缺氧与复氧对脑动脉内皮细胞一氧化氮合酶Ⅲ表达的影响

目的 :用原代培养的脑动脉内皮细胞 (CAEC)进行缺氧、复氧 ,观察一氧化氮合酶 (NOS )基因表达的变化 ,探讨缺氧、复氧影响 NO生成的分子机制。方法 :将原代培养的 CAEC进行缺氧 1h,复氧 2、6、12和2 4h,用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)和免疫细胞化学方法检测 NOS m RNA和蛋白质表达的变化。结果 :1CAEC缺氧 1h,NOS m RNA和蛋白质表达明显高于正常对照组 ;2缺氧 1h后复氧 2、6和 12 h,NOS m RNA和蛋白质表达下调 ,其中复氧 6h,其表达降至最低 ,2 4h后表达恢复至正常。结论 :缺氧引起脑动脉内皮细胞 NOS 基因表达上调 。

缺氧与复氧对星形胶质细胞水通道蛋白-9表达的影响

目的探讨体外培养星形胶质细胞缺氧及复氧后水通道蛋白-9(AQP9)表达的变化特点及其所起的作用。方法取生后2d的Wistar大鼠大脑皮层进行星形胶质细胞纯培养,缺氧时间分别为:12、24、48h,并取缺氧24h后复氧12、24、48h的细胞进行存活率、乳酸脱氢酶活性的测定,采用免疫细胞化学方法检测细胞AQP9的表达。结果缺氧组及复氧组的星形胶质细胞死亡数与对照组相比无明显变化,缺氧和复氧后乳酸脱氢酶活性亦无明显改变(P(0.05),缺氧组细胞AQP9表达较对照组增高,并随缺氧时间延长而明显增高(P<0.05),复氧后24h内AQP9表达逐渐下降,24h后AQP9表达仍未恢复正常水平。结论星形胶质细胞对缺氧较为耐受,缺氧对星形胶质细胞存活能力无明显影响,缺氧引起AQP9的表达上调,而复氧使其表达明显下降。