缺氧条件下缺氧诱导因子-1α抑制剂YC-1对人卵巢癌Skov3干细胞耐药的逆转作用

目的:探讨缺氧诱导因子-1α抑制剂YC-1在缺氧条件下逆转人卵巢癌干细胞Skov3耐药的机制。方法:选用人卵巢癌Skov3细胞通过无血清悬浮培养法富集肿瘤干细胞。分别于常氧及缺氧条件下检测不同浓度顺铂干预Skov3贴壁细胞及干细胞后测定顺铂对于两种细胞的抑制作用,及缺氧后干性指标、耐药指标ABCG2及HIF-1α的表达。当给予HIF-1α抑制剂YC-1后,测定顺铂对Skov3干细胞的抑制作用。并且检测干细胞干性指标、ABCG2及HIF-1α的mRNA表达。结果:悬浮培养的Skov3干细胞的干性指标CD44、NANOG、OCT-4及耐药指标ABCG2较贴壁细胞升高,且缺氧培养后,随着HIF-1α表达的升高,CD44、NANOG、OCT-4及ABCG2的表达也明显升高,P<0.05。干细胞的耐药性高于贴壁细胞,且缺氧培养耐药性增加。当给予YC-1后,干细胞耐药性下调,HIF-1α出现抑制,同时其干性指标CD44、NANOG、OCT-4、耐药ABCG2明显下调,P<0.05。结论:YC-1在缺氧条件下通过抑制HIF-1α下调ABCG2的表达逆转Skov3干细胞耐药。

血清低氧诱导因子-1α与老年晚期非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂治疗期间左心功能的关系

目的 探讨血清低氧诱导因子(HIF)-1α与老年晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)-酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗期间左心功能的关系。方法 入选2020年9月至2022年8月重庆医科大学附属大足医院收治的115例老年NSCLC患者作为病例组(NSCLC组);另以同期在医院接受体检的115例65岁以上老年体检者作为健康对照组。NSCLC组均接受吉非替尼治疗,21天为1个治疗周期,连续检查治疗前、治疗3周期、6周期时血清HIF-1α与左心功能,对照组仅在NSCLC组治疗前同步检查。比较不同治疗时期老年晚期NSCLC患者血清HIF-1α与左心功能,并分析血清HIF-1α与老年NSCLC患者EGFR-TKI治疗期间左心功能的关系。结果 NSCLC组患者血清HIF-1α、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室收缩末期容积(LVESV)均高于对照组,左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期容积(LVEDV)低于对照组,差异均有显著性(P<0.05)。老年晚期NSCLC患者治疗3周期、6周期时LVEF、LVEDV均低于治疗前,血清HIF-1α、LVESV高于治疗前,治疗6周期时LVEDD、LVESD高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关性检验,老年晚期NSCLC患者EGFR-TKI治疗期间血清HIF-1α与LVEF、LVEDV呈负相关(r<0,P<0.05),与LVEDD、LVESD、LVESV呈正相关(r>0,P<0.05)。结论 血清HIF-1α在老年晚期NSCLC患者中表达上调,并且随着EGFR-TKI治疗周期延长血清HIF-1α表达处于升高趋势,血清HIF-1α表达上调与老年晚期NSCLC患者EGFR-TKI治疗期间左心功能障碍有关。

缺氧诱导因子抑制剂YC-1对缺氧肝癌细胞生物钟基因和蛋白表达及增殖的影响

目的观察缺氧诱导因子(HIF)抑制剂YC-1对缺氧肝癌细胞生物钟基因、生物钟蛋白表达及细胞增殖的影响。方法将肝癌细胞Huh7置于乏氧培养箱中培养,分为实验组和对照组,实验组加入50μmol/L的YC-1,对照组加入DMSO,培养48 h后分别提取mRNA和蛋白。采用real-time PCR法检测两组细胞中的Per1、Per2、Per3、Cry1、Cry2、Clock、Bmal1 mRNA,采用Western blotting法检测Per1、Per2、Per3、Cry1、Cry2、Clock、Bmal1蛋白。取对数生长期的Huh7细胞,分为实验组和对照组,实验组加入50μmol/L的YC-1,对照组加入等量生理盐水,在乏氧条件下培养细胞,采用克隆形成实验观察两组克隆形成情况,计算克隆形成率。结果实验组细胞中Clock、Per1、Per3、Cry1 mRNA及蛋白相对表达量低于对照组,Bmal1、Per2、Cry2 mRNA及蛋白相对表达量高于对照组(P均<0.05)。实验组克隆形成个数为83个、克隆形成率为27.67%,对照组分别为191个、63.67%,实验组克隆形成个数及克隆形成率均低于对照组(P均<0.05)。结论 YC-1作用后,缺氧环境下的肝癌细胞中Clock、Per1、Per3、Cry1基因及蛋白表达下调,Bmal1、Per2、Cry2基因及蛋白表达上调,细胞增殖和克隆形成能力减弱。

