布托啡诺调节缺氧诱导因子-1α/血管内皮生长因子信号通路对宫颈癌细胞增殖、迁移和血管生成的影响

目的探讨布托啡诺(Butorphanol)对宫颈癌细胞增殖、迁移和血管生成的影响及作用机制。方法使用0.5~80.0μg/mL的布托啡诺分别处理HeLa细胞24 h,细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测细胞增殖,计算IC50值。将HeLa细胞分为对照组(Control组)、阴性对照组(NC组)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)过表达组(HIF-1α组)、布托啡诺组(Butorphanol组)、Butorphanol+HIF-1α组,平板克隆形成实验、细胞划痕实验、Transwell小室实验、小管形成实验分别检测HeLa细胞增殖、迁移、侵袭与血管生成,Western blot法检测HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达,裸鼠移植瘤实验检验布托啡诺对宫颈癌移植瘤生长的影响。结果过表达HIF-1α可显著促进HeLa细胞增殖、迁移、侵袭及血管生成拟态形成,并上调HIF-1α、VEGF蛋白表达(P<0.05);布托啡诺可有效抑制HeLa细胞增殖、迁移、侵袭、血管生成拟态形成及宫颈癌移植瘤生长,并下调HIF-1α、VEGF蛋白表达(P<0.05);布托啡诺对宫颈癌细胞的抑制作用可被HIF-1α的过表达减弱。结论布托啡诺通过抑制HIF-1α/VEGF信号通路抑制宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭及血管生成,抑制宫颈癌的生长。

缺氧诱导因子1-血管内皮生长因子-Notch信号通路参与马蹄内翻足畸形的发生机制

目的研究马蹄内翻足畸形发生的分子机制。方法采用HE染色观察两组胎鼠足踝部组织结构差异,免疫组化染色、qRT-PCR和Western blot技术检测模型组和对照组大鼠足踝部组织缺氧诱导因子1(hypoxia inducible factor 1,HIF-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及Notch-1表达情况。结果光镜下观察,与对照组相比,实验组足踝部组织结构相对紊乱,组织间隙增大,软组织松散,局部软组织聚集挛缩。免疫组化染色、qRT-PCR和Western blot结果显示,实验组足踝部组织HIF-1表达水平下调,Vegf、Notch-1的表达减少。结论HIF-VEGF-Notch信号通路可能与马蹄内翻足畸形的发生相关。

活血化瘀汤对骨折早期缺氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子影响的实验研究

目的:探讨活血化瘀汤对骨折早期缺氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及骨折早期缺氧反应的机制。方法:选用雄性SD大鼠72只,造成左胫骨中段闭合折骨标准的骨折模型,术后采用髓内针固定。随机分成活血化瘀汤组(麻醉苏醒灌服活血化瘀汤,n=36)和生理盐水组(麻醉苏醒灌服等量生理盐水,n=36),分别于灌胃后1、2、3、5、7、14d处死大鼠,取包括骨折端在内骨折上下各0.5cm的骨质。应用TRPCR技术,动态观察HIF-1αmRNA及VEGF表达的变化。结果:在骨折后2d,骨折端HIF-1αmRNA表达达到高峰;活血化瘀汤组用药后1d及2d,骨折端HIF-1αmRNA表达比生理盐水组显著性降低(P<0.01);用药后3、5、7、14dVEGF的表达活血化瘀汤组比生理盐水组显著性升高(P<0.01);正常对照组对应组织则不能检测到两者的表达。结论:左胫骨中段闭合骨折引起HIF-1αmRNA及VEGF基因转录和表达发生改变。活血化瘀汤能调控HIF-1α和VEGF的表达。

