缺氧诱导因子-2α在不同侵袭能力乳腺癌细胞和组织中的表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)在不同侵袭能力乳腺癌细胞和组织中的表达及意义。方法 (1)采用免疫组化和RT-PCR法检测27例转移乳腺癌组织、20例非转移乳腺癌组织和30例癌旁正常乳腺组织中的HIF-2α蛋白和mRNA的表达;(2)采用免疫细胞化学和RT-PCR法检测不同转移潜能乳腺癌细胞株(MCF-7、MDA-MB-435S)和人正常乳腺上皮细胞株HBL-100中HIF-2α蛋白和mRNA的表达,分析其表达与乳腺癌转移潜能的关系。结果 (1)在伴淋巴结转移乳腺癌组织中HIF-2α蛋白的阳性表达率和HIF-2αmRNA的表达水平均显著高于无淋巴结转移乳腺癌组织(P<0.05);且均显著高于正常乳腺组织中的表达(P<0.05)。(2)HIF-2α蛋白和mRNA的表达水平在高转移潜能乳腺癌细胞株MDA-MB-435S中的表达均显著高于低转移潜能乳腺癌细胞株MCF-7中的表达(P<0.05),且与HBL-100细胞比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HIF-2α的过表达可能与乳腺癌的转移潜能有关,其有望成为判定乳腺癌侵袭和转移能力的有效指标。

沉默缺氧诱导因子-2α对乳腺癌细胞化疗敏感性的影响

目的探讨缺氧诱导因子-2α(hypoxia inducible factor-2α,HIF-2α)siRNA对人乳腺癌细胞增殖及化疗药物敏感性的影响。方法 RNA干扰技术沉默MCF-7细胞中HIF-2α的表达;采用免疫细胞化学和RT-PCR法检测转染后HIF-2α基因的表达,Co C_l2模拟缺氧条件下,采用MTT比色法和流式细胞术检测不同剂量的化疗药物(5-氟尿嘧啶、阿霉素和紫杉醇)在HIF-2α沉默后对细胞生长抑制率和细胞凋亡的影响。结果经HIF-2αsiRNA处理的MCF-7细胞中HIF-2α基因表达明显下调(P<0.05),HIF-2αsiRNA处理的MCF-7细胞在不同剂量化疗药物作用后,细胞生长抑制率和细胞凋亡率与对照组相比其明显增加,化疗药物敏感性明显增强(P<0.05)。结论 HIF-2αsiRNA具有促进化疗药物诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡、抑制增殖及增强化疗药物敏感性的作用,沉默HIF-2α有望成为乳腺癌基因治疗的新途径。

缺氧诱导因子-2α在子宫颈鳞癌组织中的表达及临床意义

目的研究缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)在子宫颈鳞癌组织中的表达情况及与肿瘤生物学特征的关系。方法免疫组织化学染色方法检测子宫颈鳞癌组织中HIF-2α的表达。结果 40例子宫颈鳞癌组织中HIF-2α阳性表达得分为4.51±1.04,明显高于15例正常子宫颈组织的得分(2.28±1.60,P<0.001);子宫颈鳞癌患者中,有淋巴结转移的组织得分为5.00±0.89,也明显高于无淋巴结转移组织的得分(4.00±0.83,P<0.01);HIF-2α的阳性表达与子宫颈鳞癌患者的年龄无关,与子宫颈癌组织的FIGO2009分期、肿瘤大小有关。结论HIF-2α的表达与子宫颈鳞癌的生长、侵袭有密切关系。

磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B和丝裂原活化蛋白激酶/细胞信号调节激酶1/2信号通路抑制剂对乳腺癌细胞缺氧诱导因子-2α表达的影响