缺氧诱导因子-1抑制剂放射增敏作用的研究进展

缺氧诱导因子-1(HIF-1)是响应瘤内缺氧的主要核转录因子,通过抑制HIF-1来改善肿瘤乏氧是最近研究的热点。HIF-1抑制剂可影响磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物西罗莫司(雷帕霉素)靶蛋白和Ras蛋白/Raf蛋白/丝裂原活化蛋白激酶激酶1-2/细胞外信号调节激酶1-2两条信号转导通路,抑制热激蛋白90功能,降低HIF-1转录活性等。HIF-1抑制剂与辐射联用后,显著增强癌细胞的放射敏感性,明显降低乏氧细胞的放疗抵抗,有利于提高肿瘤放疗的治疗效果。目前对HIF-1抑制剂作用机制的研究较多,但与辐射的联合应用研究较少,本文对HIF-1抑制剂的放射增敏作用加以综述。

可溶性环氧化物水解酶抑制剂对小鼠内皮祖细胞分泌血管内皮生长因子及缺氧诱导因子-1α的促进作用

目的探讨可溶性环氧化物水解酶抑制剂(t-AUCB)能否促进小鼠来源内皮祖细胞(EPCs)分泌内皮生长因子(VEGF)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α),及可能的相关机制。方法提取小鼠长骨骨髓,离心分离培养,取得高纯度EPCs,不同浓度可溶性环氧化物水解酶抑制剂(t-AUCB)和过氧化体增殖物激活型受体γ(PPAR-γ)阻断剂GW9662单独或联合干预EPCs,Western blot检测上述EPCs体外分泌VEGF及HIF-1α情况。结果从0~100μmol/L,t-AUCB呈浓度依赖性增强EPCs体外分泌VEGF、HIF-1α能力,而5μmol/L t-AUCB阻断剂GW9662可抑制EPC上述功能。1、10、50、100μmol/L t-AUCB促进EPCs分泌VEGF、HIF-1α能力与0μmol/L t-AUCB相比,差异均具有统计学意义(P<0.05);GW9662+100μmol/L t-AUCB与100μmol/L t-AUCB比较,差异具有统计学意义(P<0.05),与0μmol/L tAUCB比较,差异也具有统计学意义(P<0.05)。结论t-AUCB可促进EPCs分泌VEGF及HIF-1α,其机制可能与激活PPAR-γ通路有关。

缺氧诱导因子-1调控转录及相关转录抑制剂的研究进展

细胞低氧适应性反应可通过转录调节蛋白缺氧诱导因子 1 (HIF 1 )和p30 0 /CBP辅激动因子对低氧应答基因的转录激活介导。HIF 1是药学上重要的靶点 ,设计以HIF 1α/p30 0复合物为靶点的小分子转录抑制剂 ,可用于心脑血管疾病或肿瘤的治疗。本文就HIF 1α与p30 0的相互作用 ,以及氧依赖的特殊氨基酸羟化对HIF

缺氧诱导因子-1抑制剂的发现与抗肿瘤作用机制研究

肿瘤组织内微环境缺氧是实体瘤发生发展中一个持续存在的重要病理特征之一，与肿瘤侵袭转移、预后不良、

生长抑制因子4和缺氧诱导因子-1α在直肠癌组织中的表达及其与预后的关系

目的:探讨生长抑制因子4(ING4)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在直肠癌中的表达及预后意义。方法:应用免疫组化法检测133例直肠癌组织及76例正常直肠组织中ING4和HIF-1α的表达,对随访资料进行生存分析。结果:ING4在直肠癌组织中的阳性率(53.4%)显著低于正常直肠组织的阳性率(85.5%),差异有统计学意义(P<0.01);HIF-1α在直肠癌组织中的阳性率(69.9%)高于正常直肠组织的阳性率(42.1%),差异有统计学意义(P<0.01);ING4和HIF-1α阳性表达与肿瘤分化程度、Dukes分期及淋巴结转移有关(P<0.05);直肠癌组织中ING4和HIF-1α的表达呈负相关(r=-0.317,P<0.001);经多因素分析,肿瘤分化程度、Dukes分期、淋巴结转移、ING4表达及HIF-1α表达具有独立的预后意义。结论:ING4和HIF-1α可能参与直肠癌的发生和发展,联合检测有助于判断直肠癌的预后。