缺氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子在海水及淡水淹溺型急性肺损伤中的表达

目的观察缺氧诱导因子-1α（HIF—1α）及血管内皮生长因子（VEGF）在海水及淡水淹溺型急性肺损伤中的表达，探讨其在淹溺型肺损伤中的作用机制。方法将18只健康成年新西兰兔按随机数字法分为对照组、海水组和淡水组（每组6只）。海水组及淡水组分别经气管内注射3mL／kg配方海水和18mL／kg淡水。检测动脉血气、肺湿／干质量（W／O）比值及肺通透指数（LPI），支气管肺泡灌洗液TNF—α、IL—1β及IL-6水平，肺组织HIF—1α和VEGFmRNA和蛋白表达水平，肺组织光镜及病理损伤评分。结果海水组及淡水组氧合指数（PaO2/FiO2）均明显低于对照组。与对照组比较，海水组及淡水组肺W／D比值及LPI增加，支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β及IL-6水平舜高，肺组织中HIF-1α和VEGF mRNA和蛋白表达水平增强，肺损伤加重，Smith评分增加。海水组与淡水组比较，IL-6水平上升，HIF—1α及VEGF表达增高，肺损伤加重。结论在海水及淡水淹溺型急性肺损伤中，HIF—1α及VEGF均高表达，提示此通路可能参与淹溺后肺损伤过程。但由于致伤机制不同，该通路在这两种肺损伤中作用可能不同。

低氧训练对大鼠骨骼肌缺氧诱导因子-1α蛋白和血管内皮生长因子mRNA表达的影响

目的:探讨低氧训练对大鼠骨骼肌缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白和血管内皮生长因子(VEGF)基因表达的影响。方法:选用健康雄性SD大鼠72只,随机分为9组。采用递增负荷跑台训练及低氧、超低氧两种不同程度的递增低氧刺激,在运动中和运动后给予低氧处理。应用免疫组织化学、原位杂交、计算机显微图像分析等方法,检测HIF-1α、VEGFmRNA在骨骼肌组织中的定位及含量。采用相关分析方法,分析低氧训练骨骼肌HIF-1α蛋白表达对骨骼肌VEGF转录的促进作用。结果与结论:低氧和运动训练可增加骨骼肌组织HIF-1α蛋白和VEGFmRNA含量,低氧训练骨骼肌组织HIF-1α蛋白表达的增加对VEGF基因转录具有促进作用。

缺氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子与胃癌血管生成及转移生物学行为的关系

目的 :探讨胃癌中缺氧诱导因子 1α(HIF -1α)的表达及其与血管内皮生长因子 (VEGF)、微血管密度 (MVD)的相关性 ,分析与胃癌的转移等生物学行为的关系。方法 :用免疫组化二步法检测HIF-1α、VEGF的表达 ;用CD34标记血管内皮细胞并计数MVD。结果 :胃癌组织HIF-1α及VEGF与正常胃黏膜组织比有统计学意义 (P <0 . 0 5 ) ;HIF- 1α及VEGF表达有一致性 ,呈正相关 ;HIF- 1α或VEGF阳性肿瘤组织的MVD值显著高于阴性组织 ;胃癌转移者与无转移者HIF 1α及VEGF比有统计学意义 (P <0 . 0 5 )。结论 :HIF-

血管内皮生长因子缺氧诱导因子-1α与生存素蛋白在胃癌组织中的表达及其相关性研究

本研究通过测定不同临床分期及病理类型的胃癌组织中血管内皮生长因子（VEGF）、缺氧诱导因子（HIF）-1α和生存素蛋白的表达情况及其相关性,探讨VEGF、HIF-1α和生存素蛋白与胃癌发生及分化和转移的关系,为探索胃癌的发病机制及临床胃癌的防治提供新的思路和实验依据。

小檗碱调节HIF-1α/VEGF信号通路对皮肤溃疡大鼠血管生成和创面愈合的影响

目的:探究小檗碱(BR)调节缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路对皮肤溃疡大鼠血管生成和创面愈合的影响。方法:取SD大鼠采用创面局部多次涂抹冰醋酸建立皮肤溃疡模型,随机数字法分组,包括模型组(M组)、小檗碱低剂量组(BR-L组)、小檗碱高剂量组(BR-H组)、小檗碱高剂量+空载组(BR-H+pc-DNA组)、小檗碱高剂量+HIF-1α敲低组(BR-H+pc-HIF-1αKD组),每组10只,另选10只SD大鼠作为对照组(C组)。以药物分组处理3周后,测定各组大鼠创面愈合率;HE染色检测各组大鼠皮肤溃疡创面组织病理形态;免疫组织化学染色检测各组大鼠皮肤溃疡创面组织微血管密度(MVD)及胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)与纤维结合蛋白(FN)表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)各组大鼠血清及皮肤溃疡创面组织炎性因子IL-6、IL-8表达水平;免疫印迹法检测各组大鼠皮肤溃疡创面组织HIF-1α/VEGF通路蛋白表达水平。结果:与C组相比,M组大鼠创面组织MVD、血清及创面组织IL-6、IL-8水平升高(均P<0.05)。与M组相比,BR-L组、BR-H组、BR-H+pc-DNA组大鼠创面愈合率、创面组织MVD、HIF-1α及VEGF蛋白表达均升高(均P<0.05),血清及创面组织IL-6、IL-8水平均降低(均P<0.05),且高剂量小檗碱作用更强。敲低HIF-1α可减弱BR对模型组大鼠各指标的作用。结论:小檗碱可通过上调HIF-1α/VEGF通路而降低炎性因子表达,抑制炎症,增强皮肤溃疡大鼠血管生成和胶原形成,促进其创面愈合。