目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和丝裂原活化蛋白激酶/细胞信号调节激酶1/2(MEK/ERK1/2)信号通路抑制剂对缺氧诱导的乳腺癌MCF-7细胞中缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)表达的影响。方法乳腺癌MCF-7细胞常规培养24 h后,分为常氧组、缺氧组、缺氧+低剂量LY294002组、缺氧+高剂量LY294002组,缺氧+低剂量U0126组和缺氧+高剂量U0126组。常氧组细胞使用含生理盐水的RPMI 1640培养基,缺氧组细胞使用含100μmol·L-1氯化钴的RPMI 1640培养基,缺氧+低剂量LY294002组细胞使用含100μmol·L-1氯化钴和4μmol·L-1 LY294002的RPMI 1640培养基,缺氧+高剂量LY294002组细胞使用含100μmol·L-1氯化钴和40μmol·L-1 LY294002的RPMI 1640培养基,缺氧+低剂量U0126组细胞使用含100μmol·L-1氯化钴和2μmol·L-1 U0126的RPMI 1640培养基,缺氧+高剂量U0126组细胞应用含8μmol·L-1 U0126的RPMI 1640培养基,继续培养3 h。采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测各组细胞HIF-2αmRNA的表达;采用Western blot法检测各组细胞HIF-2α蛋白、磷酸化Akt(p-Akt)和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达。结果缺氧组细胞中HIF-2αmRNA相对表达量及HIF-2α蛋白、p-Akt蛋白和p-ERK1/2蛋白相对表达量高于常氧组(P<0.05);缺氧+低剂量LY294002组、缺氧+高剂量LY294002组、缺氧+低剂量U0126组、缺氧+高剂量U0126组细胞中HIF-2αmRNA相对表达量及HIF-2α蛋白、p-Akt蛋白和p-ERK1/2蛋白相对表达量低于缺氧组(P<0.05)。缺氧+高剂量LY294002组细胞中HIF-2αmRNA相对表达量及HIF-2α蛋白、p-Akt蛋白和p-ERK1/2蛋白相对表达量低于缺氧+低剂量LY294002组(P<0.05);缺氧+高剂量U0126组细胞中HIF-2αmRNA相对表达量及HIF-2α蛋白、p-Akt蛋白和p-ERK1/2蛋白相对表达量低于缺氧+低剂量U0126组(P<0.05)。结论PI3K/Akt和MEK/ERK1/2信号通路可能是缺氧诱导HIF-2α表达的上游信号通路,在缺氧条件下对HIF-2α具有正向调节作用,在乳腺癌的发生、发展中发挥重要作用。

乳腺癌中缺氧诱导因子-2α与MMP-2的表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子-2α(hypoia-inducible factor-2α,HIF-2α)与基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)在乳腺癌中的表达及意义。方法 (1)采用免疫组化SP法检测47例乳腺癌标本及30例癌旁组织中HIF-2α和MMP-2的表达,分析其表达与乳腺癌临床病理特征的关系及二者表达的相关性;(2)采用Western blot法检测不同转移潜能乳腺癌细胞株中HIF-2α和MMP-2的表达,分析其表达与乳腺癌转移潜能的关系。结果 (1)HIF-2α蛋白在乳腺癌组织中的阳性率高于癌旁组织(P<0.05),且其高表达与肿瘤大小、分期及淋巴结转移均密切相关(P均<0.05)。MMP-2蛋白在乳腺癌组织中的阳性率高于癌旁组织(P<0.05),且其低表达与肿瘤的淋巴结转移均密切相关(P<0.05);HIF-2α蛋白与MMP-2的表达呈正相关(P<0.05)。(2)Western blot法检测结果提示与低转移乳腺癌细胞相比,高转移潜能乳腺癌细胞中HIF-2α和MMP-2的表达均明显升高。结论 HIF-2α和MMP-2的过表达可能与乳腺癌的侵袭、转移有关。二者有望成为判定乳腺癌侵袭和转移能力的指标。

缺氧诱导因子-2α对乳腺癌细胞多药耐药的影响

目的探讨缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)对乳腺癌细胞多药耐药表型的影响及其意义。方法将人低转移乳腺癌MCF-7细胞分为对照组、常氧组和缺氧组,常规培养各组细胞,采用Co Cl2处理并建立细胞缺氧模型。通过实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot法检测各组细胞中HIF-2αmRNA和蛋白的表达,体外药物敏感试验检测缺氧状态下乳腺癌MCF-7细胞对化学治疗药物的敏感性;流式细胞术检测化学治疗药物在常氧组和缺氧组细胞内的蓄积、潴留及药物泵出率,并检测阿霉素诱导常氧组和缺氧组细胞的凋亡情况。结果缺氧组人低转移乳腺癌MCF-7细胞中HIF-2αmRNA和蛋白相对表达量均高于常氧组和对照组(P <0. 05),常氧组人低转移乳腺癌MCF-7细胞中HIF-2αmRNA和蛋白相对表达量与对照组比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。缺氧组紫杉醇、阿霉素及氟尿嘧啶的半抑制浓度(IC50)显著高于常氧组(P <0. 05)。与常氧组比较,缺氧组人低转移乳腺癌MCF-7细胞内阿霉素的蓄积和潴留显著降低(P <0. 05),药物泵出率显著增高(P <0. 05)。阿霉素诱导下,缺氧组和常氧组人低转移乳腺癌MCF-7细胞凋亡指数分别为(68. 50±0. 93)%和(93. 50±0. 65)%,缺氧组人低转移乳腺癌MCF-7细胞凋亡指数低于常氧组(P <0. 05)。结论缺氧状态下HIF-2α可能通过降低化学治疗药物的潴留和蓄积、减少细胞凋亡而降低乳腺癌细胞对化学治疗药物的敏感性。