生长抑制因子-4与缺氧诱导因子-1α在宫颈上皮内病变及子宫颈鳞癌患者中的表达情况

目的探讨生长抑制因子-4(ING-4)与缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在宫颈上皮内病变及子宫颈鳞癌患者中的表达情况。方法选取2020年6月至2021年12月广东省英德市人民医院收治的30例宫颈上皮内病变患者作为病变组,其中低度病变(LSIL)15例,高度病变(HSIL)15例;另选取同期26例宫颈鳞癌患者作为鳞癌组,其中Ⅰ期11例,Ⅱ期15例,再选取同期20名正常宫颈组织者为对照组。应用免疫组化LDP法检测比较三组患者组织标本中ING-4及HIF-1α的表达情况。结果对照组、病变组、鳞癌组中ING-4阳性表达评分结果显示,对照组ING-4阳性表达评分高于病变组和鳞癌组,病变组ING-4阳性表达评分高于鳞癌组,差异有统计学意义(P<0.05)。HSIL患者ING-4水平低于LSIL患者,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅱ期宫颈鳞癌患者ING-4水平低于Ⅰ期,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组、病变组、鳞癌组中HIF-1α阳性表达评分结果显示,鳞癌组HIF-1α阳性率高于病变组和对照组,病变组HIF-1α阳性高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);HSIL患者HIF-1α高于LSIL患者,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅱ期宫颈鳞癌患者HIF-1α水平高于I期,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,宫颈癌患者肿瘤分期与ING-4呈负相关,与HIF-1α呈正相关(P<0.05)。结论ING-4表达下调及HIF-1α表达上调与宫颈上皮内病变及宫颈鳞癌的发生相关。ING-4与HIF-1α的表达异常相互协同促进宫颈鳞癌的发展。

1缺氧诱导因子-1α反义寡核苷酸对新生血管形成的抑制作用

目的:研究缺氧诱导因子-1α反义寡核苷酸对肿瘤血管形成的影响.方法:通过将腺病毒包装的反义HIF-α(Ad-antiHIF-1α)和腺病毒包装的lacZ标志基因(Ad-lacZ)注射入人大肠癌鸡胚移植模型的鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)中,观察他们对鸡胚移植瘤新生血管形成的影响.结果:注射Ad-antiHIF-1α组血管稀疏、纤细,一级血管数(16.8±1.6vs45.2±2.8,t=2.42,P=0.02<0.05)及二级血管数(34.8±3.6vs58.4±5.3,t=2.97,P=0.005<0.01)均明显少于注射Ad-lacZ组.

缺氧诱导因子-1α与X染色体连锁凋亡抑制蛋白在人卵巢癌中的表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)在人卵巢癌中的表达及意义。方法用免疫组织化学技术法检测人正常卵巢组织标本10例、良性卵巢肿瘤标本10例、交界性卵巢肿瘤标本10例及恶性卵巢癌组织标本30例中HIF-1α和XIAP的表达情况;培养人卵巢癌细胞系SKOV3,向细胞培养瓶中加入HIF-1α激动剂和抑制剂,提取细胞总RNA,用RT-PCR技术观察XIAP和HIF-1α基因表达变化。结果XIAP、HIF-1α在恶性上皮性卵巢癌组及交界性肿瘤组表达率均明显高于良性卵巢肿瘤组(P<0.05)。恶性上皮性卵巢癌组织中HIF-1α与XIAP在临床分期晚期(Ⅲ期和Ⅳ期)组的阳性表达率明显高于临床分期早期(Ⅰ期和Ⅱ期)组(P<0.05),与患者年龄、病理分型和淋巴结转移无关(P>0.05)。在恶性上皮性卵巢癌中HIF-1α与XIAP呈正相关(P<0.05)。随缺氧时间延长,SKOV3细胞系中HIF-1αmRNA表达量渐增;低氧24 h时HIF-1αmRNA表达量达高峰,36 h时HIF-1αmRNA表达量有所回落;添加HIF-1α抑制剂雷帕酶素后,HIF-1αmRNA表达量明显减少,XIAPmRNA亦减少。SKOV3细胞系中XIAP mRNA随HIF-1αmRNA而变化。结论HIF-1α和XIAP可能参与了恶性卵巢肿瘤的发生;HIF-1α和XIAP的高表达可能提示预后不良;HIF-1α对XIAP可能存在调控作用,两者可能协同促进卵巢癌的发生。

