀健
李金照
《结核病与胸部肿瘤》
2010
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