缺氧诱导因子-2α和多药耐药基因1在乳腺癌中的表达及相关性

目的探讨缺氧诱导因子(HIF)-2α和多药耐药基因(MDR)1在乳腺癌中的表达及相关性。方法采用免疫组化和RT-PCR法检测47例乳腺癌组织和30例癌旁正常乳腺组织中的HIF-2α和MDR1蛋白和mRNA的表达及其相关性。低氧培养建立乳腺癌MCF-7细胞缺氧模型,应用荧光定量PCR和Western印迹分别检测每组缺氧模型细胞中HIF-2α和MDR1蛋白和mRNA的表达及其相关性。结果在乳腺癌组织中HIF-2α蛋白的阳性表达率(76.7%)和MDR1蛋白的阳性表达率(80.0%)均显著高于正常乳腺组织(P<0.05);在乳腺癌组织中HIF-2αmRNA的表达水平(0.896±0.012)和MDR1 mRNA的表达水平(0.884±0.016)均显著高于正常乳腺组织(P<0.05);乳腺癌组织中HIF-2α及MDR1蛋白及mRNA的表达均呈正相关(P均<0.05)。在缺氧组,随着缺氧时间的延长MCF-7细胞中MDR1的表达均逐渐增高,且MDR1的表达升高与HIF-2α的表达呈同步化改变。结论缺氧可通过核转录因子HIF-2α上调乳腺癌细胞内MDR1的表达,从而使乳腺癌细胞获得多药耐药性。HIF-2α和MDR1将可能成为逆转乳腺癌耐药的新的分子靶点。

胰腺癌组织中缺氧诱导因子-2α的表达及临床意义

目的探讨胰腺癌中缺氧诱导因子-2α（HIF-2α）的表达，并观察HIF-2α的表达对患者预后生存的影响。方法选取62例胰腺癌标本，采用免疫组织化学方法对胰腺癌组织中的HIF-2α表达进行检测，分析其与临床病理特征及预后生存的关系。结果32例胰腺癌组织HIF-2α表达阳性，阳性表达率51.6％（32／62）。10例正常胰腺组织HIF-2α表达均阴性。HIF-2α阳性表达于细胞质。HIF-2α在胰腺癌组织中的表达与肿瘤TNM分期、血管侵犯有关，差异具有统计学意义（χ^2=-6．452，4．089；P均〈0．05），而HIF-2α在胰腺癌组织中的表达与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、淋巴结转移、组织学分级无关，差异无统计学意义（χ^2-0．008，0．001，0．518，1．004，2．325，1．617；P均〉0．05）。胰腺癌中HIF-2α阴性组病例3年生存率为30％，而HIF-2α阳性组病例3年生存率为6．25％，两组之间差异具有统计学意义（χ^2-5．984，P〈0．05）。结论HIF-2α在胰腺癌组织中高表达可能与肿瘤发生、发展密切相关，HIF-2α有望成为胰腺癌新的治疗靶点和预后标志物。

缺氧诱导因子-2α对基质金属蛋白酶-2启动子活性的转录调控作用

目的克隆基质金属蛋白酶(MMP)-2基因5'上游1.7 kb启动子,构建启动子-萤光素酶报告基因载体pGL3-MMP-2 pro,探讨缺氧诱导因子(HIF)-2α对MMP-2启动子转录活性的影响。方法采用PCR扩增MMP-2启动子上游区域基因片段,插入到含有萤光素酶报告基因的载体PGL3-basic中构建重组子,经双酶切和测序鉴定后,将重组子转染MCF-7细胞,通过双萤光素酶活性分析HIF-2α对MMP-2启动子转录活性的影响。结果 PCR扩增的1.7 kb片段经测序正确无误,pGL3-MMP-2 pro转染MCF-7细胞48 h后,双萤光素酶活性测定结果显示加CoCl_2诱导的pGL3-MMP-2 pro+HIF-2α组启动子活性显著高于pGL3-MMP-2 pro组、阴性对照组和空白对照组(均P<0.05)。结论 HIF-2α促进了MMP-2启动子转录活性。

