丙泊酚抑制缺氧/复氧HUVECs细胞中miR-15b表达及细胞凋亡的实验研究

目的:研究丙泊酚在缺氧/复氧细胞模型中对微小RNA-15b(miR-15b)及血管内皮细胞凋亡的影响。方法:建立缺氧/复氧细胞模型[人脐静脉内皮细胞(HUVECs)],设置实验组、对照组、空白组,其中实验组HUVECs缺氧/复氧培养24h后,加入丙泊酚(150μmol/L)干预培养6h;实时定量PCR(RT-qPCR)检测各组HUVECs中miR-15b的表达情况;RT-qPCR、Western-blot检测各组HUVECs中miR-15b靶基因B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)的表达情况;流式细胞术检测各组细胞凋亡能力。结果:RT-qPCR结果显示,实验组miR-15b的表达水平低于对照组(P<0.05);RT-qPCR及Western-blot结果显示,实验组bcl-2在mRNA和蛋白水平的表达均高于对照组(P<0.05);实验组HUVECs的细胞凋亡率低于对照组(P<0.05)。结论:丙泊酚能够抑制缺氧/复氧HUVECs细胞中miR-15b的表达,并影响其靶基因抗凋亡蛋白bcl-2的表达,从而降低细胞凋亡率。

双龙方对心肌缺氧复氧损伤的保护作用及活性成分筛选研究

目的研究中药双龙方及其组分人参总皂苷、丹参总酚酸对缺氧复氧心肌损伤的保护作用,并测定其活性成分。方法建立体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,采用MTT法检测给药各组细胞的存活率;同时采用HPLC-MS联用对双龙方进入细胞的成分进行鉴定。结果模型组细胞存活率明显降低,仅为8.26%,双龙方有效增加细胞存活率,为70.41%,且在各实验组中效果最好;液质鉴定其活性成分主要是:Re、Rg1、Rf、Rb1和Rd。结论双龙方对缺氧复氧引发的心肌细胞损伤有显著的保护作用,其机制可能与清除自由基、抑制心肌细胞钙离子超载有关。