子宫内膜癌中缺氧诱导因子-1α靶向抑制研究进展

缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是触发适应性反应的转录因子,在低氧条件下,对癌症代谢和治疗抗性方面起关键作用。HIF-1α的异常调节和过度表达已经与癌症生物学以及许多其他病理生理学有关,特别是在血管形成、能量代谢、细胞存活和肿瘤侵袭等领域。组织缺氧在子宫内膜癌生长过程中极为多见,HIF-1α作为关键转录因子,通过调控其下游基因的表达,在内膜癌缺氧耐受和恶行性进展方面发挥着重要的作用。近年来,靶向HIF-1α途径降低肿瘤进展和血管生成成为国内外研究的热点。众多研究发现,四硫钼酸盐、SHARP1、抗坏血酸、促红细胞生成素受体这4种物质,在机体内与其他细胞、生物因子、激素等共同发挥作用,通过不同的途径对HIF-1α的活性产生显著影响.为进一步探究HIF-1的生物活性及其相关的肿瘤治疗提供了更多的理论依据。

缺氧诱导因子-1与恶性肿瘤关系的研究进展

低氧是恶性肿瘤微环境的特征之一,缺氧诱导因子-1(HIF-1)是细胞适应低氧环境的重要调节因子。HIF-1是低氧环境下的氧调节型α亚基与组成型β亚基形成的稳定的异二聚体,其促进肿瘤血管生成、上调并激活基质金属蛋白酶及赖氨酸氧化酶等细胞因子及信号通路、诱导特异性微RNA生成,参与多种恶性肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移等相关生物学行为。通过不同的方式抑制HIF-1α的活性,改变其结构稳定性,对于恶性肿瘤的治疗具有重要意义。但HIF-1α能否成为恶性肿瘤治疗的靶点及其预后判断的指标,有待于进一步的研究探索。

沉默HIF-1α表达逆转缺氧诱导肝癌免疫抑制的实验研究

目的:探讨缺氧诱导因子-1(HIF-1α)表达在缺氧诱导肝癌免疫抑制中的作用,以期阐明缺氧致肝癌免疫抑制的分子机制。方法:构建缺氧C57BL/6小鼠移植瘤模型,缺氧探针Hypoxyprobe TM-1标记缺氧组织,免疫组化检测缺氧组织HIF-1α表达,qPCR检测缺氧组织肿瘤免疫因子表达;慢病毒构建稳定敲减HIF-1α的Hepa1-6小鼠肝癌细胞株,并移植于C57BL/6小鼠,6周后检测移植瘤瘤重,Western blot检测移植瘤HIF-1α表达,流式细胞仪检测移植瘤中肿瘤浸润免疫细胞CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞表达,q PCR检测缺氧组织肿瘤免疫因子表达。结果:C57BL/6小鼠缺氧移植瘤模型构建成功,缺氧组织HIF-1α高表达,肿瘤抑制因子IFN-γ、IL-12b和CXCL10低表达,肿瘤促进因子IL-10、IL-1β和IL-17高表达;敲减HIF-1α明显抑制了移植瘤生长,降低了CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞浸润,同时抑制了肿瘤促进因子IL-10、IL-1β和IL-17表达,促进了肿瘤抑制因子IFN-γ、IL-12b和CXCL10表达。结论:缺氧可诱导肝癌组织HIF-1α表达及免疫抑制,相反,沉默HIF-1α可抑制移植瘤生长并逆转肝癌免疫抑制,揭示了HIF-1α在缺氧致肝癌免疫抑制中的作用,可能为将来肝癌诊治提供新思路。