急性缺氧/复氧时缺氧诱导因子-2α在妊娠期肝内胆汁淤积症患者胎盘中的变化

目的探讨缺氧诱导因子-2α(hypoxia-inducibletranscriptionfactors-2α,HIF-2α)在ICP患者胎盘上的表达及意义。方法通过急性缺氧/复氧体外培养胎盘绒毛组织,采用免疫组织化学染色技术,研究了ICP患者和正常晚孕妇女胎盘上HIF-2α蛋白质表达的变化。结果(1)常氧下(21%O2)ICP患者胎盘组织HIF-2α的表达明显高于正常晚孕组(P<0.01);(2)2%O2低氧浓度下培养4h后两组胎盘上HIF-2α的表达无显著性差异(P>0.05);正常组HIF-2α的表达较常氧下显著升高(P<0.01);(3)复氧15min,正常组胎盘绒毛HIF-2α的表达较缺氧4h显著降低(P<0.01)。而缺氧/复氧过程中ICP组HIF-2α的变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论急性缺氧时ICP胎盘上HIF-2α的功能障碍可能导致不良妊娠结局。

缺氧诱导因子-2α在非小细胞肺癌中的表达及与血管内皮生长因子的关系

目的:探讨非小细胞肺癌中缺氧诱导因子-2α(hypoxia-inducible factor 2 alpha,HIF-2α)的表达及其与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测非小细胞肺癌组织中HIF-2α和VEGF的表达。结果:45例非小细胞肺癌组织中HIF-2α和VEGF表达阳性率分别为77.78%(35/45)和75.56%(34/45),10例正常肺组织中HIF-2α不表达,VEGF阳性仅1例。HIF-2α和VEGF的表达结果显示:与肿瘤大小、分化程度无显著性相关(P>0.05);与淋巴结转移、病理类型、临床分期有显著性相关(P<0.05);HIF-2α和VEGF的表达呈正相关(P<0.01)。结论:HIF-2α和VEGF联合检测对于肺癌的预后及治疗有一定的指导作用。

Nature:缺氧诱导因子-2α拮抗剂对临床前肾癌模型的疗效评价研究

透明细胞型肾细胞癌（ccRCC）是一类最常见的肾癌,在其癌细胞中,肿瘤抑制蛋白pVHL通常表达失活,导致缺氧诱导因子-2α（HIF-2）累积。HIF-2α是一种细胞核转录因子,具备bHLH-PAS蛋白结构域,参与了与血管生成有关的多种肿瘤形成过程,长期以来被认为无法做为理想的药物靶标。

缺氧诱导因子-2α在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨缺氧诱导因子-2α(hypoxia inducible factor-2α,HIF-2α)在胃癌组织中的表达及其临床意义.方法:采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应检测36例胃癌及正常胃黏膜上皮组织中HIF-2α蛋白及mRNA的表达,并分析其表达与胃癌临床病理特征的关系.结果:HIF-2α蛋白在胃癌组织中的阳性表达率显著高于正常胃黏膜上皮(83.3%vs8.3%,P<0.05),并且其在胃癌组织中的阳性表达率随分化程度的降低而显著增高(P<0.05);在有淋巴结转移组中HIF-2α蛋白的阳性表达率显著高于无淋巴结转移组(91.3%vs69.2%,P<0.05).HIF-2αmRNA在胃癌组织中的阳性表达率及表达水平均显著高于正常胃黏膜上皮(77.8%vs5.6%,0.755±0.238vs0.581±0.147,均P<0.05);HIF-2αmRNA的表达与胃癌患者的分化程度和淋巴结转移均存在明显相关性(均P<0.05).结论:HIF-2α的表达可能与胃癌的发生发展有关,并对判断胃癌患者的生物学行为具有一定的意义.