纳布啡调节HIF-1α/VEGF信号通路对结直肠癌细胞活性和血管生成的影响

目的:探讨纳布啡(Nal)调节缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路对结直肠癌(CRC)细胞活性和血管生成的影响。方法:使用25~800μmol/L的Nal处理CRC细胞SW480,筛选最佳药物浓度;将SW480细胞分为对照组(Control组)、低浓度纳布啡组(Nal-L组,50μmol/L)、中浓度纳布啡组(Nal-M组,100μmol/L)、高浓度纳布啡组(Nal-H组,200μmol/L)、高浓度纳布啡(200μmol/L)+HIF-1α/VEGF信号通路激活剂组(Nal-H+DMOG组,200μmol/L的Nal+2mmol/LDM OG)。细胞平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡能力;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell法检测细胞侵袭能力;Western blot检测细胞的血管形成能力以及HIF-1α/VEGF信号通路蛋白表达情况。结果:Nal可以抑制SW480细胞增殖,呈浓度依赖性;与Control组比较,Nal-L组、Nal-M组、Nal-H组的克隆形成数目、侵袭细胞数、划痕愈合率、血管结构形成数及VEGF蛋白表达、HIF-1α蛋白表达下降,凋亡率增加(P<0.05);与Nal-H组比较,Nal-H+DM OG组克隆形成数目、划痕愈合率、侵袭细胞数、血管结构形成数、HIF-1α蛋白表达、VEGF蛋白表达显著升高(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。结论:Nal对CRC细胞增殖、迁移和侵袭以及血管结构形成的抑制作用,可能是通过抑制HIF-1α/VEGF信号通路发挥作用。

基于HIF-1α-VEGF-EPO信号通路探究电针干预大脑中动脉栓塞大鼠脑血管新生的机制

目的基于低氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)-1α-血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)-促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)通路探究电针“百会”“水沟”“足三里”“曲池”治疗脑缺血的作用机制。方法将108只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组。采用线栓法复制右侧大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠模型。电针组于模型复制后4 h电针“百会”“水沟”和左侧“后三里”(“足三里”)、“曲池”,疏密波,频率5~100 Hz,每次20 min,每日1次,治疗14 d。假手术组、模型组同等抓取固定,不进行治疗。采用改良神经功能缺损体征评分(modified neurological severity scores,mNSS)评价大鼠神经功能损害情况,多普勒超声检测缺血半暗带区局部脑血流量(regional cerebral blood flow,rCBF)变化,HE染色观察脑缺血半暗带病理学改变,免疫组织化学法检测缺血半暗带区皮质CD34阳性细胞数,Western blot法和RT-PCR法分别检测缺血半暗带区皮质HIF-1α、VEGF、EPO蛋白及其mRNA表达水平。结果与同时点假手术组比较,模型组大鼠mNSS、CD34阳性细胞数、HIF-1α、VEGF、EPO蛋白和mRNA表达水平均显著增加(P<0.05),rCBF显著减少(P<0.05),HE染色可见大量神经元坏死;与同时点模型组比较,电针组大鼠mNSS评分显著减少(P<0.05),rCBF、CD34阳性细胞数及HIF-1α、VEGF、EPO蛋白和mRNA表达水平均显著增加(P<0.05),脑缺血半暗带区病理学改变均有所好转。结论电针“百会”“水沟”“足三里”“曲池”能激活HIF-1α-VEGF-EPO通路蛋白和基因表达,增加CD34阳性细胞数量,介导内皮细胞血管新生,从而提高MCAO大鼠rCBF,改善脑组织结构和功能,且治疗效果具有时间累积效应。