乙肝病毒X蛋白上调肝癌细胞缺氧诱导因子-1α的作用和机制研究

背景与目的:乙肝病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)和缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在肝癌发生、发展过程中起重要作用。有研究显示,两者在肝癌组织中的表达呈正相关,但相关机制尚不明确。本研究拟进一步在细胞水平上探讨HBx对HIF-1α的调控作用及机制。方法:用LipofectemineTM 2000包裹HBx表达质粒转染到肝癌Huh7细胞。蛋白[质]印迹法(Western blot)检测Huh7细胞中HIF-1α和HIF-1β蛋白的表达;特异性试剂盒检测HIF-1α转录活性;实时定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)检测HIF-1α及其靶基因血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和多药耐药基因1(multi-drug resistance gene 1,MDR1)m RNA表达变化;免疫共沉淀法检测HIF-1α、HBx和希佩尔林道病肿瘤抑制蛋白(protein von Hippel-Lindau,p VHL)间的相互作用。结果:转染HBx质粒后,Huh7细胞中HIF-1α蛋白表达、转录活性及其靶基因VEGF和MDR1的m RNA表达水平明显上调(P<0.05),然而HBx对HIF-1αm RNA表达水平没有明显影响(P>0.05)。同时,HBx显著削弱p VHL介导的泛素化水解蛋白酶降解HIF-1α的活性。免疫共沉淀法检测进一步提示,HBx可直接结合p VHL,而对HIF-1α没有结合作用。结论:HBx可能通过直接结合p VHL,抑制其与HIF-1α的相互作用,从而增强HIF-1α蛋白的稳定性及转录活性。

下调缺氧诱导因子-1表达对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察肝癌缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1alpha,HIF-1)表达及靶向其基因转录对肝癌细胞增殖的影响.方法:以自身配对法收集术后肝癌及癌周组织,免疫组织化学染色法分析HIF-1胞内表达及分布;按照HIF-1基因序列合成miRNA,筛选干扰效率最佳者转染肝癌(HepG2)细胞,以荧光定量-PCR和Western blot分别检测HIF-1转录和蛋白表达;并以miRNA转染联合阿霉素后,流式细胞仪检测沉默细胞中HIF-1对HepG2细胞增殖的影响.结果:肝癌及癌周组织HIF-1表达呈棕黄色颗粒状,位于胞浆和部分胞核,呈均匀表达,中央静脉周围明显;其阳性率癌组织为80%,低于癌旁100%表达(2=22.35,P<0.001);与瘤体大小和分化程度相关;HepG2细胞经miRNA干扰后,HIF-1在RNA和蛋白水平分别下降87%和56%,发生细胞凋亡(22.46%±0.61%)和G1期阻滞(61.49%±1.12%,P<0.01);加入阿霉素后细胞凋亡率和G1期细胞分别增至36.99%±0.88%和65.68%±0.91%.结论:HIF-1过表达与肝癌密切相关,以特异性miRNA靶向HIF-1,可调控细胞周期,通过加速凋亡的机制抑制癌细胞增殖.

缺氧诱导因子-1在大鼠缺血性脑损伤中的双重作用

缺氧诱导因子-1(HIF-1)是低氧生理及病理过程中起作用的重要转录调控因子,由HIF-1α和HIF-1β两个亚单位组成。HIF-1调控的基因在能量代谢、红细胞生成、血管生成、血管扩张,细胞存活与凋亡中起一定作用。在大鼠缺血性脑损伤中,由于缺血时间和程度的不同,HIF-1对神经细胞具有保护和诱导凋亡的双重作用。它可以通过诱导靶基因如血管内皮细胞生长因子(VEGF)、促红细胞生成素(EPO)、葡萄糖转移蛋白-1(GLU-1)及葡萄糖合成酶的生成对缺血后脑细胞产生保护作用。然而,在严重缺氧条件下,HIF可以通过与肿瘤抑制蛋白p53结合、诱导bcl-2家族中的凋亡前基因BNIP3和NIX的表达以及促进诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的生成而诱导细胞凋亡。特异性激活促进存活的基因或者抑制HIF-1的表达都可能成为临床治疗的策略。

重组人血管内皮抑制素对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型肺组织低氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子表达的影响

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonarydisease，COPD）：是一种以气流受限为特征的肺部疾病，就世界平均水平，COPD居当前死亡原因的第4位，已成为一个重要的公共卫生问题。肺血管重塑在COPD进展到肺动脉高压的过程中起重要作用[2]。重组人血管内皮抑制素（商品名：恩度．endostar）是一种特异性内源性血管生成抑制剂，能特异地作用于内皮细胞，尤其是微血管的内皮细胞，控制新生血管内皮细胞的增殖，诱导其凋亡，抑制其迁移，从而抑制新生血管生成[3]。

低氧诱导因子-1的病理生理及相关药物研究进展

低氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factors,HIF-1)是介导哺乳动物和人体细胞低氧适应性反应的主要核转录因子,是专一调节氧稳态的关键物质。HIF-1对胚胎的正常发育,软骨及骨的形成等多种生理过程起保护及促进作用,也与肿瘤、糖尿病及其并发症等多种缺血低氧性疾病密切相关。HIF-1在这些疾病中的分子机制已成为目前的研究热点,笔者就HIF-1的结构特征、调控机制、生物学效用及在药物研发等方面进行综述。