乳腺癌中缺氧诱导因子-2α,微血管密度与细胞凋亡的关系

应用免疫组织化学技术和末端脱氧核苷酸转移酶介导的X-dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测6 6例乳腺癌中缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)的表达,检测微血管密度(MVD)和细胞凋亡。结果示6 6例乳腺癌HIF-2α阳性率为4 2.4%,其表达随病理分期的升高而增加(P<0.0 1)。HIF-2α的表达与乳腺癌病理分级无关(P>0.0 5),而与MVD呈正相关(r=0.6 8 5,P<0.0 1),与肿瘤调亡指数(AI)呈负相关(r=-0.5 6 1,P<0.0 1)。乳腺癌MVD与AI呈负相关(r=-0.581,P<0.0 1)。提示在乳腺癌发展过程中,HIF-2α对肿瘤的能量代谢和新血管生成有促进作用;微血管的形成可抑制肿瘤细胞的凋亡,从而促进肿瘤的恶性进展。

非小细胞肺癌组织中缺氧诱导因子-2α、基质金属蛋白酶7的表达及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌组织中缺氧诱导因子(HIF)-2α、基质金属蛋白酶7(MMP7)的表达及临床意义。方法收集90例非小细胞肺癌患者的非小细胞肺癌组织和癌旁组织,采用免疫组化染色法检测HIF-2α、MMP7的表达情况。比较非小细胞肺癌组织和癌旁组织中HIF-2α和MMP7阳性表达率,比较不同临床特征非小细胞肺癌患者非小细胞肺癌组织中HIF-2α和MMP7阳性表达率,分析HIF-2α与MMP7表达的相关性。结果HIF-2α和MMP7均主要表达于细胞质。非小细胞肺癌组织中HIF-2α阳性表达率为55.56%(50/90),高于癌旁组织的12.22%(11/90),差异有统计学意义(P﹤0.05);非小细胞肺癌组织中MMP7阳性表达率为57.78%(52/90),高于癌旁组织的8.89%(8/90),差异有统计学意义(P﹤0.05)。腺癌、低分化、有淋巴结转移、临床分期为Ⅲ~Ⅳ期非小细胞肺癌患者非小细胞肺癌组织中HIF-2α和MMP7阳性表达率分别明显高于鳞状细胞癌、中高分化、无淋巴结转移、临床分期为Ⅰ~Ⅱ期的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。经Spearman等级相关性分析,HIF-2α与MMP7表达呈正相关(r=0.348,P﹤0.05)。结论HIF-2α和MMP7在非小细胞肺癌组织中高表达,其异常表达与肿瘤的浸润和转移有关。

缺氧诱导因子-2α在胃癌组织中的表达及与肿瘤细胞凋亡的关系

目的检测胃癌组织中缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)、肿瘤细胞凋亡率及凋亡基因生存素(Survivin)、Bcl-2、p53的表达,分析HIF-2α与胃癌细胞凋亡的关系,并探讨临床意义。方法免疫组化染色(SP)法检测38例胃癌组织(其中30例有癌旁组织)标本癌旁组织石蜡标本HIF-2α、Survivin、Bcl-2、p53的表达情况;TUNEL法检测胃癌细胞的凋亡情况并计算凋亡指数(AI)。结果胃癌组织中HIF-2α、Survivin、Bcl-2、p53阳性表达率分别为84.21%(32/38)、76.32%(29/38)、73.68%(28/38)、52.63%(20/38),癌旁组织中四种蛋白阳性率则分别为30.00%(9/30)、33.33%(10/30)、36.67%(11/30)、40.00%(12/30)。HIF-2α、Survivin、Bcl-2在胃癌组织中表达强度高于癌旁组织(P<0.05),而p53在胃癌组织中表达与癌旁组织差异无统计学意义(P>0.05)。TUNEL结果显示HIF-2α强表达组的胃癌细胞凋亡指数明显高于HIF-2α弱表达组(P<0.05)。Spearman相关分析显示,肿瘤组织中HIF-2α与Survivin、Bcl-2表达分别存在正相关关系(P<0.05),Survivin与Bcl-2表达有正相关关系(P<0.05)。结论 HIF-2α在胃癌组织中表达增强,HIF-2α可能通过调节凋亡基因Survivin、Bcl-2表达而促进胃癌细胞的凋亡抵抗能力。