纳布啡调节缺氧诱导因子-1α/血管内皮生长因子信号通路对胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探究纳布啡(NAL)对胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响,以及对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路的调控机制。方法培养人胶质瘤细胞U251并将其随机分为U251组、NAL低浓度(NAL-L)组、NAL中浓度(NAL-M)组、NAL高浓度(NAL-H)组和NAL-H+HIF-1α激活剂(NAL-H+DMOG)组。采用CCK-8法检测各组U251细胞存活率;采用克隆平板实验检测各组U251细胞的克隆形成能力;采用Transwell实验检测各组U251细胞的迁移及侵袭细胞数;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞中HIF-1α/VEGF信号通路以及上皮-间充质转化相关蛋白上皮E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)的相对表达水平。采用GraphPad Prism 9.0软件岁数据进行统计、分析,采用单因素方差分析多组间指标差异,采用Tukey’s事后检验进行两两组间的多重比较分析。结果与U251组比较,NAL-L组、NAL-M组及NAL-H组细胞存活率[(62.33±4.51)%、(41.06±3.37)%、(31.32±2.09)%]、克隆形成数量[(162.38±4.97)、(146.03±3.66)、(127.59±2.96)]、迁移及侵袭细胞数[(106.33±2.57,69.60±2.44)、(92.37±2.09,54.70±2.03)、(80.91±1.76,41.66±1.62)]以及细胞中HIF-1α(0.78±0.07、0.61±0.05、0.48±0.04)、VEGF(0.72±0.06、0.60±0.05、0.43±0.03)、Vimentin(0.80±0.07、0.68±0.05、0.47±0.03)、N-cadherin(0.71±0.06、0.56±0.04、0.40±0.03)的相对表达水平均低于U251组(P<0.05),而E-cadherin表达水平(1.21±0.09、1.47±0.13、1.67±0.17)高于U251组(P<0.05)。在高浓度NAL处理U251细胞的基础上加入HIF-1α激活剂DMOG则逆转了以上指标的变化趋势(P<0.05)。结论NAL能够通过抑制HIF-1α/VEGF信号通路来抑制胶质瘤细胞的增殖、迁移及侵袭过程。

低剂量参麦方调控HIF-1/VEGF信号通路对心力衰竭大鼠的改善作用

[目的]探究参麦方对心力衰竭(HF)大鼠血管生成的改善作用以及对缺氧诱导因子-1(HIF-1)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路的影响。[方法]选取55只SPF级雄性SD大鼠,采用腹腔注射盐酸多柔比星构建HF模型,随机分为正常组、模型组、参麦高剂量组和参麦低剂量组。其中正常组10只,其余各组均15只,实验时间为8周。实验结束后,检测心功能指标及苏木精-伊红(HE)染色、马松(Masson)病理染色、免疫组织化学CD31染色;酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测血清中N端前脑钠肽(NT-proBNP)、内皮素-1(ET-1)含量;硝酸还原酶法检测血清中一氧化氮(NO)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子A(VEGFA)mRNA水平;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测HIF-1α和VEGFA蛋白表达量。[结果]各组大鼠心功能指标、NT-proBNP、ET-1、NO、HE染色及CD31染色结果提示给药组较模型组改善明显,且低剂量组整体改善较为显著。RT-qPCR结果显示,给药组IL-6、IL-1β、TNF-α、VCAM-1表达水平较模型组下降(P<0.05或P<0.01),HIF-1α、VEGFA表达水平上升(P<0.05)。Western Blot结果提示给药组HIF-1α、VEGFA蛋白表达情况较模型组改善(P<0.05),且低剂量组较模型组上调明显(P<0.05)。[结论]参麦方可能通过调控HIF-1/VEGF信号通路,降低炎症反应,促进血管新生,改善HF大鼠心功能。