心肺复苏成功后血清缺氧诱导因子-1α和缺氧诱导因子-2α与患者预后的关系

目的探讨行心肺复苏的心搏骤停患者缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和因子-2α(HIF-2α)与预后的关系。方法2016年6月至2019年3月常山县人民医院共有151例心搏骤停患者接受接受心肺复苏治疗,其中105例复苏成功(心肺复苏成功组),46例复苏失败(心肺复苏失败组)。采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测血清HIF-1α、HIF-2α。心肺复苏成功患者随访6个月,根据格拉斯哥预后评分(GOS)高低分为预后良好组和不良组,比较HIF-1α和HIF-2α表达水平。分析HIF-1α和HIF-2α与生存率的关系。结果复苏成功组患者复苏成功即刻血清中HIF-1α、HIF-2α表达水平[(355.87±78.02)pg/m L、(133.75±26.93)pg/m L]明显低于复苏失败组[(454.15±110.16)pg/m L、(194.29±43.56)pg/m L],差异均有统计学意义(P<0.05);预后良好亚组患者血清中HIF-1α、HIF-2α表达水平[(335.17±80.82)pg/m L、(87.62±19.21)pg/m L]明显低于预后不良亚组[(401.11±106.82)pg/m L、(142.11±39.50)pg/m L](P<0.05);HIF-1α、HIF-2α低表达组患者6个月生存率(70.00%、87.5%)明显高于高表达组(30.43%、28.00%),差异均有统计学意义(χ2=4.329、7.557,均P<0.05)。结论低血清HIF-1α和HIF-2α预示心肺复苏生还者近期预后较好。

缺氧诱导因子-2α通过血管生成素-2途径调控缺氧诱导血管形成的研究

目的 探讨缺氧诱导因子-2α（HIF-2α）调控缺氧环境下内皮细胞血管形成的机制.方法 采用实验研究方法.（1）细胞分组：取对数生长期人类脐静脉内皮细胞（HUVECs）：细胞不做任何处理设为空白对照组,细胞转染对照shRNA设为空载体组,细胞转染HIF-2α shRNA设为HIF-2α沉默组,细胞转染HIF-2α shRNA后加入rh-Ang-2设为HIF-2α沉默联合rh-Ang-2组.（2） Western blot检测：①缺氧环境下培养0、2、4、8、12、16、20 h的HUVECs中血管生成素-2（Ang-2）和HIF-2α的蛋白表达量.②检测空白对照组、空载体组和HIF-2α沉默组HUVECs中Ang-2和HIF-2α的蛋白表达量.（3）ELISA检测：检测空白对照组、空载体组、HIF-2α沉默组HUVECs上清液中Ang-2水平.（4）小管形成实验检测：空白对照组、空载体组、HIF-2α沉默组和HIF-2α沉默联合rh-Ang-2组HUVECs中内皮细胞小管数目.（5）Transwell法检测细胞迁移：①空白对照组、空载体组、HIF-2α沉默组和HIF-2α沉默联合rh-Ang-2组HUVECs迁移细胞数目.②空白对照组、空载体组、HIF-2α沉默组和HIF-2α沉默联合rh-Ang-2组HUVECs上清液干预肝癌细胞SMMC-7721后,肝癌细胞SMMC-7721迁移数目.正态分布的计量资料以-x±s表示,重复测量数据采用重复测量的方差分析,多组间比较采用单因素方差分析并采用Dunnett＇s test进行组间两两比较.结果 （1） Western blot检测相关蛋白表达量：①HUVECs缺氧培养0、2、4、8、12、16、20 h细胞中Ang-2的表达量分别为0.110±0.011、0.120±0.020、0.210±0.070、0.410±0.100、0.520±0.090、0.790±0.130、1.010±0.220;HIF-2α的表达量分别为0.180±0.090、0.410 ±0.070、0.470±0.110、0.470±0.070、0.580 ±0.120、0.690 ±0.140、0.920±0.130,经缺氧处理后两种蛋白表达量均有增高,且随缺氧时间延长,表达量呈升高趋势,差异有统计学意义（F =403.550,3 265.587,P＜0.05）.②空白对照组、空载体组和HIF-2α沉默组HUVECs中Ang-2的蛋白表达量分别为1.030 ±0.180、1.070 ±0.120、0.210±0.070,HIF-2α分别为0.940±0.110、0.930 ±0.190、0.170±0.021,3组上述指标比较,差异均有统计学意义（F=290.242,26.688,P＜0.05）.（2）ELISA检测结果显示：空白对照组、空载体组和HIF-2α沉默组HUVECs中Ang-2表达量为（433.2±9.7）ng/L、（438.3±2.6）ng,/L、（114.6 ±4.2）ng/L,3组比较,差异有统计学意义（F=2 642.180,P ＜0.05）.（3）小管形成实验结果显示：空白对照组、空载体组、HIF-2α沉默组和HIF-2α沉默联合rh-Ang-2组HUVECs中内皮细胞小管数目分别为（48.3±2.5）个、（47.4±3.1）个、（19.7±1.5）个、（38.3±2.1）个,4组比较,差异有统计学意义（F=148.196,P＜0.05）.（4） Transwell法检测细胞迁移结果：①空白对照组、空载体组、HIF-2α沉默组和HIF-2α沉默联合rh-Ang-2组HUVECs中,迁移细胞数目分别为（140.3±3.5）个、（142.7±2.1）个、（42.7±3.1）个、（78.1±4.2）个,4组比较,差异有统计学意义（F=212.205,P＜0.05）.②Transwell法检测4种不同上清液干预的SMMC-7721细胞迁移结果：空白对照组、空载体组、HIF-2α沉默组和HIF-2α沉默联合rh-Ang-2组上清液分别处理SMMC-7721细胞后,其细胞迁移数目分别为：（106.7±5.5）个、（102.7±6.6）个、（63.0±3.3）个、（96.7±2.1）个,4种处理方式比较,差异有统计学意义（F =55.122,P＜0.05）.结论 HIF-2α可通过Ang-2调控缺氧下内皮细胞的血管形成,并通过内皮细胞分泌的Ang-2促进肝癌细胞SMMC-7721迁移.

缺氧诱导因子HIF-1α与HIF-2α在宫颈癌组织中的表达及相关性研究

目的:研究缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1alpha,HIF-1α)与缺氧诱导因子-2α(hypoxia inducible factor-2alpha,HIF-2α)在宫颈癌组织中的表达和相关性。方法:免疫组织化学染色方法检测宫颈癌组织中HIF-1α与HIF-2α的表达。用SPSS统计软件分析HIF-1α与HIF-2α在宫颈癌组织中的相关性。结果:原位癌组、浸润癌组HIF-1α蛋白阳性表达率分别为57.7%、78.6%;HIF-2α蛋白阳性表达率分别为65.4%、85.7%,宫颈癌组织中HIF-1α阳性表达得分为1.56±1.60,HIF-2α阳性表达得分为4.51±1.04,HIF-1α和HIF-2α蛋白的表达呈显著正相关(rs=0.855,P<0.05)。结论:宫颈原发癌、浸润癌中,HIF-1α、HIF-2α表达与宫颈癌临床病理特征有密切关系,且两者表达呈显著正相关,两者在宫颈癌的发生发展及浸润转移过程中可能起协同作用。

缺氧诱导因子-1α、缺氧诱导因子-2α和血管内皮生长因子在肺转移瘤中的表达及其临床意义

目的 观察缺氧诱导因子（HIF）-1α、HIF-2α和血管内皮生长因子（VEGF）基因在肺转移瘤组织中的表达.方法 采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）法检测93例手术切除的转移性非小细胞肺癌（NSCLC）中HIF-1α、HIF-2α和VEGF表达,选取57例原发性NSCLC作为对照组.结果 HIF-1α、HIF-2α和VEGF蛋白在肺转移瘤及原发性NSCLC中均表达,HIF-1 α、HIF-2α和VEGF在肺转移瘤中的阳性表达例数分别为72、58和69例,阳性率分别为77.4％、62.3％和74.2％,与原发性NSCLC对比,差异有统计学意义（P＜0.05）,且在肺转移瘤中,HIF-1α表达与VEGF表达呈正相关（P＜0.05）.HIF-1α、HIF-2α和VEGF蛋白的表达与年龄、性别、原发肿瘤的大小、转移瘤的大小、肿瘤病理类型、肿瘤病理分级、肿瘤来源等临床各因素无明显相关（P＞0.05）.结论 HIF-1α、HIF-2α和VEGF在肺转移瘤中高表达,且HIF-1α表达与VEGF表达呈正相关.