白术内酯I调节HIF-1α/VEGF信号通路对急性心肌梗死大鼠心肌损伤的影响

目的:探讨白术内酯I(Atr-I)调节缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌损伤的影响。方法:大鼠分为对照组、AMI组、Atr-I组、阿司匹林组、BAY87-2243组、Atr-I+BAY87-2243组,每组18只。除对照组外,其他组大鼠均采用结扎冠脉左前降支根部的方式构建AMI模型,建模1h后,开始处理,给药1次/d,持续7d。超声心动图监测左室短轴缩短率(FS)、左室射血分数(LVEF)的变化;2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测大鼠心肌梗死面积百分数;HE染色检测左心室心肌组织病理学变化;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;ELISA检测大鼠左心室心肌组织中肌红蛋白(Mb)、乳酸脱氢酶(LDH)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β含量;Western blot检测大鼠心肌组织匀浆中HIF-1α、VEGF蛋白表达。结果:与对照组相比,AMI组大鼠心肌损伤明显,FS、LVEF及HIF-1α、VEGF蛋白表达降低,心肌梗死面积百分数、Mb、LDH、TNF-α、IL-1β含量升高(P<0.05);与AMI组相比,Atr-I组、阿司匹林组大鼠心肌损伤有所改善,FS、LVEF及HIF-1α、VEGF蛋白表达升高,心肌梗死面积百分数、Mb、LDH、TNF-α、IL-1β含量降低,BAY87-2243组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.05);与Atr-I组相比,Atr-I+BAY87-2243组大鼠心肌损伤加剧,FS、LVEF及HIF-1α、VEGF蛋白表达降低,心肌梗死面积百分数、Mb、LDH、TNF-α、IL-1β含量升高(P<0.05)。结论:Atr-I减轻AMI大鼠心肌损伤可能与激活HIF-1α/VEGF信号通路有关。

缺氧诱导因子-1α、VEGF在进展期胃癌中的表达及意义

目的揭示进展期胃癌中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达规律,分析其与胃癌临床病理特征的关系,以探讨HIF-1α蛋白在胃癌血管形成中的作用。方法应用免疫组化方法检测50例胃癌组织HIF-1α、VEGF蛋白及微血管密度(MVD)的表达。结果胃癌组织HIF-1α蛋白与VEGF阳性表达率分别为68%(34/50)和62%(31/50),MVD平均计数为23.14±11.58;HIF-1α表达与淋巴结转移有关(P<0.05);VEGF、MVD表达与肿瘤浸润深度(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.05)和PTNM临床分期(P<0.05)密切相关;HIF-1α与VEGF表达密切相关(χ2=4.96,P<0.05);HIF-1α或VEGF表达阳性的MVD值显著高于阴性组(P<0.05)。结论HIF-1α、VEGF是反映胃癌浸润转移等生物学行为的重要指标,HIF-1α诱导VEGF表达从而促进肿瘤血管生成可能参与胃癌的进展。

HIF-1α/HO-1/VEGF-A信号通路在自体动静脉内瘘成熟不良中的调控机制

目的 观察慢性肾脏病5期、行自体动静脉内瘘(AVF)患者在内瘘不同成熟结局条件下低氧诱导因子-1α/血红素加氧酶-1/血管内皮生长因子A(HIF-1α/HO-1/VEGF-A)信号通路的表达水平差异,探讨HIF-1α/HO-1/VEGF-A信号通路在AVF成熟过程中的调控机制。方法 选取慢性肾脏病5期、拟行AVF手术的45例患者作为研究对象,在内瘘手术过程中采集血管标本,依据术后8周内瘘成熟结局分为AVF成熟组(n=35)和AVF成熟不良组(n=10)。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HIF-1α/HO-1/VEGF-A信号通路HIF-1α、HO-1、VEGF-A的基因表达水平;采用蛋白免疫印迹法检测HIF-1α、HO-1、VEGF-A的蛋白表达水平;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测下游炎症因子如白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-8(IL-8)、转化生长因子-β(TGF-β)表达水平。结果 AVF成熟组HIF-1α mRNA、HO-1 mRNA、VEGF-A mRNA表达水平高于AVF成熟不良组,差异有统计学意义(P<0.01);AVF成熟组HIF-1α、HO-1、VEGF-A蛋白表达水平高于AVF成熟不良组,差异有统计学意义(P<0.01);AVF成熟组IL-1β、IL-8、TGF-β表达水平低于AVF成熟不良组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 HIF-1α/HO-1/VEGF-A信号通路表达水平的上调有利于内瘘的早期成熟。HIF-1α/HO-1/VEGF-A信号通路表达水平的测定对AVF的早期成熟结局有一定的预测意义。

缺氧诱导因子-1在大鼠缺血性脑损伤中的双重作用

缺氧诱导因子-1(HIF-1)是低氧生理及病理过程中起作用的重要转录调控因子,由HIF-1α和HIF-1β两个亚单位组成。HIF-1调控的基因在能量代谢、红细胞生成、血管生成、血管扩张,细胞存活与凋亡中起一定作用。在大鼠缺血性脑损伤中,由于缺血时间和程度的不同,HIF-1对神经细胞具有保护和诱导凋亡的双重作用。它可以通过诱导靶基因如血管内皮细胞生长因子(VEGF)、促红细胞生成素(EPO)、葡萄糖转移蛋白-1(GLU-1)及葡萄糖合成酶的生成对缺血后脑细胞产生保护作用。然而,在严重缺氧条件下,HIF可以通过与肿瘤抑制蛋白p53结合、诱导bcl-2家族中的凋亡前基因BNIP3和NIX的表达以及促进诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的生成而诱导细胞凋亡。特异性激活促进存活的基因或者抑制HIF-1的表达都可能成为临床治疗的策略。

米诺环素调节HIF-1α/VEGF信号通路对前列腺癌细胞增殖、凋亡和血管生成的影响

目的探究米诺环素(Mino)通过调节缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路对前列腺癌(PCa)细胞增殖、凋亡和血管生成的影响。方法将PC-3细胞分为PC-3组(未做任何处理的PC-3细胞)、L-Mino组(5μM Mino)、M-Mino组(10μM Mino)、H-Mino组(20μM Mino)、H-Mino+二甲基草酰甘氨酸(DMOG)组(20μM Mino、2 mM HIF-1α/VEGF信号通路激活剂DMOG共同孵育PC-3细胞)。检测PC-3细胞增殖、细胞凋亡率、细胞迁移、侵袭、毛细管形成、上皮间质转化(EMT)蛋白及HIF-1α、VEGF蛋白水平。结果与PC-3组相比,L-Mino组、M-Mino组、H-Mino组PC-3细胞生长抑制率、细胞凋亡率、E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白水平依次显著增加(P<0.05),PC-3细胞划痕愈合率、侵袭数量、毛细管数量、波形蛋白(vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、HIF-1α、VEGF蛋白水平依次显著下降(P<0.05),呈现剂量相关性;而DMOG消除了这种影响。结论Mino可能通过抑制HIF-1α/VEGF信号通路来抑制PC-3细胞的增殖及血管生成。

SP1介导CD147通过HIF-1α/VEGF信号通路影响卵巢癌的血管形成

目的:探讨特异性蛋白(specific protein,SP1)介导CD147,即细胞外基质金属蛋白诱导因子(extracellular matrix metalloprotein inducer,EMMPRIN)的表达激活缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)/血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)信号通路对卵巢癌血管形成的影响。方法:血管生长是肿瘤发生的关键步骤,多数恶性肿瘤的血管生成密集且生长迅速。这是由于肿瘤细胞自身可分泌多种生长因子,诱导血管生成。因此,血管生成在肿瘤的发展转移过程中起到重要作用,抑制这一过程将能明显阻止肿瘤组织的发展和扩散转移。体外的血管生成试验能很好地模拟肿瘤的血管发生过程,实验分为过表达组(OE组)、沉默组(SI组)、控制组(CONTROL组)、阴性对照质粒组(NC组),通过沉默或过表达卵巢癌细胞株SKOV3中SP1或CD147,并使用HIF-1α蛋白翻译抑制剂KC7F2阻断HIF-1α/VEGF信号通路,然后用培养上清液作用于人脐静脉血管内皮细胞HUVEC-12,进行体外血管形成实验来模拟肿瘤血管生成改变,并使用荧光实时定量PCR技术检测CD147和VEGF在细胞中的表达分布。结果:阴性对照组血管分支数(206.33±16.03)高于SI-CD147组血管分支数(137.00±15.09);OE-SP1组的CD147 mRNA水平(2.38±0.26)高于SI-SP1组中CD147 mRNA水平(0.55±0.12);SI-SP1+OE-CD147组血管分支数(200.00±19.52)高于SI-SP1组血管分支数(130.00±12.01);OE-CD147组血管分支数(373.67±29.02)高于OECD147+KC7F2组血管分支数(187.00±19.52),OE-CD147组VEGF分子水平(4.05±0.09)高于OE-CD147+KC7F2组VEGF分子水平(1.02±0.11)。结论:卵巢癌中CD147表达升高,上游转录因子SP1可以上调CD147表达,从而激活HIF-1α/VEGF信号通路,促进卵巢癌血管形成过程,最终参与卵巢癌发病。